禽流感诊断方法概述

禽流行性感冒 (AI)简称禽流感，是由正粘病毒科、流感病毒属 A型流感病毒 (AIV)引起的一种禽类疾病综合征。禽类感染 AIV后，表现从亚临 床到轻度上呼吸道症状、精神萎顿、食欲减退、种鸡产蛋量和种蛋孵化率严重下降，到急性全身致死性疾病综合症。 AIV广泛存在于多种家禽和野生禽类中，而且其临床症状和病理剖检易与 ND、 IB、 EDS－ 76相混淆。虽然禽流感分离株大部分都不是高致病力毒株，但由于禽流感病毒抗原性及致病力的易变性，对养禽业已构成潜在的威胁。 1 AIV的遗传变异性 　　AIV的遗传变异包括抗原性变异和致病性变异…     

大肠杆菌高密度发醇研究

高密度发酵是现代发酵工程的一顶新技术，能显著提高大肠杆菌菌体和基因工程产品的产量。我们就影响大肠杆菌高密度发酵的因及其控制、发酵方式的选择和发酵终点判断及异常发酵处理进行了简要讨论，并对大肠杆菌的高密度发酵进行了展望。     

气载镰孢菌的RAPD分子特性研究

采用微型电钻研磨法提取了89株气载镰孢菌Fusarium菌株的基因组DNA。从30个RAPD引物中筛选出了扩增条带平均为5—10条的5个引物：S330（ccgacaaacc）、S29（gggtaacgcc）、S122（gaggatccct）、S129（ccaagcttcc）和S121（gggatatcgg）,对待测基因组DNA进行扩增。通过对电泳谱带的标记和采用EPCI。UST软件进行聚类分析,研究结果表明,当遗传距离封闭在0．62时,基本可以将形态学鉴定的镰孢菌种区分开来,根据遗传距离还可以将不产孢的疑难菌种的分类地位加以明确。     

猪舍环境中气载需氧菌及气载葡萄球菌的研究

本研究采用Andersen-6空气微生物收集器,选用血-葡萄糖-琼脂培养基为采样介质,对两个不同猪场8个猪舍环境空气中需氧菌总数和葡萄球菌总数进行了检测,并对葡萄球菌的菌群组成进行了分析,评价气载需氧菌和气载葡萄球菌对猪舍环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害。结果表明,2个猪场气载需氧菌的浓度分别为2．87×10^4、12．65×10^4CFU／m^2,葡萄球菌的浓度分别为1．94×10^4、5．74×10^4CFU／m^3。猪舍空气中葡萄球菌主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、猪葡萄球菌、木葡萄球菌、头状葡萄球菌、科氏葡萄球菌、肉葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌的浓度占葡萄球菌总浓度的24％和27％,其次是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。从葡萄球菌菌在Andersen-6空气微生物收集器层级上的分布规律来看,主要分布在B—E级（36．9％）,气溶胶颗粒直径在0．2—6μm之间,可以进入到人、畜的气管、支气管,甚至细支气管,对养殖人员和动物呼吸道存在严重危害。     

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌FnBPA蛋白免疫研究

为了研究奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌发病机制和治疗措施,对引起奶牛临床型和隐性乳腺炎的337株金黄色葡萄球菌进行FnBPA蛋白基因分子调查,并且表达和纯化了FnBPA蛋白,制作FnBPA蛋白疫苗进行动物免疫试验。结果表明,FnBPA蛋白基因携带率为51. 04%,临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌FnBPA蛋白基因的携带率为68. 5%。选取分离菌株10A扩增出的FnBPA基因,进行原核表达,重组蛋白得到高效表达,获得高纯度的FnBPA蛋白,BCA法蛋白定量为2. 8 mg/mL,制作蛋白疫苗免疫3头试验奶牛,30～40 d后,ELISA检测血清抗体滴度达到高峰,最高抗体滴度达到7l og_2,该蛋白具有很好的抗原性。     

设德兰岛绵羊痒病空泡病变的诊断

绵羊痒病是山羊和绵羊的一种传染性海绵状脑病 ,其组织学病变特征是神经原和神经纤维的空泡病变、星形细胞炎症、神经原的缺失和 ( Prionprotein) Pr P的出现。这种病被确认为是人的克 -雅氏症、格斯综合症及库鲁病 ,及其它动物疾病如疯牛病 ( BSE)、传染性水貂脑病、黑尾鹿和驼鹿的慢性消耗性病、猫海绵状脑病及一些偶蹄动物类似 BSE的原型。设德兰岛绵羊痒病已发生了 2 0 0多年 ,但 2 0世纪 80年代 ,其流行呈上升趋势 ,使得设德兰羊群健康联合会 ( SFHA)不得不采取对该病进行控制和有计划消除。在这项计划中 ,共涉及到 80个羊群 (总…     

