香菇的失活原生质体融合

食用菌的原生质体融合必须对亲株进行遗传标记。筛选营养缺陷型或代谢突变型的传统方法,不仅需要花费大量的人力和物力,而且这些筛选是以诱变为基础,往往会引起亲本一些不利于产量和质量性状的突变。70年代发展起来的失活原生质体技术表明,失活一个亲株的原生质体与另一亲株活的原生质体融     

含绿色荧光蛋白及trp3iar基因的草菇表达载体的构建

分别用限制性内切酶EcoR I和HindIII酶切质粒pBGgHg,将切下的含双孢蘑菇gpd启动子、EGFP基因和35S终止子的碱基序列连接到含Ap抗性的pBSK II上,再将这一段序列切下连接到含kan抗性的pCAMBIA1300载体上,形成中间质粒载体YH2873。用限制性内切酶HindIII分别酶切质粒YH2873和质粒pDB06,将从pDB06切下的trp3iar基因连接到中间质粒载体YH2873上,得到表达载体pSAGF。中间载体pYH2873经限制性内切酶EcoR I和HindIII酶切,电泳后显示1.3 kb的目的片断和9 kb的载体片断,表达载体pSAGF经限制性内切酶HindIII酶切,电泳后显示4 kb的trp3iar基因的目的片断和10 kb的载体片断,进一步测序证明重组质粒连接正确,成功构建了草菇的表达载体pSAGF。     

应用PCR-RFLP及PCR-TGGE技术监测农田土壤微生物短期动态变化

在一块农田里于一个月内连续采集5次土样，提取土样微生物总DNA，应用PCR-RFLP及PCR-TGGE技术监测土壤微生物的动态变化。结果表明，细菌16S rDNA和真菌18S rDNA的PCR-RFLP图谱在5个采样时间点上基本一致；细菌的PCR-TGGE图谱平均有40条带，其相似性在90％以上，真菌的平均有20条带，其相似性在70％以上。说明这块农田土壤细菌区系短期内变化不大，而真菌区系存在较小幅度的动态变化，并且细菌多样性远远高于真菌多样性。比较两种分子生物学方法的结果表明，PCR-TGGE技术比PCR-RFLP技术更能精确地反映土壤微生物的动态变化，并且能同时快速地对多个样品进行有效区分。     

GUS基因瞬时表达检测香菇顺式因子的调控功能

设计了一个顺式元件功能检测载体pYF3553,该载体以GUS为报告基因,其上游连接一段由待测香菇(Lentinula edodes)克隆片段与酵母Cyc1基本启动子组成的杂合启动子。将编号为XG108和XG111的香菇克隆序列构建的检测载体命名为pXG108p、XG111。将pXG108转化到香菇原生质体中,结果被测样的GUS瞬时活性比对照增加一倍,表明GUS基因得到了表达,其上游调控元件具有调控功能。对比pXG108和pXG111转化后的表达结果,其GUS瞬时表达活性表现出差异,这种差异与克隆片段在酵母中的表达差异相一致。分析了利用GUS瞬时表达验证未知香菇顺式元件的优缺点。     

应用PCR-RFLP及PCR-TGGE技术监测农田土壤微生物短期动态变化

在一块农田里于一个月内连续采集5次土样,提取土样微生物总DNA,应用PCR-RFLP及PCR-TGGE技术监测土壤微生物的动态变化.结果表明,细菌16SrDNA和真菌18S rDNA的PCR-RFLP图谱在5个采样时间点上基本一致;细菌的PCR-TGGE图谱平均有40条带,其相似性在90%以上,真菌的平均有20条带,其相似性在70%以上.说明这块农田土壤细菌区系短期内变化不大,而真菌区系存在较小幅度的动态变化,并且细菌多样性远远高于真菌多样性.比较两种分子生物学方法的结果表明,PCR-TGGE技术比PCR-RFLP技术更能精确地反映土壤微生物的动态变化,并且能同时快速地对多个样品进行有效区分.     

牛蒡皮提取液对猪肉中微生物的抑制作用

为了研究牛蒡皮提取液对猪肉中微生物的抑制作用,采用体积分数为250、500、750、1 000 μL/mL牛蒡皮提取液（每1 mL原液由500 mg牛蒡皮提取制的）分别处理新鲜及接种单增李斯特菌猪肉,之后将处理好的猪肉分别置于25℃和4℃培养,于0、12、24、48 h（25℃）和0、1、3、5、7 d（4℃）测定其中菌落总数和单增李斯特菌数量;对25℃条件下经各浓度提取液处理24 h后猪肉的感官质量进行了评价;透射电镜观察了25℃条件下经500 μL/mL牛蒡提取液处理7h后单增李斯特菌细胞形态的变化。结果显示,与对照组相比较,25℃条件下经500、750、1000 μL/mL牛蒡皮提取液处理后,猪肉中菌落总数和单增李斯特菌均显著（P＜0.05）降低,抑菌效果和提取液浓度呈正相关;牛蒡皮提取液浓度为500 μL/mL时猪肉感官质量较佳;牛蒡提取液对单增李斯特菌的抑制表现为对其细胞壁和胞内物质的破坏。本研究为今后牛蒡提取液作为天然食品添加剂在食品中的应用提供参考。     

蘑菇病毒的传布途径和方式

蘑菇病毒与其它各种病毒一样,都是专性活物寄生,它只能生活在活的蘑菇菌丝细胞或孢子中.在目前的研究认识水平上,蘑菇病毒主要通过主系传布和支系传布两种途径,至今还没有发现昆虫、线虫或其它真菌能作为传布蘑菇病毒的天然媒介.主系传布,是指真菌的病毒通过有丝分裂的菌丝和形成的无性孢子以及从减数分裂形成的有性孢子进行传布,以这种方式形成的菌丝和孢子,在电镜下可以观察到病毒颗粒,在琼脂糖凝胶电泳上可检查出有双链RNA 分子.支系传布,指通过种内或种间亲合性菌株菌丝之间的接触和融合进行传布,     

上海探索农产品安全监管工作的新路

2001年4月，上海市被农业部确定为“无公害食品行动计划”试点城市之一。3年来，在农业部的统一部署和指导下，上海市将“无公害食品行动计划”与加强全市农产品质量安全监管有机紧密地结合起来，抓住重点、带动一般、有序推进、步步深入，监管体系逐步完善，取得了阶段性的成     

我国食用菌产业发展的回顾与展望

较全面地回顾、总结、展望了我国食用菌产业的发展历程，存在问题和发展趋势。总结了具有中国特色的食用菌产业发展历程中的三个战略转变和三个优势，了我国食用菌产业新的发展阶段面临的六个方面的新情况，新问题，提出了21世纪食用菌产业进行战略性结构调整必须采取的12个对策。／