H1和H3亚型猪流感病毒二重TaqMan-MGB探针荧光RT-PCR检测方法的建立

根据H1和H3亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)编码基因的保守序列,分别设计合成特异性引物和Taq Man-MGB探针,建立了一种检测H1和H3亚型SIV的二重荧光RT-PCR方法。结果显示,该方法仅对H1和H3亚型SIV呈特异性扩增,对H9亚型SIV、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(SFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)无交叉扩增反应;用该方法检测H1和H3亚型SIV的HA基因的RNA标准对照(SIV-H1-RNA,SIV-H3-RNA),最适线性检测范围分别为3.7×10~1~3.7×10~8拷贝数/反应和3.4×10~0~3.4×10~8拷贝数/反应,最低检出限分别为38和34个拷贝数;该方法的组内试验和组间试验的变异系数均小于2.0%,显示其具有良好的可重复性。用该方法对520份进口猪的鼻拭子样本和78份国内猪鼻拭子样本进行SIV检测发现,进口猪鼻拭子样本的SIV检测结果均为阴性,12份国内猪鼻拭子样本的H1亚型SIV检测结果为阳性,5份国内猪鼻拭子样本的H3亚型SIV检测结果为阳性。本方法的建立为H1和H3亚型SIV检测提供了一种快速、敏感和特异的技术手段。     

不同根温处理对番茄叶片显微结构的影响

继研究了夏季高温下不同根温处理对番茄植株生长和对叶片气孔的影响后,再深入研究不同根温处理对番茄叶片显微结构的影响。以番茄为试验材料,采用营养液循环栽培法,分别对根系进行(23±1)℃、(28±1)℃和(33±1)℃3个不同的根温处理,采用石蜡切片法对植株叶片的显微结构进行观察与测量。结果表明:随着根温的升高,处理植株的叶片厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度均在减小;表皮厚度、栅栏组织/海绵组织的厚度比增大。因此,根温升高对植株构成了干旱胁迫,植株为了适应高温干旱的环境而改变了自身的结构特征。     

母猪产后不食症的病因分析及其防治

母猪产后不食症是母猪在哺乳期间内很容易产生的病症之一,主要症状是母猪在产下幼崽之后出现一系列厌食、食欲不振甚至不再进食的现象,也称为产后厌食。在过去,农村母猪的养殖一般是以散养为主,经常出现产后不食症的现象,现在在规模化养殖的养猪场中也成为常见病之一。一旦发生产后不食症,就会对母猪和幼崽产生严重的影响,轻则导致母猪的身体机能下降,分泌的乳汁质量不高,幼崽在食用乳汁之后会产生腹泻的现象,不能从母体获得足够多的抗体,导致抵抗力不足,甚至会因此死亡。后果严重时,会导致母猪拒食,母猪会迅速消瘦,然后出现断奶的情况,从而影响哺育幼崽和生育下一代的能力,降低了养殖的经济效益。文内将详细分析出现母猪产后不食症的原因。     

美国白蛾氨肽酶N的基因克隆表达及与苏云金杆菌3种毒素蛋白的结合特性分析

美国白蛾(Hyphantria cunea)是桑树的重要害虫。为明确苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白对该虫的作用机制,利用已知昆虫氨肽酶N基因序列设计引物,以美国白蛾中肠cDNA为模板,利用RACE-PCR技术获得美国白蛾中肠氨肽酶N基因hcapn1全长序列(GenBank登录号:KP053647)。该基因开放阅读框为3 000 bp,编码999个氨基酸,预测蛋白质的分子质量和等电点分别为113.14 kD和4.85。设计去信号肽引物PCR扩增获得hcapn1基因序列,构建原核重组表达载体pET30a-hcapn1,诱导表达的HcAPN1重组蛋白约110 kD。将苏云金杆菌Cry1Ac、Cry2Ab33和Cry9Ea6原毒素经胰蛋白酶消化后与HcAPN1重组蛋白分别进行体外配体印迹试验,发现HcAPN1重组蛋白与Cry9Ea6结合,而不与Cry2Ab33、Cry1Ac发生特异结合,推测HcAPN1可能为Cry9Ea6在美国白蛾中肠的受体蛋白。分别设计引物扩增HcAPN1蛋白2个结构域Asp₃₄～Asp_( 527)和Leu₅₆₃～Gln₉₂₅的编码序列,在大肠埃希菌中表达获得62 kD和48 kD 2种重组蛋白,体外结合试验显示Cry9Ea6与HcAPN1的结合发生在Leu₅₆₃～Gln₉₂₅之间。研究结果为深入理解苏云金杆菌Cry9Ea6蛋白对美国白蛾的杀虫机制提供了基础数据。     

管理人员流失问题研究——以新农开发股份有限公司为例

以新农开发股份有限公司为例,介绍了企业人才流失的现状,基于马尔科夫链模型分析了人才流动趋势,基于马斯洛需求层次理论分析了人才流失的主要原因,并提出了相应的解决对策。     

玉米“大双覆”栽培的增产机理

玉米“大双覆“,其中“大“字是指大垄,即把原来的3条垄合成2条大垄;“双“字指在每条大垄上种植两行玉米,小行间距为35～40cm“;覆“字指用厚度0.006～0.008mm的聚乙烯农膜覆盖栽培玉米“。大双覆“栽培玉米是平原旱作区域克服春旱、蓄水保墒、培育壮苗、提高产量的一项先进技术。     

建筑施工质量管理方法研究与应用

本文通过对建筑施工质量管理概念进行分析,提出在建筑施工质量管理中采用全面质量管理的方法,并对该方法的具体步骤和内容进行详细的阐述.然后,针对我国建筑工程中存在的常见问题进行原因分析,并提出解决办法.最后结合工程实例,将全面质量管理方法应用其中,结果表明,加强施工质量管理能有效地提高工程质量,保证工程安全.     

羟丙基淀粉制备的影响因素及性能研究

以马铃薯淀粉为原料,环氧丙烷为醚化剂,氢氧化钠为催化剂,硫酸钠为膨胀抑制剂,对马铃薯羟丙基淀粉的合成工艺进行了研究。考察了环氧丙烷用量、反应温度、反应时间、无水硫酸钠添加量及氢氧化钠用量对羟丙基淀粉取代度的影响。结果表明,环氧丙烷添加量10%,反应时间18 h,反应温度50℃,氢氧化钠用量1%,无水硫酸钠用量8%,取代度最高。     

速溶蜂花粉的抗疲劳作用研究

为了研究速溶蜂花粉的抗疲劳作用,给小鼠灌胃不同剂量的速溶蜂花粉21d后,进行负重游泳实验,分别测定小鼠的负重游泳时间,运动后的肝糖元、血乳酸和血清尿素氮含量。结果表明：速溶蜂花粉可以明显延长小鼠游泳时间,减少肝糖元消耗,降低血乳酸和血清尿素氮含量。破壁蜂花粉的抗疲劳效果显著,速溶蜂花粉的中高剂量组具有显著效果,其中高剂量组（5g／kg）抗疲劳效果最好。     

县域环境承载力综合评价研究

选用环境承载力综合指数法,结合研究区相关统计数据,综合评价县域环境承载力。结果表明,研究区水环境污染严重,尤其是CODCr污染,已严重超载;大气环境较好,只有水资源缺乏导致的可吸入颗粒物污染接近满载;土地资源尚有一定开发潜力,但富载不多;水资源缺乏。齐河县综合环境承载力已超载,其中主要限制因素就是水环境污染。