猪CD127流式单克隆抗体的研制

[目的]研制出猪CD127(调节因子IL-7受体α链)流式单克隆抗体,为研究分析猪淋巴细胞亚群,尤其是猪Treg细胞亚群提供流式细胞分析抗体,也为进一步探究猪抗病性状与免疫机制间的关系打下基础.[方法]克隆猪CD127基因片段,通过原核载体诱导表达出相应的融合蛋白,以纯化后的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,然后取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,综合ELISA和流式细胞仪检测筛选出亚克隆抗体,并采用Western blotting验证所得亚克隆抗体能否与猪淋巴细胞上的CD127特异性结合.[结果]猪CD127基因cDNA全长1999 bp,第49~1428 bp为开放阅读框(ORF),编码459个氨基酸,其中前21位氨基酸为信号肽,成熟肽N端第1~219位氨基酸为胞外蛋白,第220~242位氨基酸为跨膜蛋白,第243~459位氨基酸为胞内蛋白.以pET28a和pET32a原核载体诱导表达CD127胞外片段可获得大小介于34~43 kD的融合蛋白,经Ni亲和层析柱纯化后用于免疫Balb/c小鼠,6只免疫小鼠血清中的多克隆抗体均能对猪淋巴细胞中的CD3阳性细胞(CD3+)进行共标记,其中以M2和M4两只免疫小鼠抗血清对CD3+的共标记效果较优,分群清晰;但流式细胞仪检测发现,仅2.3%的CD3+能与M2混合池培养基上清液中的分泌抗体共标记,而67.0%的CD3+能与M4混合池培养基上清液中的分泌抗体共标记,且分群清晰.从M4混合池中筛选出6株效价稳定的亚克隆细胞株(1E2、1D8、2F3、2F8、3C6和4E1),且以1D8、2F3、2F8和3C6亚克隆抗体标记的CD3+较多,其培养基上清液中的分泌抗体在猪胸腺和肌肉样品中均能检测出大小约50 kD的单一目的条带.[结论]制备获得的猪CD127流式单克隆抗体可与T淋巴细胞表面的IL-7受体特异性结合,同时在流式细胞仪检测过程中可用于猪Treg细胞亚群检测.     

大约克专门化父系选育进展报告

大约克专门化父系经 ４个世代的半封闭群体继代选育,主要生产性能指标取得了显著进展,全面完成和超额完成选育任务指标,后备猪生长发育、肥育性能、繁殖性能及配套利用效果,１～４世代均有明显提高和改进。４世代与１世代比较,６月龄后备公猪作重、体长由９０．４ｋｇ、１１７．６ｃｍ提高到９１．８ｋｇ、１１９．８ｃｍ,后备母猪由８０．８ｋｇ、１１４．７ｃｍ提高到８８．３ｋｇ、１１８．８ｃｍ;肥育猪９０ｋｇ体重日龄由２０９．８ｄ缩短到１７９．６ｄ,比选育指标缩短０．４ｄ．日增重由４８３．７ｇ增加到 ６８２ｇ,耗料指数由３．３６下降到 ２．８８,比选育指标下降０．３２,胴体瘦肉率由５９．６５％提高到６３．６７％,超选育指标１．６７个百分点;ＰＨ值、失水率等主要肉质指标有所改善;经产猪产仔数１２．５４头,比基础群提高０．４５头;与Ⅲ系配套生产的杂优猪日增重６８３ｇ,耗料指数３．０９,胴体瘦肉率５８．１９％。     

5个重庆地方猪种遗传多样性的微卫星分析

为了分析5个重庆地方猪种的遗传多样性和系统发生关系,采用FAO-ISAG联合推荐的27个微卫星标记,以有效等位基因数、期望杂合度和多态信息含量等遗传参数为指标,评估了品种内遗传变异。计算了F统计量、Nei氏遗传距离(DA)和Nei氏标准遗传距离(DS)并进行UPGMA和NJ聚类分析及主成分分析,进而探讨了品种间的遗传分化和亲缘关系。结果,27个微卫星座位共检测到542个等位基因,其中43个等位基因为单一品种所特有。5个猪种的遗传多样性丰富:有效等位基因数(Ne)在9.4933～11.0280之间,期望杂合度(He)在0.8897～0.9091之间,多态信息含量(PIC)在0.8689～0.8926之间。F统计量分析表明,重庆地方猪种遗传分化明显(P0.001),各群体内存在一定程度的近交。2种聚类方法以NJ法更为可靠。5个猪种聚为两类,荣昌猪、渠溪猪和合川猪为一类,罗盘山猪和盆周山地猪为一类。相关性分析表明,遗传距离与地理距离间无显著的相关(P0.05)。该研究结果为重庆地方猪种的保护和利用提供了重要的理论依据。     

