锦鲤墨蝶呤还原酶基因的克隆、表达和定位分析

为探究SPR在锦鲤体色形成中的作用,实验利用RACE技术获得spr cDNA全长序列,并分析其时空表达模式,同时利用Western blot和免疫组织化学方法检测SPR蛋白在皮肤、鳍条和鳞片中的分布和表达情况。结果显示,spr cDNA全长879 bp,包含132 bp和134 bp的5′和3′非编码区,开放阅读框510 bp,编码170个氨基酸残基。氨基酸序列比对和系统进化树分析显示,锦鲤SPR具有保守的adh_short_C2结构域,与金鱼相似性高达97.7%。spr在各组织中均有表达,其中皮肤的表达量最高。spr在锦鲤个体发育的4个阶段表现为先降后升。纯红、纯白及红白3种体色锦鲤皮肤、鳞片和鳍条中spr mRNA和蛋白表达水平基本一致,在纯红锦鲤皮肤中表达量最高,红白锦鲤白色皮肤、鳞片和鳍条的表达量最低。SPR组织定位分析显示,红色锦鲤和白色锦鲤皮肤中均检测到阳性信号,其中红色皮肤阳性信号强度高于白色皮肤。研究表明,spr可能与锦鲤红/黄色素细胞的分化和形成具有一定相关性,参与了锦鲤体色的形成。     

福寿螺细胞色素P450基因CYP3192A1的克隆与表达分析

文章分析了福寿螺(Pomacea canaliculata)细胞色素P450(CYPs)的结构、表达特征及四聚乙醛代谢与细胞色素P450表达水平的相关性。应用c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)克隆获得福寿螺CYPs基因c DNA全长2 523 bp,命名为CYP3192A1,含1个开放阅读框(ORF),编码517个氨基酸,具有血红素结合区F**G***C*G、K螺旋(E**R)、I螺旋(AG*ET)、C螺旋(W***R)等高度保守序列及跨膜螺旋(12~34号氨基酸)。聚类分析显示福寿螺CYP3192A1是细胞色素P450新家族成员,与CYP3A亚家族序列同源性较高。荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-q PCR)分析显示,福寿螺CYP3192A1基因表达量存在显著的性别及组织差异性(P0.05),表现为雌性表达量高于雄性,肠和鳃表达量最丰富,肝和胃次之,心和腹足中少量表达;四聚乙醛对福寿螺CYP3192A1表达的影响为"低浓度诱导,高浓度诱导期缩短并提前"。结果表明四聚乙醛处理能够显著诱导福寿螺CYP3192A1表达,与CYP3192A1表达量增加紧密相关,福寿螺CYP3192A1过表达可能在四聚乙醛代谢抗性中起重要作用。     

家庭阳台红面蛋龟养殖与繁育技术探究(下)

正(3)日常管理:本系统自动化程度高,滤筒24小时运行,每天自动溢流去除水面油污,既保持良好的水质又节省人力。只需每周手动打开阀门进行底部排污和每月清洗滤筒内滤材一次即可。高温季节注意调整雾化喷淋的频率和时间,使养殖缸内空气湿度在85%以上、气温在32℃以下。打开风扇增加气流有助于降温。冬天水温24℃以下时注意勤观察种龟状态,适时用加热棒。     

池养尖吻鲈人工繁殖的研究

尖吻鲈Lates calcarifer(Bloch)，又名盲鳍，其生长迅速，肉味鲜美，在东南亚、我国广东省、香港和台湾沿海地区均有养殖。但野生种苗不足成为发展成鱼养殖的障碍。因此，各国致力于尖吻鲈人工繁殖的研究，自1971年泰国在自然产卵场捕获成熟亲鱼进行人工繁殖首获成功以来，东南亚各国，如菲律宾、马来西亚、     

水浮莲对水产养殖排放水体净化的初步研究

研究了水浮莲(Pistia stratiotes)在可控条件下对水产养殖排放污水中的氨氮、亚硝酸氮、硝酸氮、总氮、总磷、化学耗氧量等水质指标的去除效果。试验结果表明,水浮莲对水体中的氨氮、亚硝酸氮、硝酸氮、总氮、总磷和COD均有一定的净化效果,各水质指标的含量均有不同程度的降低,其最大去除率分别为42.4%、47.5%、23.2%、5.80%、51.5%和25.9%。     

