利用CRISPR/Cas9技术敲除RNA甲基化酶TRDMT1基因及其功能初探

为构建TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系,利用CRISPR/Cas9系统在TRDMT1基因第1个外显子前插入BGH Ploy(A)转录终止序列,终止TRDMT1基因表达。利用重叠PCR方法合成sgRNA序列,构建TRDMT1-gRNA载体及含不同抗生素基因的同源重组载体TRDMT1-LOXN-Puro和TRDMT1-LOXP-Neo;将同源重组载体TRDMT1-LOXN-Puro、TRDMT1-LOXP-Neo及TRDMT1-gRNA、Cas9表达载体MLM3613共转染HEK293细胞;利用Puromycin和Neomycin抗生素筛选细胞,通过RT-qPCR检测TRDMT1基因转录终止效率。通过细胞生长曲线和划痕试验检测TRDMT1基因敲除对HEK293细胞增殖和迁移能力的影响。结果表明:成功构建了TRDMT1-gRNA载体及TRDMT1-LOXN-Puro、TRDMT1-LOXP-Neo同源重组载体;与正常HEK293细胞相比,试验组TRDMT1表达量仅为1%;TRDMT1基因敲除后显著影响HEK293细胞增殖和迁移。这一研究通过CRISPR/Cas9技术成功构建了TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系(HEK293-TKO),为RNA甲基化研究提供了一种有效的工具;TRDMT1基因可能与细胞的增殖和迁移有关。     

不同预处理方法对玉米秸秆酶解和乙醇发酵的影响

研究不同预处理方法对玉米秸秆酶解和乙醇发酵的影响。比较玉米秸秆经粉碎、汽爆和水热3种预处理后酶解液葡萄糖含量、酶解率、乙醇得率以及发酵液中抑制物乙酸、糠醛和羟甲基糠醛的含量,对不同预处理方法进行评价。结果表明:水热超细玉米秸秆能有效提高酶解率,在固液比2:10,酶解48h时,生成葡萄糖含量为60.6g.L-1,纤维素酶解率为63.13%,并且产生的乙酸、糠醛和羟甲基糠醛的含量很低;以此水解液发酵生产乙醇,乙醇含量为28.29g.L-1,乙醇得率为46.68%,为理论乙醇得率的91.5%。说明采用水热超细秸秆可有效提高纤维素酶解率和乙醇得率。     

不同深耕方式和秸秆还田对夏玉米植株性状及籽粒产量的影响

以深耕(常规耕作)、秸秆还(不还)田为要素组合5种不同处理,研究其对夏玉米的叶面积指数、灌浆速率(百粒重)、下部茎节、穗部性状及产量的影响。结果表明:各处理玉米籽粒在灌浆前期干重快速增长,而后平缓持续增长;秸秆还田对玉米叶面积指数影响较大,对下部茎节的节长和茎粗影响也较大;隔1年深耕+秸秆还田处理在夏玉米的各个测定指标上均优于其他处理。可见,深耕和秸秆还田可增加夏玉米籽粒干物质的积累,提高叶面积指数,从而达到增产的效果。     

探析我国鲜枣出口的制约因素及对策

<正> 我国“入世”在即,经济全球化的态势不可逆转,迫使我国农业进行重大调整,枣业内部产业结构调整已成必然。全球市场行情的晴雨表显示,鲜食枣的出口将迎来前所未有的商机。发展名、优、特枣业的商品生产,是枣业当前发展的首要任务。     

扁穗雀麦种子休眠机理的初步研究

扁穗雀麦种子形态成熟后15 d对其进行质量评定,结果表明,其千粒重为11.6 g,在常温(25～30℃)下种子发芽率为15.5％。3个月后,通过几种不同的处理,测定其处理后的发芽率,结果表明对照发芽率为35％,较15 d试验种子发芽率明显提高,说明其休眠和种子收获后的贮存时间相关,随着贮存时间的延长其休眠程度下降。KNO_3处理种子发芽率提高了6％,土床培养提高了23％,灭菌片+KNO_3处理提高了25％;H_2SO_4、灭菌片和H_2O_2均不同程度地抑制了扁穗雀麦种子的发芽,分别降低了31.25％、10％和30％。这说明种子的休眠和种子内抑制物的存在具有密切关系,但具体抑制物的种类和存在部位有待进一步研究。     

芸薹属蔬菜霜霉病研究概况及进展

霜霉病是世界范围内芸薹属蔬菜生产中常见的重要病害,病原菌为卵菌门无色霜霉属寄生无色霜霉(Hyaloperonos poraparasitica),叶片是病菌最主要的为害部位,植株发病后叶片出现枯黄症状,导致芸薹属蔬菜品质和产量下降,严重时可减产20%~60%,造成大量的经济损失,制约我国芸薹属蔬菜产业的发展。虽然霜霉病为害严重,但目前对于芸薹属霜霉病的发生规律和防治方法的认知还存在不足。本文从芸薹属蔬菜霜霉病的发生为害、防治措施、抗性遗传规律、分子标记等方面对其研究现状进行总结概括,并对未来芸薹属霜霉病的研究方向进行展望,旨在为相关研究提供参考。     

谈养猪中的数字

任何一个养猪场其经营管理的最终目的是为社会提供大量优质安全的商品肉猪,同时以取得最大的经济效益为其根本.然而事实上,许多养猪场并没有达到自己理想的状态.究其原因,主要是在养殖技术上有待进一步完善和提高.这些技术措施可概括为以下几组数字.     

高营养饲料玉米新品种内油1的选育及栽培技术

内油1是内蒙古农科院玉米研究中心以自选系M5021为母本,外引系GY302为父本组配而成的中熟、高营养玉米单交种,需≥10℃活动积温2650℃·d左右,子粒含粗蛋白12.0%,赖氨酸0.41%,粗脂肪7.76%。     

基于声发射技术的木材害虫信号特征检测

针对木材害虫声发射（AE）信号检测问题,研究杨树木段中麻点豹天牛幼虫AE信号波形特征及其信号的能量,为钻蛀害虫声音的监测提出一种新的方法。取一段具有麻点豹天牛幼虫的杨树木段,通过采样频率为500 kHz的2通道木材蠕变声发射信号采集系统采集原始AE信号。对采集到的原始信号滤波后进行小波分解,通过对各层高频信号的分析获取AE信号的频域特征,并对其进行重构与信号解析。结果表明,麻点豹天牛幼虫AE信号的主频主要集中在30 kHz附近,其信号的能量在16:00最高,反映了该幼虫在15:00-16:00较活跃。     

澳洲淡水龙虾池塘健康养殖技术

<正>广东省惠州市渔业研究推广中心于2015年引进该虾进行养殖试验,养殖12个月后,目前该虾个体普遍在75g~200g之间,最大个体达350g。现将养殖及技术和方法介绍给广大养殖户。澳洲淡水龙虾(Cherax quadricarinatus),学名为四脊光壳南鳌虾,又名红螯螯虾,原产澳大利亚,外形酷似海中龙虾,是世界上最名贵的淡水经济虾种之一。该虾体色褐绿,成熟雄虾的螯的外侧顶端有一膜质鲜红带,美丽好看,故又被称为红螯螯虾。澳洲淡水龙虾具有适应性强、食性杂、生长快、在3℃~35℃水温都能生存、耐干运、肉质好、经济价值高等特点,是继罗氏沼虾后我国引进的又一淡水