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为了克隆和田羊肌肉生长抑制素(Myostatin)蛋白成熟肽编码基因片段,并对其进行原核表达,试验根据绵羊Myostatin蛋白成熟肽基因序列从GenBank(登录号为NM001009428)中设计并合成1对引物。以塔里木大学动物基因工程实验室构建的和田羊Myostatin基因全序列的克隆载体为模板,采用PCR方法特异性扩增和田羊Myostatin蛋白成熟肽基因片段;将其克隆到pMD18-T载体中,构建克隆质粒pMD18-T-Ms;经PCR和双酶切分析鉴定,将阳性克隆送上海生工生物工程技术服务有限公司测序验证;测序验证后双酶切pMD18-T-Ms克隆质粒和pET-28a(+)表达质粒,进一步构建pET-28a(+)-Ms重组表达质粒。将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导后表达Myostatin蛋白成熟肽,通过SDS-PAGE电泳分析鉴定表达的重组蛋白。结果表明:PCR特异性扩增出1条长度约为330 bp的条带;序列测定分析显示和田羊Myostatin蛋白成熟肽基因片段长327 bp,与GenBank上绵羊Myostatin蛋白成熟肽编码基因从799~1 125 bp片段的核苷酸同源性为100%,所表达的Myostatin蛋白成熟肽分子质量约为14.7 ku。试验成功克隆和田羊Myostatin蛋白成熟肽编码基因片段,构建了其克隆质粒pMD18-T-Ms和重组表达质粒pET-28a(+)-Ms,并在大肠杆菌中获得有效表达。 相似文献
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53.
本研究以耐黄萎病的海岛棉品种"新海17号"为材料,分析了接种黄萎病菌8 h和24 h与接菌前叶、根器官中与激素信号路径相关的差异表达基因数量变化。结果发现与接菌前相比,在接菌8 h的叶器官中注释到激素信号路径中的差异表达基因最少(只有25个),根器官中则有546个;在接菌24 h的叶器官中和根器官中分别有629和729个差异表达基因注释到激素代谢路径。同时叶器官中与激素信号路径相关的下调基因略高于上调基因;而在根器官中,与激素信号路径相关的下调基因则显著高于上调基因。这些与激素信号路径相关基因的表达变化将为植物对病原菌侵染响应的研究提供生理生化和分子基础。 相似文献
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昭阳区是云南夏秋反季冷凉型蔬菜生态最适宜区,有着悠久的栽培历史,生产的蔬菜在省内外市场有较好的声誉。产品远销深圳、四川、贵州、重庆等省市,大蒜、辣椒、白菜、生姜等远销东南亚国家,其中蒜苔、辣椒深受外商青睐,是我区蔬菜出口创汇产品之一。 相似文献
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猪流行性腹泻预防及诊断研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
猪流行性腹泻是由一种猪流行性腹泻病毒引起的高度接触性的烈性传染病,临床上主要表现为腹泻、呕吐,严重时出现脱水等症状。不同品种和日龄的猪对本病都易感,在临床上尤其是对哺乳仔猪的危害最为严重。20世纪80年代,在亚洲的许多国家呈地方性流行。尽管研制出了抗猪流行性腹泻病毒的灭活疫苗和弱毒疫苗,但由于近几年猪流行性腹泻的流行特点和发病情况发生很大的变化,给防治工作带来了许多困难,对养猪业造成巨大的经济损失。本文从猪流行性腹泻的疫苗免疫和实验室诊断两个方面进行综述,为猪流行性腹泻的防控提供参考。 相似文献
56.
以毛霉菌(Mucor)M2为出发菌株,经紫外线,60Coγ-射线复合诱变,获得一株高产蛋白酶突变株毛霉M263。该菌株的生长速度快,菌丝旺盛,且洁白致密。固体培养,中性蛋白酶活力为841μg/min,产酶活力约为原出发菌株的2倍。产酶最适培养条件为:98%麸皮,1%豆饼粉,1%葡萄糖,料水比1:1,起始pH7.0,20℃培养120h。 相似文献
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以毛霉M263为出发菌株,经紫外线、γ-射线及高温处理复合诱变,并采用高温培养条件定向驯化,获得1株耐高温毛霉菌株M263-3.该菌株在32℃条件下,生长正常,酿制的腐乳质量优良;进行了培养基及产酶条件试验,选出了最佳培养基及适宜的培养条件。 相似文献
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城乡绿化一体化是近年来出现的新提法。随着城市的繁荣,人口增加、交通发展、旅游事业兴起,人们对改善城市环境的要求日益迫切,对城乡绿化一体化的认识也日益深刻。城市需要森林。森林能够美化、净化城市,改善环境。将森林引入城市,让城市掩映在森林之中,是人类崇尚自然,追求绿色文明的理想境界,也是当今世界城市建设的发展趋势。 全国绿化委员会第 18次全体会议决定,进一步加快城乡绿化一体化进程,确立了城乡经济一体化协调发展的战略构想,即建设布局合理的城市森林环境,人均公共绿地面积达 16平方米以上。城市、厂区花园化,… 相似文献