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【目的】植物第III类过氧化物酶具有广泛的生理功能。前期研究发现荔枝果皮具高活性的离子结合态过氧化物酶(BPox),与果实的着色、成熟密切关联,但其特性、作用机制不清楚。明确BPox的生化特性及其基因表达变化,为进一步研究BPox参与荔枝果实着色和成熟机制奠定基础。【方法】以‘乌叶’荔枝成熟果果皮为材料,通过提取及Streamline Phenyl、CM-52、Phenyl Sepharose HP和Superdex 200等柱层析,纯化获得BPox。测定BPox的最适反应pH、最适反应温度、底物特异性、抑制剂等生化特性。采用双倒数法测定其催化愈创木酚、(-)-表儿茶素的Km值及Vmax。应用MALDI串联质谱鉴定BPox的肽段序列,克隆BPox的cDNA。分别测定盛花后58、69、76、80和90 d荔枝果皮BPox的活性变化,应用荧光定量PCR分析BPox的基因表达变化。【结果】从荔枝果皮纯化得到BPox最主要的2个组分,分别命名为BPox-2和BPox-3。凝胶过滤层析和SDS-PAGE结果显示,BPox-2和BPox-3的表观分子量分别约为30 kD和34 kD。BPox-2和BPox-3的最适反应pH均为6.0,最适反应温度分别为40℃和45℃;二者具有相似的底物特异性;DTT、ASA和L-Cys等能强烈抑制其活性。BPox-2和BPox-3催化愈创木酚的Km值分别为2.97和2.58 mmol∙L-1,其Vmax分别为38.72×106和23.06×106 U∙mg-1;其催化(-)-表儿茶素的Km值分别为3.49和3.24 mmol∙L-1,Vmax分别为38.72×106和23.06×106 U∙mg-1。尽管BPox-2和BPox-3的肽质量指纹(PMF)不同,串联质谱分析显示,二者均具一个序列为TASLSAANSDLPSPFADLATLIAR的胰酶水解肽段。克隆得到BPox2的cDNA,大小为960 bp,共编码319个氨基酸。cDNA编码的多肽链N端包含1段26个氨基酸残基的信号肽,C端缺乏液泡分选序列,具1个潜在的N-糖基化修饰位点。幼果期,荔枝果皮BPox的活性表现弱;至盛花后76 d,果皮开始着色变红,BPox的活性迅速启动升高直至果实成熟。qPCR的结果显示,在盛花后的58和69 d,果皮BPox2的转录水平很低;盛花后76 d,BPox2的表达急剧上升,达到高峰,为盛花后69 d的60.56倍,而后下降。至盛花后90 d,其表达水平又显著上升。【结论】荔枝果皮的BPox-2与BPox-3最适反应pH、最适反应温度、底物特异性等与荔枝果皮可溶性Pox组分相似,但其对愈创木酚和(-)-表儿茶素的催化效率显著高于SPox。BPox-2与BPox-3同为BPox2所编码,因翻译后修饰差异而形成同工酶。BPox参与荔枝果皮的着色和成熟进程,其活性受转录水平调控。 相似文献
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核桃叶水浸液对四种作物的化感作用 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了核桃叶水浸液对玉米、花生、豌豆和辣椒种子萌发及幼苗生长的化感作用.结果表明,不同浓度核桃叶水浸液对4种作物各项测定指标抑制作用各异,随着处理浓度增大,抑制作用不断增强,其中对4种受体发芽势和根长的抑制效应与对照相比差异显著;随处理浓度降低,抑制作用减弱,在0.025g/mL处理时甚至表现为促进作用,体现出双重浓度... 相似文献
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以基质中不添加矮壮素的处理作为对照(CK),对甘蓝幼苗株高、茎粗、下胚轴长、SPAD值和植株生物量等生长指标进行测定,分析基质中添加不同浓度矮壮素对甘蓝幼苗生长的影响。结果表明,矮壮素浓度为2.5 mg/kg处理下培育的甘蓝株高、下胚轴长均有显著降低,甘蓝幼苗茎粗随着基质中矮壮素浓度的增高而增加,下胚轴长随着浓度的增高而降低,从幼苗的各项生长指标得出,基质中添加矮壮素浓度为2.5 mg/kg的处理能有效地提高甘蓝幼苗的壮苗指数,有效抑制在温室穴盘育苗的条件下高温高湿环境造成的幼苗徒长,达到培育壮苗的目的,从而大大满足工厂化育苗培育壮苗的需要。 相似文献
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介绍了高校图书馆期刊排架方法,同时也介绍了我校图书馆期刊的专题排架方法,专题排架方法便于期刊管理,方便读者利用期刊,提高了工作效率。 相似文献
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高校图书馆的期刊资源就是为高校教师、学生服务,为社会公众开放服务的。笔者探讨了大连海洋大学图书馆期刊资源的特点及有效利用途径,提出高校图书馆应该积极为社会开放提供服务。 相似文献
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通过研究不同磁场强度和作用时间对樟芝菌丝产量以及菌丝三萜产量的影响,探讨了磁场促进樟芝液态发酵的基本规律。通过GC-MS、扫描电镜及红外光谱等手 段,对比分析普通液态发酵和磁场辅助液态发酵所得菌丝中生物活性成分、发酵液中挥发性成分、菌丝体微观形貌及三萜化合物成分的差别。结果显示,在磁 场强度60 mT,处理36 h条件下,磁场对樟芝菌丝的生长和三萜产量促进作用最强,菌丝产量增长率约23.53%,三萜产量增长率达到28.19%。GC-MS结果显示, 普通发酵液和磁场辅助发酵液的挥发性成分基本相同,但含量显著不同。扫描电镜观察结果显示,磁场辅助发酵获得的菌丝体表面形态比普通发酵菌丝更松散 。红外光谱表明两种方式产出的三萜化合物成分无明显差别。因此,静磁场辅助液态发酵能够在不降低质量的前提下显著提高樟芝菌丝及三萜的产量。 相似文献