大熊猫轮状病毒CH-1株外衣壳蛋白(VP7)基因的克隆和生物信息学分析

为研究大熊猫轮状病毒(Giant Panda Rotavirus,GPRV)CH-1株外衣壳蛋白VP7基因的结构及功能,用MA-104细胞(恒河猴胎猴肾细胞)增殖GPRV,提取总RNA,运用RT-PCR扩增VP7基因,并测序,用生物信息学软件预测其功能,并构建系统进化树。结果显示成功获得了长1042bp的GPRV VP7蛋白基因(GenBank登录号GU188284)。经生物信息学分析,此序列包含1个981bp的完整开放阅读框,编码326个氨基酸;预测GPRV VP7蛋白理论相对分子质量为37354.8u,等电点为4.76,半衰期为30h,不稳定系数为26.71,总平均亲水性为-0.015,疏水性介于-2.344～3.567;1—24位氨基酸可能是信号肽序列;跨膜结构分析表明VP7蛋白有2个跨膜区,其N端和C端都位于病毒膜外区;抗原表位预测显示VP7蛋白有12个抗原决定簇;结构预测显示其可能包含2个N-糖基化作用位点,5个蛋白激酶C磷酸化作用位点、4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点、1个酪氨酸激酶磷酸化作用位点、4个N-豆蔻酰化位点、1个原核膜脂蛋白脂附着点和1个革兰氏阳性球菌表面蛋白‘锚’六肽。系统进化树分析显示GPRV VP7基因与人A组轮状病毒VP7基因的进化距离最近。本研究成功获得了GPRV VP7基因,为今后研究此基因的生物学功能以及建立该病毒的诊断方法奠定基础。     

犬肠套叠病例一例

犬发生肠套叠病例较少,现将这病例治疗过程和解剖情况简述如下,以供参考。 1 病史、症状及治疗: 1.1 第一天,犬精神萎靡不振,食欲减退,肛门周围粘有污粪,呕吐,拉稀并带血,被毛粗乱,皮肤弹性严重下降,眼结膜淡自,眼球下陷无神。温度:37.6℃,粪便潜血(+++),犬钩虫卵(+),血液检查:血色素7.5克、红细胞132万/立方毫米、白细胞6550/立方毫米,分类为嗜中性叶状占86％,嗜中性杆状占6％,淋巴8％。 治疗原则:驱虫、止泻、补液、健胃。处方:左旋咪     

复方缓释剂防治家畜主要寄生虫病的效果试验

为防治牛、羊、猪、兔等动物的多种体内外寄生虫痛，笔者等于2000年-2003年期间在全省部分县（市）推广应用了复方缓释剂。推广应用结果表明：复方缓释荆具有杀虫谱广，药效持久等特点。牛、羊、猪等动物的吸虫病（包括肝片吸虫、血吸虫、双腔吸虫、前后盘吸虫、闰盘吸虫、姜片吸虫）阳性率分剐从防治前的30．3％、52．0％、9．2％，分别下降至0．1％、0．2％、1．0％；线虫病（包括捻转血矛线虫、蛔虫、食道口线虫、奥氏奥斯特线虫、鞭虫、钩虫、猪肾虫、肺虫等）的阳性率从防治前的6．5％、63．8％、21．3％分别降至0．2％、0．1％、0．1％；绦虫病阳性率分别由防治前的3．2％、5．3％、2．5％均降至0．1％；牛原虫病（焦虫）的阳性率从治疗前的牛8．3％下降至0．1％；羊、猪、兔等动物的螨病分剐从防治前的13．5％、31．7％、73．6％，分别降至0．1％、0．2％、0．2％。与对照相比，每头牛、羊、猪、兔的平均增重分别为20kg、3kg、10kg、0．5kg；每头耕地增加耕作力3亩，每头奶牛年增乳600kg，牛增犊率为5％、羊增羔率6％、猪增加产仔数为4％，兔增加产仔数为12％，牛、羊、猪、兔增加成活率分别为10％、8％、3．9％、9．7％，牛、羊、猪、兔降低死亡率分别为5％、8．2％、5％、26％、并节省劳力和费用，取得了巨大的经济效益。     

四川省重点包虫病流行区土壤水等环境中虫卵污染情况监测

本试验通过已经建立的荧光PCR方法,对四川部分地区自然环境中的包虫虫卵进行检测,采集包虫流行地区石渠县、色达县、甘孜县、炉霍县、天全县和宝兴县的环境样本,提取样本总DNA,采用荧光PCR对细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫ND1基因进行检测;结果显示,共采集犬粪850份,阳性82份,阳性率12. 4%;土壤61份,阳性8份,阳性率13. 1%;犬毛39份,阳性3份,阳性率7. 7%;水样80份,均未检出。本次调查显示,犬粪、土壤以及犬毛均检出包虫虫卵DNA,土壤是一个不可忽视的传播因素。提示有必要加强对环境中虫卵的监测并筛选杀灭环境中虫卵消毒剂,以确保包虫病流行区域人和家畜的安全。     

