大肠杆菌“菌影”的制备

通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将该基因连接到含有Ps／cI启动阻遏系统的pBV220载体中,从而使裂解基因E和启动阻遏系统λPI／PR—cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建溶菌质粒pBV—E。采用CaCl2法将其转入大肠杆菌BL21（DE3）,含有裂解质粒的大肠杆菌在28℃条件下生长到对数生长期,然后升温到42℃诱导其溶解,制成了大肠杆菌菌影。电镜观察发现菌影形态完整,内容物全部被释放到胞外。     

文心兰花梗诱导及继代增殖培养

以文心兰的花梗腋芽为试验材料。选择适宜的灭菌方式,研究不同切割方式和激素浓度对继代增殖的影响。结果表明：适合文心兰花梗腋芽的灭菌方式是：将70％酒精倒入小烧杯浸泡30s,无茵水冲洗3次,倒入0．1％升汞浸泡约10min,再用无菌水冲洗5次,然后剥去外层包叶,切成1—2cm花梗腋芽接入培养基中。在继代培养中,只切去叶片2／3的情况下,培养基MS＋6-BA2mg／LI＋NAA1mg／L为佳。从生长点纵切的方式培养基宜用MS＋6-BA2mg／L。从生长点纵切的方法比只切去叶片2／3的方式增殖倍数较高。     

非洲猪瘟病毒CP312R基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备与应用

为制备ASFV CP312R基因编码蛋白的多克隆抗体,利用PCR方法从非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)的灭活样品中扩增出924 bp的CP312R基因全长序列,利用同源重组法构建出原核表达质粒pCold-Ⅰ-ASFV-CP312R,将其转化至原核表达感受态细胞BL21中,经1 mmol/L的IPTG低温条件下诱导表达CP312R编码蛋白并经过镍柱亲和层析纯化后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的相对分子质量约为34 kDa,通过Western blot分析,该蛋白能被ASFV抗体特异性识别。将所得的蛋白经处理纯化后免疫小鼠3次,得到含多克隆抗体的血清。利用该抗体检测实验室构建并拯救的表达ASFV CP312R基因编码蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV),结果显示该多抗具有良好的反应原性和特异性,并且证明了ASFV CP312R基因编码蛋白可在PRRSV活载体中稳定表达。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

从北京地区某鸡场有呼吸道症状及剖检可见肾肿大呈花斑状 ,并有尿酸盐沉积的病鸡中分离到一株病毒 ,该病毒在盲传中可使鸡胚出血并产生侏儒胚。病毒液不凝集鸡的红细胞 ,但经胰酶处理后可产生凝集。该病毒能在鸡胚中干扰新城疫C -30株的繁殖 ,电镜观察可见直径约 10 0nm圆形病毒颗粒 ;表面有纤状突起 ,动物回归试验再现自然发病症状。通过以上试验初步确定分离株为鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)。     

替米考星长效注射液的质量控制

对西北农林科技大学动物医学学院实验室制备的替米考星长效注射剂进行稳定性、安全性等方面的质量考察。采用紫外分光光度法测定替米考星长效注射液中替米考星的含量,考察制剂的稳定性,并通过急性毒性试验、刺激性试验等对制剂的安全性进行考察。结果表明,在1~90μg/mL浓度范围内,替米考星浓度与吸光度线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为(100.47±0.902)%,RSD=0.90%(n=3),对小公雏的LD50为1001.3 mg/kg。紫外分光光度法可用于替米考星长效注射液含量的测定。替米考星长效注射液低毒,轻度刺激性,含量稳定,符合制剂设计要求。     

卧辊式玉米秸秆调质装置调质功耗试验

为研究卧辊式玉米秸秆调质装置作业参数影响功耗的规律,利用自主研制的秸秆调质装置试验台和功率测控系统,基于电功率差值法对摘穗后玉米秸秆进行压裂、破节的连续调质正交试验,分析了调质辊工作间隙、调质辊转速及秸秆喂入速度对秸秆调质功耗的影响.结果表明:调质间隙对秸秆调质功耗影响显著;参数组合为调质间隙2.5mm、调质辊转速88～95 r/min、秸秆喂入速度3.3 ～ 4.0 km/h时,满足秸秆调质性能和降低功耗的要求.     

蛾类花香型广谱引诱剂配方的均匀设计

为了明确花香成分间的相互作用,探讨适宜的蛾类花香型引诱剂筛选方法,以夜蛾和螟蛾为主要靶标,采用配方均匀设计组配了一系列花香型引诱剂配方,并进行了田间诱捕试验。结果表明,供试花香型引诱剂可大量引诱棉铃虫、银纹夜蛾、白条银纹夜蛾、甜菜夜蛾、甜菜白带螟、亚洲玉米螟、稻纵卷叶螟和豇豆荚螟等多种重要蛾类害虫。在花香成分中,苯乙醛、乙酸苯甲酯和水杨醛是3种最为关键的广谱诱蛾活性成分,而2种侧链最短的芳香物质苯甲醛和苯甲醇则对诱蛾效果具有普遍的负面影响。因此,选用重要蛾类共同偏好的花香气味开发广谱引诱剂,可以简化蛾类的诱控防治技术。     

抗牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的制备

为了制备抗牛γ-干扰素(IFN-γ)的单克隆抗体(McAb),并对其部分生物学特性进行初步研究,试验用重组牛IFN-γ蛋白免疫小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术和间接ELISA方法进行试验.结果表明:共获得5株抗IFN-γ的单克隆抗体,Ig亚类鉴定均为IgGI,轻链为k链;经Weatern-blot试验证实5株McAb均能与IFN-γ发生特异性反应,而与其他蛋白不发生反应,特异性好;以5株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株制备腹水,效价均达到1:50 000以上.     

基于神经网络猪舍氨气浓度预测方法研究

猪舍内氨气浓度对猪生长发育影响较大,建立准确氨气浓度预测模型尤为必要。目前已有针对猪舍内氨气浓度预测研究,但氨气浓度受猪舍内多种环境因素影响,缺少准确预测模型。为此本研究从实测猪舍内环境数据(包括氨气浓度、温度、湿度、活动量、通风)中随机选取1 537组数据,使用L-M算法优化BP神经网络、线性神经网络和Elman神经网络预测猪舍内氨气浓度。结果表明,基于L-M算法优化BP神经网络建立5-9-9-1四层结构预测模型经290步后达目标误差,预测值和真实值最大绝对误差仅为0.1720,与Elman神经网络和线性神经网络预测方法相比可提高猪舍氨气浓度预测准确性和及时性,为猪舍环境预警提供支持。     

把脉支招：如何实现草原生态保护与牧民持续增收双赢

我国拥有天然草原60亿亩,占国土面积的41.7%.草原在我国绿色生态植被系统中占63%,具有涵养水源、调节气候、防风同沙等重要生态功能.全国266个牧区半牧区县(旗)近1 600万牧民生活在草原上,1.2亿少数民族人口中70%以上分布在草原地区.草原既是陆地生态屏障的主体,又是牧民群众最基础的生产生活资料.统筹解决好草原生态保护与牧民持续增收的问题,是实现农业部"两个千方百计、两个努力确保"目标的必然要求,对建设生态文明、繁荣牧区经济、促进民族团结与边疆稳定都具有重要意义.