两种鲤鲫杂交回交子代染色体核型分析及比较

采用PHA和秋水仙素体内注射制备两种鲤鲫杂交回交子代鱼（鲤鲫杂交♀×德国镜鲤♂;鲤鲫杂交♀×鲤♂）的染色体。结果表明：两种鲤鲫杂交回交子代染色体组由150条染色体组成,按着丝粒位置染色体组型可分为四组,每个染色体小组均由三条同源染色体组成。其中鲤鲫杂交♀×鲤♂回交的染色体数目为3n=150,染色体臂数NF=234,其核...     

转基因超级鲤及子代的生长研究

用大麻哈鱼生长激素基因作转基因材料，获得了一批转基因鲤鱼和1尾“超级鲤”鱼。经分子检测证实外源基因整合到了受体鱼的基因组中并在体内表达出外源生长激素。连续多年的池塘生长实验表明，转基因鲤鱼的快速生长效应比正常鲤鱼明显，在试验鱼群体中最大个体体重比对照组群体中最大个体体重，分别提高了52．5％，46．0％，76．0％，而且由性成熟的超级转基因鲤鱼繁殖的F1代和F2代鱼，仍表现出快速生长的特性。     

影响外源基因在鱼染色体中整合因素的研究

通过微注射法将不同构型和不同剂量的全鱼基因（ｃＭＴｓＧＨ，鲤鱼ＭＴ启动子与大麻哈鱼ＧＨ基因）导入不同发育时期的鲫鱼受精卵，研究其孵化率；孵出鱼苗后．通过斑点杂交、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，研究其整合率；并对受精卵去壳与未去壳导入全鱼基因后比较其整合率。结果表明：１显微注射外源基因后以单细胞前、中期孵化率最高．与对照组比差异不显著（Ｐ＞０．０５）．与其它组比较差异极显著（Ｐ＜０．０１）；２．综合孵化率与整合率．外源基因导入的最佳时期是受精卵单细胞后期；３．去壳卵与非去壳卵注射外源基因后整合率差异不显著．但孵化率有显著差异（０．０１＜Ｐ＜０．０５）；４、外源基因整合率随着注射ＤＮＡ拷贝数的增加而增大．孵化率则相反：５．线性ＤＮＡ整合率高于环形ＤＮＡ整合率。     

稀有鮈鲫（Gobiobypris rarus）作为转基因模型鱼的研究

转基因动物的大部分实验都是用实验室的小鼠来完成的，因为它具有形体小，易饲养生活周期短，后代数日多的优点。转基因鱼研究也需要一种饲养条件要求简单，性成熟早，繁殖周期短，产卵易控制的小型鱼类作为实验模型鱼，以能方便地测定构建的基因表达，转录功能等，日本几个实     

鲤雌核发育子代基因的杂合度分析

通过热休克法抑制第一次有丝分裂(抑制第一次卵裂)和减数分裂(抑制第二极体排除),分别获得鲤(Cyprinus carpio L.)的2个雌核发育家系.利用13对具有高多态性的微卫星分子标记,分别对2个雌核发育家系的观测杂合度(Ho、期望杂合度(He)、等位基因频率(P)和有效等位基因数(Ne等进行遗传背景调查.结果表明,抑制第一次有丝分裂家系的等位基因频率为0.063～1.000,平均观测杂合度为0.22,平均期望杂合度为0.24,平均有效等位基因数为1.41,该家系在6个微卫星座位上表现为纯合子,在7个微卫星座位上表现为杂合子,其中位点MFW4完全表现为杂合子;抑制减数分裂的等位基因频率为0.056～0.889,观测杂合度的平均值为0.37,期望杂合度的平均值为0.47,平均有效等位基因数为1.93,该家系中没有得到完全纯合的个体,其中在2个位点上全部表现为杂合子.在所分析的鲤雌核发育群体中,有3个基因座位(HLJ034、HLJ044和HLJ071)有重组现象,重组率为20.00%.综合上述结果推断,鲤2个雌核发育家系在个体和群体上都具有一定的基因杂合性.[中国水产科学,2009,16(1):47-53]     

鲤鲫杂交(♀)×鲫(♂)回交子代的形态特征研究

利用雌性鲤鲫杂交与雄性鲫鱼回交,制备了鲤鲫杂交回交子代鱼,并对其1龄鱼的形态特征和内部器官结构进行了测定。其主要性状为：回交子代的背鳍条Ⅲ,15～18；臀鳍条Ⅲ,4～6；侧线鳞27～36；侧线上鳞和侧线下鳞同为5～6；鳃耙28～33；体长为体高的(2.35±0.11)倍,为头长的(3.33±0.13)倍,为尾柄长的(6.36±0.54)倍；头长为眼径的(4.54±0.20)倍；为眼间距的(1.74±0.07)倍；为尾柄高的(1.96±0.10)倍；尾柄长为尾柄高的(0.90±0.28)倍；体高为头高的(1.59±0.09)倍。结果表明,该回交子代鱼在可数和可量性状上都有个别性状产生变易,但大多数性状相对比较稳定。     

转生长激素基因鲤鱼的生长研究

本报导了生长激素基因对鲤鱼生长的影响。经池塘对照实验表明，转生长激素基因鲤鱼的快速生长效应比正常鲤鱼明显，而且由转生长激素基因阳性性成熟鲤鱼经人工催产繁殖的子一代群体中，仍表现出快速生长的特性。这一结果，为能获得一个转外源生长激素基因并具快速生长特性的遗传稳定的转基固鲤鱼核心群体提供了可靠的数据。     

应用RNAi技术构建的转基因鲤的检测分析

将构建携带H1启动子的肌肉生长抑制基因的真核表达载体,通过显微注射技术导入鲤受精卵核区附近,获得了一批具有RNAi表型的转基因鲤,PCR和分子杂交检测证实外源基因整合到受体鱼的基因组中,阳性率为32.78%;一龄鱼的生长实验表明,转基因鲤比普通鲤平均生长快0.99倍,其体高和体厚分别平均增长0.22和0.26倍,其中有31.82%的群体平均体厚是普通鲤的1.6倍。结果显示,该质粒表达的发夹环型dsRNA可以有效降解其转录产物,对阻抑肌细胞中同源基因的表达、鲤肌肉的再生能力增强起到了重要作用。这种抑制作用表现为鲤背部肌肉增厚、体质量增加,说明该基因经转录产生的双链RNA在鲤体内具有RNAi效应。RNAi技术为获得具有特殊功能的转基因鲤提供了新的手段。