饲料中不同蛋白质及其含量对倒刺鲃鱼苗生长的影响

采用4种不同动、植物性蛋白质及其含量的饲料分别喂养4组倒刺鲃鱼苗30d。试验结果：植物性蛋白质含量较高的饲料比含量较低的饲料更好促进鱼苗的生长；饲料中含有一定比例动物性蛋白质比不含动物性蛋白质会更好促进鱼苗的生长，并对有关问题进行了讨论。     

倒刺鲃的人工饲养和疾病防治

倒刺鲃(spinibarbusdenticulatus)又名青竹鲤、竹柏鲤、红脸青竹，是珠江水系著名的优质经济鱼类。分类上属于鲤科、鲃亚科、倒刺鲃属。倒刺鲃个体大．生长快，肉质洁白鲜嫩，加上其色彩漂亮，很惹人喜欢。该鱼还具有食性杂，抗病力强．易养殖等优点，是一种很有推广价值的淡水养殖新品种。由于江河天然种苗十分缺乏．因此，一些水产研究单位和养殖场于数年前开展了倒刺鲃人工繁殖技术研究．其中珠江水产研究所已于2001年起连续3年取得了倒刺鲃人工繁殖成功，生产了一批鱼苗、鱼种供一些养殖者试养。同时．我们也进行了育苗和成鱼饲养试验。本文就笔者的试验心得，结合介绍个别同行的经验，供大家参考。     

金鱼品系的遗传多样性分析及亲缘关系初探

采用RAPD技术对草金（Grass goldfish）、红龙睛（Red dragoneye goldfish）、鹤顶红（Red-head wen goldfish）、水泡（Blisters-eye goldfish）、黑寿（White-head oval goldfish）等5个金鱼代表品种的遗传多样性及其亲缘关系进行研究。用14个引物在5个金鱼群体中共检测出116个位点,其中多态性位点27个。金鱼群体总的DNA多态位点百分率为23.3%。结果表明,5种金鱼群体间的遗传相似性指数均在0.8759~0.818之间,存在一定的差异,但未达到显著水平,群体间遗传多样性差异不明显。群体间遗传相似性度最小的为草金和黑寿（0.8759）,其遗传距离最大（0.1241）,说明这2种群体亲缘关系最远;鹤顶红与黑寿的遗传相似性度最大（0.9182）,其遗传距离最小（0.0818）,可推断两者的亲缘关系较近。UPGMA法和NJ法的聚类分析显示,草金和红龙睛,鹤顶红和黑寿有较近的亲缘关系,这与传统金鱼品种演化关系的观点一致。研究金鱼遗传多样性对保护金鱼的种质资源有重要意义。     

印尼虎鱼RAD-seq数据中微卫星标记的初步筛选及特征分析

采用RAD-seq(Restriction-site associated DNA sequencing)对印尼虎鱼(Datnioides pulcher)进行简化基因组测序,获得13308 806个高质量干净读长(HQ clean reads),利用SSR搜索软件在所得序列中共检测到26359个SSR位点,由496种重复基序组成,主要分布在三、四、五碱基重复类型中,单碱基重复序列中最多的类型为A/T,二碱基重复序列中以AC/GT和AG/GT重复单元为主,三碱基重复序列中以AGG/CCT、AGC/CTG、AGG/CCT为优势类型;在数量上,二碱基重复类型SSR位点最多(19492个),占总SSR位点的73.95%;除了单核苷酸类型外,SSR基序的重复次数主要集中在4-9之间,多态性SSR数目为2 783个。根据SSR位点两翼序列,利用Primer5.0成功设计出20 066对SSR引物,引物设计成功率为76.13%,依据测序数据中的重复类型和重复数,随机选择100个二至五碱基重复类型SSR在6个虎鱼样本中验证其可用性和多态性,有73对引物通过扩增可获得有效目的片段,其中20个SSR验证为具有多态性。开发所得SSR序列可用于印尼虎鱼及其近缘物种遗传分析、遗传图谱构建以及分子标记辅助育种等工作,同时也证实了利用简化基因组测序技术开发SSR标记和发现样品间具有多态性的SSR标记的可能性。