新型猪源H1N1流感病毒的分离鉴定及在实验条件下气源性传播的特点

新型猪源性H1N1流感病毒能引起人和猪的呼吸道传染性疾病,自2009年4月起在全球范围内暴发,引起广泛的关注和研究,本试验拟对其分离株的气源性传播特点进行研究。2011年1月,华东某地区出现流感疫情,本研究从病死猪的鼻腔棉拭子和肺脏中分离到1株新型猪源性H1N1流感病毒A/swine/Shandong/07/2011;用荧光定量PCR方法检测发病猪场舍内、外的空气样品中病毒含量;建立气溶胶传染模型来分析该株病毒在实验条件下气源性传播的特点。结果显示:猪舍内空气样品的阳性率为26.10%,病毒含量在3.14～5.72log10copies.m-3空气之间;舍外下风向10m处空气样品的阳性率为40.70%,病毒含量在2.24～3.77log10copies.m-3空气之间;在传染模型中,A/swine/Shandong/07/2011能够造成气溶胶感染组试验猪的感染,但感染率比直接接触组低。研究表明,A/swine/Shandong/07/2011株具有形成病毒气溶胶的能力,在实验条件下能够引起气源性感染。     

猪合环境中气载需氧菌及气载葡萄球菌的研究

本研究采用Andersen-6空气微生物收集器,选用血-葡萄糖-琼脂培养基为采样介质,对两个不同猪场8个猪舍环境空气中需氧菌总数和葡萄球菌总数进行了检测,并对葡萄球菌的菌群组成进行了分析,评价气载需氧酋和气载葡萄球菌对猪舍环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害.结果表明,2个猪场气载需氧菌的浓度分别为2.87×104、12.65×104CFu/m3,葡萄球菌的浓度分别为1.94×104、5.74×104 CFU/m3.猪舍空气中葡萄球菌主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、猪葡萄球菌、木葡萄球菌、头状葡萄球菌、科氏葡萄球菌、内葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌的浓度占葡萄球菌总浓度的24%和27%.其次是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌.从葡萄球菌菌在Andemen-6空气微生物收集器层级上的分布规律来看,主要分布在B-E级(36.9%),气溶胶颗粒直径在0.2～6μm之间.可以进入到人、畜的气管、支气管.甚至细支气管,对养殖人员和动物呼吸道存在严重危害.     

热应激对剑尾鱼HSP70家族两成员基因表达的影响

采用RT-PCR方法扩增实验动物剑尾鱼（Xiphopohorus helleri）纯系RR-B的HSP70家族两个成员的eDNA片段，并将其克隆到PMD18-T载体中测序，将测序结果与GenBank中的核苷酸序列和推导的氨基酸序列进行同源性比较。同时利用RT-PCR半定量方法研究热应激时两个成员在剑尾鱼组织中的表达。通过克隆获得了剑尾鱼的HSP70家族两个新成员的cDNA片段，两序列均包含HSP70家族的特征性签名序列和热休克蛋白的定位序列；通过对克隆片段与已发表的青锵（Oryzias latipes）等鱼类HSP70的核苷酸序列和其编码的氨基酸序列同源性比较，发现核苷酸序列同源性较高，成员一和成员二分别为85％-89％和82％-99％；氨基酸序列同源性更高，成员一和成员二分别为97％-99％和93％-99％。一般条件下，两成员在剑尾鱼肝脏、脾脏、肾脏和心脏中不表达，但热应激能刺激成员一在剑尾鱼脾脏中表达，成员二在肝脏、脾脏、肾脏和心脏中强烈表达，并可能在参与热应激保护方面起更大作用。     

畜舍气溶胶颗粒直径的空气动力学研究

采用６级ＡＮＤＥＲＳＥＮ－微生物空气样品收集器对一个犊牛舍内外环境空气进行了收集、测量、根据生物气溶胶颗粒在收集器不同级层上的分布,得知舍内外５０％￣６０％的需氧菌、厌氧菌气溶胶颗粒的空气动力学直径大于５μｍ如此大小的颗粒可到达气管和有支气管：而有７．２％￣１５．４％的气溶胶颗粒空气动力学直径在０．６５￣２．１μｍ之间,它们能进入人,畜肺泡。