黄芪多糖对杂交鲟用嗜水气单胞菌灭活疫苗的影响

【目的】探究黄芪多糖对嗜水气单胞菌灭活疫苗在杂交鲟鱼上的应用效果,以期发掘黄芪多糖用作疫苗佐剂的应用潜力。【方法】选取健康杂交鲟鱼140尾,随机分为4组(对照组、疫苗组、黄芪多糖组和联用组)并做相应免疫处理,分别于第0、7、14、21和28天采集血液,进行抗氧化指标(超氧化物歧化酶(SOD))和免疫相关指标(溶菌酶(LYZ)、酸性磷酸酶(ACP)、免疫球蛋白M(IgM)及补体C3(C3))检测;免疫结束时进行攻毒试验,观察鲟鱼死亡情况及其免疫组织病理变化。【结果】第7、14、21和28天时,与对照组相比,联用组和疫苗组杂交鲟鱼血清SOD、LYZ、ACP活性及IgM、C3含量均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),黄芪多糖组SOD、ACP活性及IgM、C3含量均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),LYZ活性无显著差异(P>0.05);与疫苗组相比,黄芪多糖组血清LYZ、ACP活性均显著降低(P<0.05),SOD活性及IgM、C3含量均无显著差异(P>0.05);与黄芪多糖组或疫苗组相比,联用组血清SOD、LYZ活性及ACP...     

胸膜肺炎放线杆菌的PCR诊断方法研究

采用胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)外膜脂蛋白Om/A基因序列合成了1对特异性引物,建立了用于检测App的PCR方法.结果表明:经过PCR扩增,3株App分离株均能扩增出长约950 bp的预期DNA片段,而大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)、沙门氏菌(Salmonella sp.)、支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)、葡萄球菌(Staphylococcus sp.)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、变形杆菌(Proteus sp.)和链球菌(Streptococcus sp.)等与猪病有关的8种病原菌均为阴性;App DNA最低检出浓度可达55.0 ng/mL,且试验结果与传统的生化反应鉴定结果完全一致,符合率达100%,证明此方法特异性和敏感性强,可用于猪传染性胸膜肺炎的快速诊断.     

宏基因组学在病毒研究上的应用概述

文章从宏基因组学的原理和方法、在病毒研究上的应用情况进行概述,显示其在病毒发现、病原溯源、疫情预警等方面的实用意义。     

黔东南斗鸡传统养殖技术

斗鸡活动是黔东南少数民族文化传播的一种载体,在斗鸡的传统养殖模式中存在饲养管理不规范、疾病多发等情况,甚至可能携带人禽共患病,引起公共卫生问题。文章对斗鸡的传统饲养管理、训练和护理保健技术进行科学总结,以期促进斗鸡养殖健康发展。     

鸡源巴氏杆菌GZ-TZ2017株的分离及其16S rRNA序列分析

为了探明贵州某肉鸡养殖场突发疾病病因,试验通过解剖、细菌分离、染色镜检、药敏试验、生化试验、16S rRNA的PCR扩增及序列分析等方法对病原进行分析。结果表明:从病鸡内脏中分离得到1株革兰氏阴性、两极浓染的球杆菌,将其命名为GZ-TZ2017;该菌株的培养特性、菌体形态、生化试验特征均与已报道的巴氏杆菌相似;GZ-TZ2017菌株对米诺环素、氧氟沙星和诺氟沙星等抗生素较为敏感,对头孢拉啶、苯唑西林、卡那霉素、青霉素等抗生素耐药;16S rRNA PCR扩增得到大小为1 400 bp左右的目的片段,分离菌GZ-TZ2017与各地分离的多杀性巴氏杆菌的同源性极高,均在99.0%以上;GZ-TZ2017与多杀性巴氏杆菌属细菌属于一个分支,和重庆分离株PM-LK(GenBank登录号为KX579746)、安徽滁州分离株CZ-6(GenBank登录号为KY673151)在同一小分支上,属于禽巴氏杆菌。说明该肉鸡场鸡群感染了禽巴氏杆菌。     

