条件性敲除D1133L基因的重组非洲猪瘟病毒的构建及增殖特性

前期研究初步表明非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的D1133L基因对ASFV复制至关重要,本研究拟进一步探究D1133L在ASFV复制中的作用。利用同源重组技术结合大肠杆菌lac阻遏操作系统实现条件性敲除D1133L基因,以pUC118为骨架重组转移载体ASFVΔi130,将重组转移载体转染骨髓源巨噬细胞(BMDMs),以ASFV CN/GS/2018为亲本毒株感染BMDM,在β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)存在的条件下,经绿色荧光和PCR鉴定,获得条件性敲除D1133L重组毒株vD1133Li。利用荧光显微镜观察该重组毒株与亲本毒株在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的复制差异,利用qPCR技术比较重组病毒与亲本毒株的复制差异,分析vD1133Li在无IPTG情况下回补D1133L蛋白后与在IPTG诱导情况下的复制差异。结果显示：本研究成功构建了条件性敲除D1133L的ASFV重组病毒vD1133Li,重组毒株不表达D1133L,在IPTG诱导下复制能力显著低于亲本毒株;在稳定表达D1133L的MA-104细胞系中,vD1133Li复制能力恢复。综上所述,D1133L基因对于ASFV复制至关重...     

生物入侵的现状与对策思考

系统分析了生物入侵危害现状及产生的原因,并在总结目前防治生物入侵所采取的技术措施的基础上,提出了防治生物入侵的长远对策。     

家蚕膜蛋白基因(BmTmC27)的序列分析及组织特异性和原核表达

从家蚕蛹cDNA文库中筛选获得一条家蚕膜蛋白基因序列,通过编码氨基酸序列的同源性比对表明其可能是家蚕的未知功能序列,命名为BmTmC27(GenBank登录号:DY231073.1)。生物信息学分析结果表明该基因全长833 bp,由558 bp的开放阅读框、102 bp的5'端非翻译区和173 bp的3'端非翻译区组成,编码蛋白由185个氨基酸组成且含有4个跨膜区,预测蛋白分子质量为20.94 kD,等电点为7.38。将该基因片段与BmNPV的polh基因连接后克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建原核融合表达载体pGEX-4T-1-polh-BmTmC27,经IPTG诱导、SDS-PAGE分析表明目的蛋白以包涵体形式在E.coli BL21(DE3)中表达。利用多角体蛋白可溶于碱性环境的性质,采用调节pH值的方法纯化融合表达的重组蛋白GST-Polh-BmT-mC27,然后经TEV酶消化获得BmTmC27蛋白。荧光定量PCR分析BmTmC27在家蚕5龄幼虫不同组织中的表达存在明显差异,其中在脂肪体、中肠和气管中的转录水平较高。利用GST沉降技术研究了BmTmC27的互作蛋白,与对照组相比,发现了4条特异性互作蛋白条带。研究结果有助于进一步探究BmTmC27的生物学功能,也为膜蛋白的表达和纯化提供了一种新方法。     

油松容器苗枯梢症的预防

在玛可河林业局育苗基地油松容器苗的培育过程中,发现有枯梢症发生,通过分析发生的主要原因,对油松枯梢症采取了预防措施,取得了明显效果.     

丹玉103的品种特性及栽培要点

丹玉103是丹东农科院以自选系组配成的玉米杂交种.本文介绍了其品种特性,并进行了产量对比试验,同时提出了高产栽培技术要点.     

榆林沟流域坝系建设调查

榆林沟流域坝系建设调查郭玉梅，张庆伟（黄委会绥德水土保持科学试验站，陕西绥德县７１８０００）寇俊峰，武哲（黄委会黄河上中游管理局）榆林沟流域是无定河中游左岸的一条支流，流域面积６５．８ｋｍ２，其中沟谷地占５１．１３％，沟间地占４８．８７％，主沟道长１...     

金银散加味治疗奶牛乳房炎

乳房炎是奶牛的一种常见病和多发病,奶牛一旦发病,对产奶量和乳品品质影响很大,严重时会造成奶牛的淘汰和死亡,造起较大的经济损失。笔者在生产实践中用金银散加味治疗奶牛乳房炎,共收治46例,治愈43例,疗效显著,现报道如下：     

金银散加昧治疗奶牛乳房炎

乳房炎是奶牛的一种常见病和多发病,奶牛一旦发病,对产奶量和乳品品质影响很大,严重时会造成奶牛的淘汰和死亡,造起较大的经济损失.     

基层动物检疫监督执法存在问题及对策

本文分析了基层动物检疫监督执法工作存在的问题及其原因,提出了解决问题的对策。     

仔猪运输过程中产生应激综合症的分析及其防治方法

分析了仔猪在运输过程中应激综合症的症状和产生原因,并提出了应激综合症的防治方法。