高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒NM1株全基因测序及致病性分析

从内蒙古自治区暴发猪“高热病”的猪场分离出1株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（ Highly pathogenicporcine reproductive and respiratory syndrome virus, HP-PRRSV）,命名为NM1株。根据GenBank上已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）全基因序列设计引物进行RT—PCR扩增和序列测定,结果表明HPPRRSVNM1株基因组全长15356bp（包括PolyA尾）。分析结果显示该毒株与PRRSV美洲型标准株（VR-2332）和欧洲型标准株（LV）全基因核苷酸同源性分别为89．4％和61．9％,说明NM1属于美洲型毒株。与VR-2332相比,NM1株非结果蛋白（nsp2）第481位和第533～561位氨基酸存在缺失,该毒株属于PRRSV变异株。动物接种试验结果表明,该毒株对猪具有高致病性。     

猪繁殖与呼吸综合征血清学检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以妊娠母猪的繁殖障碍以及仔猪和成长猪的呼吸困难为主要特征的传染病。目前,血清学检测是猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测最常用的方法,文章对血清中和试验、酶联免疫吸附试验、过氧化酶单层细胞试验、间接免疫荧光试验等猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体诊断技术的原理及其应用现状作一综述,并对各种检测方法的优缺点进行了分析。     

口蹄疫灭活疫苗效力检验替代方法研究进展

目前,口蹄疫灭活疫苗的效力检验方法是采用本动物进行免疫攻毒试验,此方法需要大量的非免疫本动物,存在着动物来源困难,试验成本高、周期长等问题。建立与本动物具有一定统计学关系的口蹄疫灭活疫苗效力检验的本动物替代方法是国内外亟待解决的一个问题。过去数十年中,口蹄疫灭活疫苗结合其他疫苗的研究情况,主要进行了以下几种替代方法的研究:试验动物替代法、血清学替代法、疫苗抗原定量法。但到现阶段仍没有一个像本动物攻毒试验那样确定统一的标准替代方法。为了更深入的了解口蹄疫灭活疫苗效力替代方法的研究现状以及今后的发展方向,本文结合传统口蹄疫灭活疫苗效力检测方法,针对以上几种替代方法的研究进展展开探讨。     

猪圆环病毒2型吉林分离株全基因组的克隆与序列分析

从吉林某猪场采集疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合征死亡的猪体病料,进行猪圆环病毒2型(PCV-2)的分离;分离培养物经荧光标记的PCV-2特异抗体染色鉴定,并用PCV-2全基因组的特异性引物扩增,进行序列测定和分析。结果表明,从采集病料中成功分离出一株猪圆环病毒2型,并将此吉林分离株命名为PCV-2-JL11S,对其进行全基因测序,拼接结果显示,基因组全长为1 767bp;将分离株病毒的全基因组序列与14株GenBank已登录病毒进行比较,结果显示,核苷酸同源性最高可达99.2%;全基因序列系统进化树结果表明,分离株与HQ395057关系最近,而与HQ395037关系较远。上述结果表明,PCV-2吉林分离株存在一定的基因变异,而变异的发生原因尚需深入研究。     

牛传染性鼻气管炎病毒攻毒方式的对比研究

本试验旨在建立牛传染性鼻气管炎病毒的攻毒模型,明确病毒在牛体内的分布及确定最佳攻毒方式,建立牛传染性鼻气管炎的发病标准,用来评价IBRV LNM弱毒疫苗的保护效力。试验共使用健康断乳牛9头,设鼻内喷雾组、滴鼻组和对照共3组,每组3头牛。将实验室分离保存的IBRV LN01/08强毒株采用鼻内喷雾和滴鼻两种方式接种试验组动物后,连续14 d,每日观察临床症状,监测体温及采集鼻拭子,对收集的试验数据进行对比分析。选取临床发病不同时期剖杀动物,采取主要脏器进行病毒分离。结果显示,所有动物攻毒后有不同程度的临床表现,以鼻内喷雾组临床表现最为严重,剖检可见肺部病变明显。病毒主要分布在呼吸道和眼结膜组织中。研究结果显示,采用IBRV自然感染方式攻击动物,喷雾方法攻毒临床效果明显强于滴鼻方式,保证了临床发病模型的建立,可以用来IBRV疫苗免疫效果评价,为研制IBR疫苗提供前提基础。     

致病性犬瘟热病毒CDV-JT1株的分离与鉴定

应用MDCK细胞从吉林某地犬瘟热(Canine distemper,CD)疑似发病犬肺脏组织中分离出1株病毒,该分离毒株经MDCK细胞传至第6代时出现典型的合胞体细胞病变(CPE)。经病毒形态观察、理化特性鉴定、RT-PCR和直接免疫荧光鉴定可知该分离毒株为犬瘟热病毒(CDV),命名为CDV-JT1;动物试验表明,试验犬接种CDV-JT1后21 d内都出现典型的犬瘟热症状;H基因序列分析表明,CDV-JT1株的H基因与中国分离株CDTaiChung株、TN株、SHLJ(07)1株、日本Hamamatsu株、Ueno株、Yanaka株和KDK-1株在基因型上同属于Asia-1型。CDV-JT1株含有包括CDV野毒株特有的309~311位在内的8个潜在的N-连接天冬酰氨糖基化位点。CDV-JT1强毒株的分离成功,对进一步开展疫苗研发、流行病学调查以及致病机理等方面的研究具有重要意义。     

93RJ-40型打浆机的试验研究

叶蛋白泛指从青嫩植物茎中中提取的蛋白质，其中粉碎打浆是提取叶蛋白的主要工序。在试验研究的基础上，设计了９３ＲＪ－４０型打浆机。对该机进行了性能测定，同时对发展叶蛋白生产的前景进行了展望。