猴源DDX3X基因的克隆及生物信息学分析

为猴源DDX3X基因与相关病毒作用机理的深入研究奠定基础,根据Gen Bank预测的猪源DDX3 X基因序列(登录号HQ266638)设计合成特异性引物,采用RT-PCR从猴源肾细胞中扩增DDX3X基因,将其克隆至pMD-19T载体测序,并对其进行生物学特征分析。结果表明:克隆的猴源DDX3 X基因全长1 989bp,与猕猴的核苷酸序列同源性达99.6%,与绿猴、猕猴和人并列在同一遗传进化分支上,与三者的一致性较高;蛋白编码有662个氨基酸,共计20种氨基酸;甘氨酸含量最高,为11.5%,理论等电点为6.73;猴源DDX3X基因含有DEAD-Like解旋酶超家族结构域和C端结构域,DDX3X蛋白具有良好的亲水性,二级、三级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。猴源DDX3 X基因与多个调节细胞进程、RNA加工的关键蛋白存在相互作用。     

小反刍兽疫一步法RT-PCR检测方法的建立

为储备小反刍兽疫疫情防控技术,根据GenBank公布的小反刍兽疫病毒N基因序列设计合成特异性引物,以小反刍兽疫弱毒疫苗为材料,建立小反刍兽疫病毒一步法PT-PCR检测方法,并对所建方法进行条件优化和性能评价。结果显示,建立的方法能有效扩增大小约447bp目的基因片段。该一步法RT-PCR最佳模板质量浓度为6.76×10-3 g/L,最佳退火温度60℃。该一步法RT-PCR检测方法性能评价结果显示,其最小模板检出质量浓度为6.76×10-6 g/L,且方法具良好的特异性和临床应用性,可用于小反刍兽疫多种样本的检测。     

猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、支原体混合感染病例的实验室诊断

为查明贵州省贵定县某养殖场猪群发病的原因,分别采集2头病猪的肺脏、肝脏、扁桃体、淋巴结、脾脏、肾脏组织进行细菌分离培养及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、支原体的核酸检测.结果:无细菌感染情况;猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、支原体核酸检测均为阳性.结论:养殖场病例存在猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、支原体混合感染...     

鸭源致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定与生物学特性分析

为了解嗜水气单胞菌的肉鸭健康带毒、致病与耐药情况,对贵州省三穗县某肉鸭屠宰场临床健康肉鸭随机取样,进行嗜水气单胞菌的分离鉴定、毒力基因检测及耐药性分析。结果显示,分离菌具有嗜水气单胞菌典型的培养特征,菌落形态、菌体形态和生化特性均与嗜水气单胞菌相符;16 S rRNA基因序列系统进化树显示,该分离菌与嗜水气单胞菌聚为一支,同源性均>99%;动物回归试验显示,该分离菌对小鼠有较强的致病性;毒力基因PCR检测显示,该分离菌携带aer、hly、epa、act、alt和ahp等6种毒力基因;药敏试验结果显示,该分离菌对复方新诺明、磺胺嘧啶、环丙沙星和诺氟沙星等15种药物耐药;耐药基因PCR检测显示,该分离菌携带qnrB、Sul1和IntI1等3种耐药基因,与药敏试验表型相符。研究结果为嗜水气单胞菌的生物学特性研究及防控提供参考依据。     

蛋白激酶C抑制剂及激活剂对鸭肠炎病毒增殖的影响

为进一步探究鸭肠炎病毒（duck enteritis virus，DEV）的致病机理，试验采用鸭蛋白激酶C （protein kinase C，PKC）的抑制剂星形孢菌素（staurosporine，SP）和激活剂佛波醇（phorbol-12-myristate-13-acetate，PMA）研究PKC/PKCI能否对DEV的增殖产生影响，为阐述DEV致病机理提供新的思路。用SP/PMA处理正常鸭胚成纤维细胞（duck embryo fibroblast，DEF）后，实时荧光定量PCR方法检测不同时间段PKC/PKCI基因表达；用DEV病毒液感染SP/PMA处理的DEF后，收集不同时间段培养物，以Reed-Muench法计算DEV半数组织培养感染量（TCID₅₀）值，实时荧光定量PCR方法检测分析DEV NP基因转录水平。结果显示，SP处理对宿主细胞PKC/PKCI基因表达水平无显著影响（P>0.05）；而PMA处理可极显著提高宿主细胞PKC基因表达（P<0.01），但对PKCI基因表达水平无显著影响（P>0.05）；SP/PMA处理对DEV复制能力影响显著（P<0.05；P<0.01），且在感染前期可显著或极显著降低DEV NP基因的转录水平（P<0.05；P<0.01）。综上所述，SP和PMA对PKC、PKCI基因表达水平的影响效果不同，且都能有效抑制DEV增殖，本试验结果可为DEV的防控及其致病机理的研究提供基础资料。