应用酵母双杂交系统初步筛选IBDV VP2结合蛋白

用RT-PCR扩增VP2 cDNA并克隆入诱饵载体pSos,与鸡法氏囊cDNA文库中分离的质粒DNA共转化cdc25H,筛选阳性酵母克隆;用酵母质粒DNA转化大肠杆菌,提取质粒再分别与诱饵载体pSosVP2共转化酵母细胞,利用酵母双杂交系统对阳性克隆进行验证.对阳性克隆的插入片段进行序列分析,根据生物信息学分析结果初步确定IBDV VP2结合蛋白编码基因.结果显示,经酵母双杂交共筛选出48个候选阳性克隆,分别转化酵母菌,经酵母双杂交验证后,获得阳性克隆19个.进一步的序列分析显示,在19个插入序列中,共编码8种不同的多肽,分别是Ras超家族中的RRAS2、Rit1和N-Ras,肿瘤相关蛋白TCTP和PARP14,抗病毒Mx蛋白,LAMB3蛋白以及蛋白激酶PRKX.VP2候选结合蛋白的获得为IBDV受体、诱导细胞凋亡或逃逸宿主抗病毒机制等研究奠定了基础.     

柔嫩艾美耳球虫含HD结构域蛋白特性和功能初步研究

鸡球虫病是由艾美耳球虫引起的一种危害严重的肠道寄生虫病,每年都会给世界各地的养禽业带来巨大的经济损失。目前,该病主要依靠抗球虫药物进行防治,但由于药物的长期及不合理使用导致鸡球虫几乎对所有使用过的抗球虫药均产生耐药性。为研究球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株以及敏感株进行了转录组测序并获得了敏感株与耐药株的差异表达基因,发现柔嫩艾美耳球虫含HD域蛋白（EtHDCP）在耐药株中上调表达。本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板,成功克隆出EtHDCP基因,构建了原核表达重组质粒pGEX-4T-EtHDCP,并成功诱导表达了重组蛋白rEtHDCP。利用qRT-PCR和Western blot对柔嫩艾美耳球虫敏感株不同发育阶段的转录和翻译水平进行分析,结果显示,EtHDCP在第二代裂殖子的转录和翻译水平高于其他三个阶段（未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子）。同时利用Western blot分析了EtHDCP在柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株中的翻译水平,结果显示,EtHDCP在耐药株中的蛋白翻译水平显著高于敏感株。间接免疫荧光定位结果显示,该蛋白主要定位在子孢子和裂殖子的表面以及裂殖子的胞质内。入侵抑制试验表明,抗rEtHDCP多克隆抗体可有效抑制子孢子对宿主细胞的入侵。这些结果说明该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育、耐药性的产生以及子孢子入侵宿主细胞的过程。     

农田林网树种选择与合理配置

杨树林带与樟子松林带在防护效益和胁地方面存在着很大差异。单纯由某一种林带构建的林网都存在缺点和不足 ,而把两种林带科学合理地组合起来 ,既可以增加农田林网树种的多样性 ,又能保证农田林网系统健康、稳定、持续地发挥效益     

杜仲叶酸性多糖提取分离及含量测定

研究杜仲叶酸性多糖的提取分离工艺及其含量测定的简便方法.结果表明,以提取过药用有效成分后的杜仲叶为原料提取酸性多糖的较佳工艺条件是:1.0%的碱水在100 ℃下提取2次,每次2 h;提取液经大孔吸附树脂处理,多次醇沉等步骤分离的酸性多糖含量可达到41.46%.采用DNS法测定杜仲叶酸性多糖含量时水解时间控制在15～20 min,显色反应为10 min,检测波长为492 nm;在试验条件下,葡萄糖浓度在0.20～0.60 mg·mL-1范围内显色灵敏、稳定,线性关系良好;用该法测定杜仲叶渣酸性多糖含量时加样回收率为98.30%,RSD为1.76%;显色溶液在2 h内吸光度值比较稳定,能够完全满足测定工作要求,可以作为实验室测定多糖含量的简便、快捷、有效的方法.     

珍珠梅纽扁叶蜂生物学特性及防治技术研究

珍珠梅纽扁叶蜂Neurotoma sibirica Gussakovskij在海城1 a发生1代,以预蛹在土壤中越夏、越冬,翌年4月上旬化蛹。4月下旬成虫开始羽化至6月上旬,5月中、下旬为盛期。卵出现于4月下旬,于5月中旬开始孵化,孵化盛期为5月下旬。老熟幼虫于6月中旬下树入土。珍珠梅纽扁叶蜂有13种天敌,其中显背臀姬蜂Notopygus insignis Kriechbaumer为中国新纪录属、种,异色瓢虫Harmonia axyridis(Pallas)是优势种。利用3种农药对珍珠梅纽扁叶蜂3龄幼虫进行防治试验,效果达93%以上。     

油松球果小卷蛾对马尾松生长的影响

本文通过标准地法研究了油松球果小卷蛾对马尾松生长的影响。结果表明，油松球果小卷蛾的危害可使马尾松的高生长下降０．０９～０．５０ｍ／ａ；对其胸径生长影响不明显；对其材积的生长也不明显；可使其球果提前脱落１～３个月；对其种子质量有严重影响。     

浅谈嫩江中下游地区土地资源现状及可持续利用

通过对嫩江中下游地区(黑龙江省部分)的土地利用现状的调查,分析了嫩江流域中下游地区土地利用上存在的问题及发展趋势,对今后嫩江流域中下游地区土地利用如何实现可持续发展提出见解,并作详细论述。     

超临界二氧化碳萃取杨梅仁油的研究

采用超临界CO2流体萃取技术对杨梅仁中杨梅仁油的提取工艺进行优化研究.运用L9(34)正交表,探讨各因素对萃取效果的影响,并采用气-质联用仪对杨梅仁油的成分进行分析.结果表明:超临界CO2流体萃取得到的杨梅仁油品质好,在萃取压力35 MPa、萃取温度50 ℃、萃取时间60 min、CO2流量30 L/h、分离温度30 ℃时效果最佳,得率高达33.52%;杨梅仁油中脂肪酸以油酸、亚油酸为主,不饱和脂肪酸含量在83%以上,是一种质量很好的保健油.     

沈阳市铁西区不同区域城市绿地分布情况调查

应用景观生态学原理及GIS技术,2006年和2011年调查沈阳市铁西区不同区域城市绿地分布情况,分析城市绿地的景观格局变化,以期为城市绿地景观的生态规划提供科学依据。