抗A型塞内卡病毒天然产物筛选及颉颃作用机制研究

【目的】从天然产物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)活性的天然产物并研究其颉颃作用机制。【方法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)与BHK-21细胞,结合荧光素酶高通量筛选技术,建立抗SVA药物体外筛选平台。从天然产物库中筛选浓度为10μmol/L时具有抑制荧光素酶活性效应的天然产物,并进一步利用实时荧光定量RT-PCR验证其抑制活性,通过细胞毒性试验确定其最大无毒浓度。选择病毒感染周期的吸附、入胞、复制、组装释放4个主要过程,利用实时荧光定量RT-PCR、50%组织细胞感染量(TCID₅₀)测定等进行天然产物分子颉颃机制研究。【结果】从包含560种天然产物的分子库中筛选出16种候选抗SVA活性分子,通过实时荧光定量RT-PCR及细胞毒性检测,鉴定出4种安全、有效的天然产物,分别为20S-原人参三醇((20S)-protopanaxatriol)、蕈青霉素(paxilline)、方胆碱(fangchinoline)、竹红菌乙素(hypocrellin B)。作用机制研究显示,20S-原人参三醇能抑制SVA感染过程中的...     

袋鼠源隐孢子虫分离株分子鉴定与种系发育关系分析

【目的】对云南某动物园袋鼠粪样中分离到的1株隐孢子虫分离株进行种/基因型的分子鉴定,为云南动物园的袋鼠隐孢子虫病防控提供理论依据。【方法】针对隐孢子虫小亚基核糖体RNA基因序列设计引物,进行巢式PCR扩增,并对扩增产物进行测序和序列比对;使用DNAMAN和MEGA7.0等软件进行同源性分析并构建系统发育进化树,以确定该袋鼠源分离株与其他源隐孢子虫间的亲缘关系。【结果】成功扩增出隐孢子虫阳性片段。BLAST结果表明：获得的袋鼠源隐孢子虫分离株与鼠隐孢子虫(Cryptosporidium muris)一致,同源性可达100%。种系发育进化树表明：该分离株与鼠隐孢子虫处于同一分支,亲缘关系最近,属于胃寄生隐孢子虫的鼠隐孢子虫。【结论】该园袋鼠存在隐孢子虫感染,鉴定为具有人兽共患潜能的鼠隐孢子虫。本研究首次报道了中国袋鼠感染鼠隐孢子虫。     

红河州奶牛粪样寄生虫调查与分析

为了解红河州奶牛消化道寄生虫感染情况,对该州四个奶牛养殖场进行现场调研,随机采集新鲜粪样64份,通过漂浮法和沉淀法检查寄生虫,结果表明,A奶牛合作社的线虫卵感染率为28.6%,B奶牛合作社为40%,C、D奶牛场均没有检查到线虫虫卵,平均感染率为15.6%;A奶牛合作社的吸虫虫卵感染率高达71.4%,B奶牛合作社为60.0%,C奶牛场为46.7%,D奶牛场为30.0%,平均感染率为50.0%。结果说明,红河州四个养殖场吸虫卵阳性率较高,线虫卵阳性率相对较低。     

云南省玉溪市猪弓形虫病血清学调查

为了解猪弓形虫病在玉溪市的流行情况,2008年8月份-2009年3月份共采集猪血液样品450份(其中从屠宰场采集猪血液样品329份,从万牧养猪场采集妊娠母猪血液样品35份,从大营街种猪场采集猪血液样品86份)、猫血液样本15份,在实验室分离血清,采用间接血凝试验(IHA)检测血清中弓形虫抗体效价,被检血清抗体效价大于或...     

猪附红细胞体病的研究概况

附红细胞体（Eperythrozoon）最早在1928年由Schlling和Dingen从啮齿动物血液中发现，目前因该病原引起的附红细胞体病（Eperythrozoonosis）已广泛的流行于许多国家和地区，它可感染猪、牛、羊、马、骆驼、驴、兔、猫、鼠、犬、狐、鸡等多种动物，而且它还是人畜共患病。在家畜中，以猪附红细胞体病的发生最为普遍，其最早在1950年就有相关的报道。近年，在我国很多地区都有报道。另外，猪附红细胞体呈现的病症与猪瘟、猪丹毒、蓝耳病、仔猪副伤寒和弓形虫病等有很多相似之处，这无疑给确诊带来一定的困难。在兽医临床工作中，对该病病原的检测已从简单的血液涂片镜检，发展到了应用酶联免疫吸附试验（ELISA）、特异PCR、DNA杂交、基因芯片等技术进行准确高效的诊断和病原定位。因此，深入全面了解猪附红细胞体病的病原体、致病机理、检测技术等方面的知识，将为制定完善综合的防制措施奠定良好的基础。     

Pseudoterranova decipiens复合种的几个姊妹种在线粒体nad4序列的差异

本实验用PCR扩增了来自世界各地的P．decipiens复合种共6个姊妹种的线粒体NADH脱氢酶亚单位Ⅳ基因（nad4），并进行了克隆、测序和序列分析。结果显示，PdOe与Pd为同一种，nad4基因序列种内的变异为0．7％，种间差异为2．4～13．2％。种间差异远大于种内变异，能提供准确的遗传标记。可用于P．decipiens复合种姊妹种的鉴定。这些结果有助于P．decipiens复合种的生活史、传播途径、流行病学、种群遗传学的研究和其所引起的相关疾病的诊断。     

圈养金丝猴鞭形毛首线虫的消长观察

金丝猴鞭形毛首线虫(鞭虫)(T.trichurus)病是一种全球分布,能感染多种动物的寄生虫病,全年均可发生.金丝猴对鞭形毛首线虫极为易感,发病后对动物的健康影响极大,而且虫体在动物盲肠中很难驱净.临床主要表现为精神沉郁,体温升高,食欲减少,稀便,腹泻,排血色水样粪便,并附有黏液,贫血消瘦,严重的可致死[1].