伪狂犬病病毒Fa株gE基因在大肠杆菌中的表达及gE-ELISA鉴别诊断方法的建立

试验以pPGEDNA为模板，用1对分别含有EcoR I和BamH I酶切位点的伪狂犬病病毒gE基因特异性引物，扩增出约1．7kb的含完整gE基因的DNA片段；目的片段经EcoR I和BamH I双酶切后，插入原核表达载体pBV220得到重组表达质粒pBVgE，并转化大肠杆菌DH5a；对温敏诱导表达所获产物进行SDS—PAGE、Western—Blot和琼脂双扩散检测。结果表明，gE糖蛋白得到了高效表达，表达产物约占总蛋白的17％。为了鉴别伪狂犬病疫苗免疫猪和自然感染猪，用表达纯化的gE蛋白为抗原，建立了GE—ELISA方法。选定的反应条件包括GE抗原包被浓度为6.6mg／L，血清最适稀释度为1：40。测试结果：与PRV、HCV、PRRSV、JEV、SA215阳性血清呈阴性反应，而与PRV标准阳性血清呈阳性反应。这一结果表明该法特异性强、敏感性高、重复性好，可用于猪伪狂犬病的临床诊断，尤其疫苗免疫猪和自然感染猪的鉴别。     

四川省家畜包虫病流行情况调查研究

为掌握四川省家畜包虫病的流行情况,为全省包虫病综合防控工程提供基础数据.采用问卷、实地走访、座谈等方式进行基线调查;通过眼观、触摸、刀切囊肿的方法检查定点屠宰场牛、羊的肝肺包虫病感染情况,采用细粒棘球绦虫犬粪抗原抗体夹心ELISA检查犬感染情况.结果显示甘孜州牛、羊包虫病感染率分别为12.21%、11.30%,犬感染细粒棘球绦虫感染率为23.63%;阿坝州牛、羊包虫病感染率分别为4.80%、2.20%,犬感染细粒棘球绦虫感染率为20.00%.结果表明,包虫病在我省流行仍然广泛且严重,需要继续加强包虫病的防控工作.     

四川省家畜包虫病流行病学调查报告

了解当前四川省家畜包虫病流行状况,为国家防治包虫病行动计划和省包虫病综合防控工程规划的启动和实施提供基础数据。通过眼观、触摸、刀切囊肿的方法检查定点屠宰场牛、羊的肝、肺包虫病感染情况,采用细粒棘球绦虫犬粪抗原抗体夹心ELISA检查犬感染情况,采用问卷、实地走访、座谈等方式进行基线调查。若尔盖、理塘和色达3个县的牛包虫病平均感染率、羊包虫病平均感染率、犬感染细粒棘球绦虫平均感染率分别为21.27%(67/315)、29.52%(62/210)、14.57%(44/302);随机调查12个村,464个人中有12人曾患包虫病(2.59%)。"包虫病传播途径、动物能否传播给人、家犬如何驱虫、病畜内脏如何处理"4项包虫病常识的单项认知率分别为33.33%、44.17%、34.17%、38.33%。包虫病在我省部分疫区流行广泛,危害严重,犬细粒棘球绦虫的感染率和牛、羊的包虫病感染率之间存在一定的相关性。通过采取加大财政专项投入,加强传染源的控制,加强家畜防治和屠宰监督管理,加大宣传教育力度等综合防控措施才能有效地防控包虫病。     

应用皮内变态反应和γ-干扰素体外释放试验检测奶牛结核病的比较研究

本研究首先应用皮内变态反应对10200头奶牛进行结核病检测,然后应用γ-干扰素体外释放试验对前者检测出的阳性牛和可疑牛再次进行结核病检测,比较两者的阳性符合率。结果显示,应用皮内变态反应共检测出结核病阳性牛96头、可疑牛4头;γ-干扰素体外释放试验检测皮内变态反应呈阳性的96头奶牛,结果为阳性牛94头、阴性牛2头,而检测皮内变态反应为可疑的4头奶牛,结果全为阳性。结果表明,两种方法的阳性符合率为97．92％（94／96）,虽然皮内变态反应存在一定的假阳性,且费时、费力,但考虑到γ-干扰素试剂盒比较昂贵,建议用皮内变态反应作为初筛试验,γ-干扰素试验用于初筛阳性样品的复核,以提高结核病检测的准确性。     

小熊猫犬瘟热病毒感染的诊断

1999年 3月至 5月 ,重庆动物园小熊猫爆发流行了一种急性传染性疾病 ,经采用先锋霉素Ⅳ、Ⅵ ,干扰素和犬瘟热、细小病毒、猫瘟热、副流感、犬传染性肝炎五联血清进行治疗 ,未见明显效果 ,病猫全部死亡 ,死亡率达 1 0 0 %。经病理学和微生物学诊断认为本次疾病流行为犬瘟热病毒感染 ,现作报告如下。1　病史及症状本次小熊猫发病病程约 2月左右 ,传染性强 ,病猫生前有不食、精神萎顿、弓腰、拉血便和粘液性粪便等临床症状 ;血液学检查红血球减少 ,白细胞无明显增多。2　病理学诊断2 .1　病理解剖对 2只患病死亡的小熊猫解剖发现 :口腔粘膜苍白…     

川东北3市畜间布病防控情况

正为了追踪近年来川东北地区布病防控现状,研判畜间布病流行趋势,笔者历时两年,对四川广元、巴中、达州3个市进行了畜间布病防控情况调查。1 3市布病防控基本情况1.1畜间布病监测情况3个市牛平均阳性率为0.002%、羊平均阳性率为0.25%。对比两年牛羊监测情况,除巴中羊的阳性率有上升外,其余均呈下降趋势。