乐斯本防治蔬菜害虫田间药效评价

乐斯本防治蔬菜害虫田间药效评价武汉市蔬菜科学研究所（４３００６５）邹丰，朱树勋，司升云，黄来春，刘小明乐斯本４０．７％乳油是美国陶氏公司生产的一种高效广谱性有机磷杀虫剂，能有效地防除棉花、水稻、蔬菜、果树等作物的多种害虫。多年来、我们对乐斯本防治蔬菜...     

卡死克,抑太保防治蔬菜害虫的效果

卡死克(酰基尿乳油)、抑太保是两种新型的昆虫生长调节剂,它通过抑制昆虫几丁质酶的活性使昆虫无法形成新表皮而致畸死亡。昆虫生长调节剂主要对害虫的幼虫发生作用,使其在蜕皮发育过程中,老皮蜕不下而变黑死亡,或老皮蜕下一半,新表     

油茶芽苗砧嫁接技术

油茶Camellia oleifera别名：茶子树、茶油树、白花茶;油茶属茶科,常绿小乔木。油茶是原产我国的乡土树种,与油橄榄、油棕、椰子并称为世界四大木本油料树种。油茶又是一种长寿树种,具有一次种植、多年受益的特点。发展油茶产业,一举多得,对于推进山区综合开发、促进农民就业增收、维护国家粮油安全、改善人民健康状况、加快国土绿化进程都具有十分重要的作用。     

雏鸡免疫堆型艾美球虫后外周血T淋巴细胞亚群CD_4~ T和CD_8~ T的动态变化

为研制鸡球虫早熟系疫苗,探讨早熟系诱导的细胞介导免疫机理,实验采用流式细胞仪(FACS)检测堆型艾美球虫早熟株免疫雏鸡后,在不同时间外周血T淋巴细胞亚群CD4 T和CD8 T的动态变化。试验结果表明,免疫组CD4 T数量动态变化显著高于不免攻毒组(P<0.05),免疫后16天达到高峰;不免攻毒组攻毒后上升速度较快,于攻毒后1周达到高峰。CD4 T的数量变化,说明它在启动细胞免疫应答和控制再次感染中发挥着作用。免疫组CD8 T数量动态变化亦显著高于不免攻毒组(P<0.05),免疫组和不免攻毒组CD8 T数量均在攻毒后1周达到最大值,表明CD8 T在抵抗感染中起作用。各组间CD4 T/CD8 T比值无明显差异,但免疫组CD4 T/CD8 T变化较为平缓。上述堆型艾美球虫早熟系免疫雏鸡后,CD4 T和CD8 T在不同时间数量的增减及其比值的变化,将为早熟系疫苗在生产实践中的合理使用提供理论依据。     

稳定表达IL-10的PK-15细胞的构建及其在PCV2增殖中的应用

【目的】 研究白细胞介素-10（IL-10）对猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）复制的影响,筛选PCV2高感染性细胞系和提高PCV2病毒滴度,为后续疫苗的研发及IL-10在PCV2感染中的作用研究提供参考。【方法】 利用PCR技术扩增猪IL-10基因,将目的基因与慢病毒表达载体（pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP+Puro）进行连接,获得重组质粒pCDH-CMV-IL-10,将其与包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染293T细胞进行慢病毒包装。用收集的慢病毒液感染PK-15细胞,经嘌呤霉素筛选后得到细胞株PK-15-IL-10,对照组细胞分别命名为PK-15-pCDH和PK-15。PCV2感染PK-15-IL-10、PK-15-pCDH和PK-15细胞株后,在24、48和72 h分别收集细胞液,利用CCK-8检测细胞活力。利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测IL-10基因的表达水平和PCV2的复制情况;利用间接免疫荧光试验（IFA）观察PCV2在细胞中的复制情况及测定PCV2的病毒滴度（TCID₅₀）。【结果】 试验成功构建了重组质粒pCDH-CMV-IL-10,将其与包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染293T细胞后,48 h时细胞状态最好,荧光最强。分别收集共转染48和72 h的慢病毒液上清感染PK-15细胞,pCDH-CMV-IL-10组的荧光最强,将其在嘌呤霉素浓度为2.5 μg/mL的完全培养基中继续培养,获得仍有绿色荧光的稳转细胞株。实时荧光定量PCR和Western blotting检测发现,IL-10基因在pCDH-IL-10细胞株中的表达量明显高于对照组PK-15-pCDH和PK-15,PCV2的拷贝数增加了4倍,复制能力增强,且将病毒稀释连续传3代后,PK-15-IL-10细胞中的PCV2极显著高于PK-15细胞（P<0.01）。细胞增殖试验表明,猪IL-10基因在细胞中过表达对细胞活力无明显影响;IFA结果表明,PK-15-IL-10细胞中的荧光比PK-15细胞更强,PCV2在PK-15-IL-10细胞中的TCID₅₀在感染后48 h极显著高于PK-15细胞（P<0.01）。【结论】 本研究成功构建了pCDH-CMV-IL-10的慢病毒表达载体,并利用其感染PK-15细胞,继续培养后筛选出过表达IL-10的PK-15-IL-10细胞株,用PCV2感染该细胞株能促进PCV2在PK-15细胞中的复制。本试验结果为后期疫苗研究提供了参考,为进一步研究IL-10对PCV2在PK-15细胞中复制的影响奠定了基础。     

