TK基因重组缺陷山羊痘病毒构建及其生物学特性鉴定

[目的]利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒（GTPV）毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株.[方法]采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因（ORF56）及其侧翼基因组片段,在TK基因内部插入报告基因EGFP抗性基因gpt达盒,构建GTPV重组转移载体pTK-Eg.将重组转移载体pTK-Eg与GTPV AV41株共转染Vero细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,鉴定其生长特性和遗传稳定性,并接种山羊评价其安全性和免疫原性.[结果]成功构建获得一株TK基因缺陷的重组病毒vTK-Eg.与亲本毒株GTPV AV41相比,vTK-Eg的生长特性及其形成的细胞病变均未发生显著改变,只是毒价略微下降100.5个数量级;在原代牛睾丸（BT）细胞上连续传代,至少在10代内保持遗传性状和病毒滴度稳定.接种vTK-Eg的山羊精神和食欲均正常,接种后体温升高和局部反应的严重程度均较接种亲本毒株GTPV AV41的山羊有所降低;vTK-Eg与GTPV AV41株诱导山羊产生的GTPV中和抗体水平无明显差异（P＞0.05）.[结论]构建的TK基因重组缺陷病毒vTK-Eg具有良好的遗传稳定性和免疫原性,较亲本毒株其安全性也有所提高,可作为研制GTPV基因工程弱毒疫苗和活载体疫苗的备选毒株.     

“建章·聚智·赋能”三引擎驱动生猪产业创新人才培养

<正>2020年10月,重庆三峡职业学院与重庆市畜牧科学院牵头,汇聚国内外优势科研院所与骨干企业,共同组建“重庆生猪产业协同创新研究院”（见图1）。研究院坚持需求牵引和目标导向,面向若干战略必争领域和经济社会发展的重大需求,融合相关科研机构,优化科研布局,有效解决低水平重复、同质化竞争、碎片化扩张等问题。加强基础前沿探索研究,提升原始创新能力;加强政、产、学、研、     

广西地区禽致病性大肠杆菌的耐药性分析

禽致病性大肠杆菌(APEC)是一种能引起鸡、火鸡和其他鸟类肠外感染的致病性大肠杆菌,可以导致肉鸡气囊炎、败血型全身感染、蜂窝织炎和蛋鸡输卵管炎、腹膜炎。为了了解广西地区禽致病性大肠杆菌的耐药表型以及耐药基因的携带情况,本实验室对2019年从广西分离到的69株APEC采取K-B药敏纸片法进行药敏试验,药敏结果显示,69株APEC对氧氟沙星(56.5%)、恩诺沙星(69.6%)、氟苯尼考(79.7%)、氨苄西林(91.3%)、四环素(98.6%)耐药率较高,而对美罗培南、丁胺卡那霉素、呋喃妥因均不耐药;其中,多重耐药现象严重,对10种抗菌药物以耐4种、5种、6种的情况居多。同时用PCR扩增的方法对其耐药基因,包括碳青霉稀类、β-内酰胺类、氨基糖苷类、黏菌素类、喹诺酮类、四环素类在内的6大类共计17种耐药基因进行了检测。特别值得关注的是,发现了7株携带mcr-1基因的多黏菌素耐药APEC。药敏纸片法检测菌株的耐药表型和耐药基因存在一定关联度。本研究可为养禽场临床用药提供参考,同时为减缓耐药菌传播、降低对人类健康和公共卫生安全威胁提供依据。     

电梯超载保护装置失效原因分析及处理

阐述了超载保护装置的工作原理，同时通过一起电梯超载保护装置失效的案例分析，分析了造成超载失效的原因，指出了相应的处理措施，为今后的检验工作起指导作用。     

生物技术在农业育种中的应用探讨

随着我国社会经济的不断发展,农业经济发展也逐渐加快,尤其是将生物育种技术逐渐运用到了农业育种中。通过使用生物技术,不仅可以突破传统育种技术的限制,而且可以实现新品种的培育目标,从而促进我国农业育种的快速发展。基于此,针对生物技术在农业育种中的应用进行了简要阐述,并提出几点个人看法,仅供参考。     

惠州市无公害大蒜高产标准化栽培技术要点

以产地环境、生产技术、采收、病虫害防治规程等为主要内容,制订了一套较系统的无公害大蒜高产标准化栽培技术规程。该规程的推广应用对提高惠州市无公害大蒜标准化生产技术水平、改善大蒜品质、提升大蒜生产的质量安全具有积极的推动作用。     

动物防疫监督证章标志的计算机管理

利用Foxpro2．5bforWindows开发出的广西动物防疫监督证章标志管理系统,分为入库管理、出库管理、库存管理和转帐管理四大模块,可完成各种日常管理工作。操作简便,系统有较高的安全性、容错性和可维护性。     

多重PCR快速诊断猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型与猪细小病毒方法的建立

利用PrimerPremier5．0及DNAstar软件对猪伪狂犬病毒gB基因、猪圆环病毒2型ORF2基因和猪细小病毒VP2基因的保守区进行引物设计,选出扩增序列为猪伪狂犬病毒（373bp）、猪圆环病毒2型（430bp）和猪细小病毒（495bp）的3对引物．敏感性和特异性试验结果表明,mPCR对3种病毒的核酸检测限量从猪伪狂犬病毒至猪细小病毒分别为1．62×10-6、1．47×10-6和1．28×10-4 ng,对灭菌双蒸水、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒eDNA和猪瘟病毒eDNA的mPCR扩增结果均为阴性．mPCR可作为临床上猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型感染和猪细小病毒病的病原学快速诊断方法．     

TaqMan探针实时荧光定量PCR快速鉴定欧洲樱桃绕实蝇

为建立快速、灵敏检测欧洲樱桃绕实蝇的实时荧光定量PCR方法,本研究利用欧洲樱桃绕实蝇及其近似种类的线粒体DNA(mtDNA)中COI基因序列差异,设计筛选特异性引物和探针OYF/OYR/OYP,并对引物及探针特异性和灵敏性进行检测。结果表明,设计的引物和探针能够特异性检测出欧洲樱桃绕实蝇,灵敏度为0.001 ng/μL。     

卵叶韭快繁增殖培养技术

对卵叶韭进行了组织培养,比较不同外植体的诱导效果,通过正交试验对不同的组培配方进行讨论,分析不同因子对卵叶韭组培效果的影响。结果表明：采用茎段为外植体,使用配方为MS+KT 1 mg/L+NAA 1 mg/L+IBA 0.3 mg/L+2,4-D 3 mg/L的培养基培养效果最佳。