荣昌猪瘦肉型品系肥育性能研究

本研究对荣昌猪瘦肉型品系０至５世代共２４６头同胞肥育试验猪进行了肥育性能测定。结果表明，通过六个世代的选育，荣昌猪瘦肉型品系具有优良的胴体品质及较快的生长速度，并保持了原种荣昌猪肉质优良的遗传特性，胴体瘦肉率、肩腰荐三点均膘、后腿比例、胴体长分别由０世代的５１．７３％、２．６３ｃｍ、３１．３９％、８４．７５ｃｍ提高（降）至５世代的５５．００％、２．０６ｃｍ、３２．３９％、８７．２５ｃｍ，分别提高（降低）了６．３％、２１．７％、３．２％、２．９％；２０～９０ｋｇ日增重、每增重１ｋｇ耗料、达９０ｋｇ体重日龄分别由０世代的４５０．０ｇ、４．１７ｋｇ、２３４．９天提高（降）至５世代的５９８．８ｇ、３．３９ｋｇ、１８９．５天．分别提高（降低）了３３．５％、１９．３％、１９．３％。     

谈谈猪配套系选择与培育的几个问题

阐述了“配套系”的含义、特点以及主要利用模式与利弊分析，论述了三系配套利用方式的经济性、合理性；阐述了配套系培育的基本原则、培育方法以及三系配套的遗传组成与育种指标体系；介绍了配套系推广利用的四种主要途径。     

南方中小规模猪场的经营与管理(三)

<正>8成本管理8.1成本结构饲料、兽药、人工、劳保福利、水电、疫苗、污物处理、宣传、培训、招待、管理、折旧等费用构成猪场的成本。8.2养猪成本费用分析     

根据育种目标制订综合选择指数

本文利用育种目标制订综合选择指数 ,无须确定性状的经济加权值 ,将该法应用于“荣昌猪瘦肉型品系选育”中 ,其综合选择指数为 :I =- 0 1 5 2 6X1(背膘厚 ) 0 0 0 84X2 (日增重 ) 1 4 4 40 7X3 (体长指数 ) ,间接选择瘦肉率 (Y)。经五个世代的选育 ,三个主选性状及间接选择性状的每代进展分别为 :- 0 1 6 6 (X1)、2 9 8(X2 )、0 0 2 (X3 )和 0 6 5 4(Y) ,均超过育种目标 (- 0 0 93、1 0、0 0 1 5和 0 38) ,提前一个世代完成计划。实践证明该法简便易行 ,准确性高 ,选择效果非常理想 ,可在动物育种中普遍采用。     

当前我国土猪养殖发展的瓶颈及对策

猪肉在我国消费者的饮食结构中占有重要地位,与其他肉类制品相比,具有无可比拟的优势。随着人民生活水平的不断提高,消费者对健康、营养、美味、安全猪肉的需求量逐渐增大,同时,中国市场也涌现了如壹号土猪、精气神、巴山土猪等土猪养殖企业。虽然近年来土猪养殖企业逐渐增加,养殖量逐渐增多,但其发展仍存在许多问题。本文就目前我国土猪养殖企业发展中存在的问题进行分析,同时提出一些土猪品种开发、利用的思路。     

论新建猪场的准确定位

从规划者的角度出发,分别从新建猪场性质的确定、规模的确定、品种品系的确定、生产工艺的确定等4方面进行定位分析,从猪场的性质上将猪场定位分为种猪场、商品猪自繁自养场或母猪代养场、商品仔猪繁育场、专业育肥场或代养场、二次育肥场等;从猪场规模上将猪场定位分为大型规模化猪场、中型规模化猪场、小型规模化猪场;从养殖品种品系上将猪场定位分为瘦肉型猪猪场和特色地方猪猪场;从生产工艺上将猪场定位分为连续式生产工艺猪场和批次化生产工艺猪场,批次化生产工艺猪场重点介绍了一周批次和三周批次生产工艺。