云南某警犬基地犬肠道寄生虫病的调查与防控建议

<正>警犬感染寄生虫后,消耗大量营养物质,造成犬只生长发育受阻,导致消瘦、贫血、继发感染其他病原体,严重的引起死亡,某些人犬共患寄生虫,对犬和带犬民警的健康造成威胁。目前,尚未见关于云南地区警犬寄生虫病的报道。为此,本调查选择了云南某警犬基地开展警犬肠道寄生虫病的调查,以了解其     

泸西县奶山羊粪样寄生虫调查及防制建议

寄生虫不仅夺取羊的营养,破坏组织,使其生长发育受阻,导致产奶量下降,还可导致其他病原体侵入,引起其他病的发生和流行,常引起慢性、消耗性生长发育不良,甚至大批死亡,已经成为影响养羊经济效益的主要疾病[1]。目前,针对奶山羊寄生虫的专题调查研究较少,云南省仅有2篇病例报告。     

中甸牦牛消化道寄生虫初步调查及其防制建议

牦牛与藏族人民的物质生产、文化生活和宗教活动等密切相关,具有重要的生态、经济和社会价值。中甸牦牛是我国的12个牦牛地方品种之一,体格粗壮结实,具有耐高寒、耐粗饲、采食力和抗病力强等优良特性,乳肉品质优良,有一定产毛量[1]。牦牛是香格里拉地区特色生态旅游的重要景观之一,牦牛肉和牦牛奶深受当地民众和游客喜爱。     

云南省部分猪场病料猪圆环病毒3型PCR检测及克隆测序

为了解猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)在云南省的流行及遗传进化情况,2020年10—12月收集云南省部分猪场疑似病料共24份,采用PCR方法进行PCV3病原检测;选取PCV3阳性扩增产物进行克隆测序,并将测序结果与16株国内外参考毒株进行ORF2核苷酸序列同源性分析。结果显示:24份病料样品中检出阳性5份,阳性检出率为20.8%;克隆出的阳性扩增产物(YNJS-2020)ORF2核苷酸序列和国内外参考毒株的同源性较高,为97.4%～98.9%,其中与西班牙毒株MF80572000同源性最高,与安徽14-201611毒株同源性最低。结果表明,云南省存在PCV3流行,且流行毒株与国内外其他毒株遗传关系较近,但也有一定差异。结果提示,云南省应加强对PCV3的监测及其流行的控制,避免PCV3大面积流行。本研究为云南省PCV3基因型分析和疫苗研究提供了一定的数据基础。     

抗A型塞内卡病毒天然产物筛选及颉颃作用机制研究

【目的】从天然产物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)活性的天然产物并研究其颉颃作用机制。【方法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)与BHK-21细胞,结合荧光素酶高通量筛选技术,建立抗SVA药物体外筛选平台。从天然产物库中筛选浓度为10μmol/L时具有抑制荧光素酶活性效应的天然产物,并进一步利用实时荧光定量RT-PCR验证其抑制活性,通过细胞毒性试验确定其最大无毒浓度。选择病毒感染周期的吸附、入胞、复制、组装释放4个主要过程,利用实时荧光定量RT-PCR、50%组织细胞感染量(TCID₅₀)测定等进行天然产物分子颉颃机制研究。【结果】从包含560种天然产物的分子库中筛选出16种候选抗SVA活性分子,通过实时荧光定量RT-PCR及细胞毒性检测,鉴定出4种安全、有效的天然产物,分别为20S-原人参三醇((20S)-protopanaxatriol)、蕈青霉素(paxilline)、方胆碱(fangchinoline)、竹红菌乙素(hypocrellin B)。作用机制研究显示,20S-原人参三醇能抑制SVA感染过程中的...