饵料营养对亲虾繁殖性能及幼体质量影响研究进展

对虾亲虾繁殖性能和幼体质量较低制约着对虾养殖生产的进一步扩大及对虾苗种生产企业经济效益的提高。文章总结分析了饵料中高度不饱和脂肪酸（HUFA）、胆固醇、磷脂、中性脂肪、维生素E（VE）、类胡萝卜素等相关营养对提高亲虾繁殖性能和幼体质量的影响,发现这些研究主要体现在营养水平及其相关组成上,而有关营养需求分析的研究较少。因此,今后应深入开展满足亲虾繁殖和幼体发育需要的相关营养适宜水平及组成需求的分析研究,为选取和开发应用新型、安全、高效、优质、价廉的亲虾催熟培育可替代饵料提供更多理论依据。     

对虾肝胰腺坏死性细菌研究进展

坏死性肝胰腺炙（Necrotizing hepatopancreatiris,NHP）对世界对虾养殖业危害极大。NHP是由一种专性细胞内寄生的革兰氏阴性菌——肝胰腺坏死性细菌（Necrotizing hepatopancreatitis bacterium,NHPB）引起的。NHPB是一种类立克次体的a蛋白菌。目前在美洲中部和南部的几个国家蔓延,受感染的虾池其对虾的死亡率可高达95%。目前已被世界动物卫生组织（OIE）列入高危病原。文章综述了NHPB研究进展,对NHPB的形态特征、理化特性、引起的症状和病理变化、检测方法和防治等问题进行了介绍。     

分子标记技术在凡纳滨对虾中的应用进展

近年来,随着生物技术的迅猛发展,分子标记的应用越来越受到生物学家和育种家的重视。本文对DNA分子标记的种类及其特点进行了概述,并论述了目前DNA分子标记在凡纳滨对虾中的应用进展,同时对其应用前景进行了分析。     

红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)卵黄蛋白原未知功能结构域(DUF1943)的原核表达及纯化鉴定

通过外源表达并纯化得到红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vg)的DUF1943结构域片段,为开展其后续相关功能及机制研究奠定基础。根据GenBank数据库中公布的红螯螯虾卵Vg基因序列(登录号AF306784.1),查找到DUF1943结构域的氨基酸序列(617—918aa),对其理化性质与基本结构等进行了理论评估,结合大肠杆菌密码子偏好对其进行了序列改造和密码子优化,采用全基因合成的方法得到了DUF1943的基因片段,将其连接到Pet28a(+)内构建了Pet28a(+)-DUF1943的融合表达载体,探索了该融合载体在大肠杆菌系统中的最佳表达参数,采用溶解法和上柱层析法对收获到的蛋白包涵体进行复性。全基因合成方法制备得到的DUF1943目的基因为921 bp,成功构建了Pet28a(+)-DUF1943的融合表达载体,诱导Pet28a(+)-DUF1943表达的最佳条件为：当单克隆菌液OD₆₀₀达到0.6 时,添加0.5 mmol·L^-1 的诱导剂IPTG,置于37 ℃条件下培养4 h。表达的DUF1943多肽以包涵体形式为主,在SDS-PAGE胶的35 kDa附近呈现特异性条带,收集包涵体进行破碎,经2 mol·L^-1盐酸胍溶解和Ni-NTA层析后最终收获到的活性蛋白浓度为0.6 mg·mL^-1。成功构建了Pet28a(+)-DUF1943原核表达载体并优化了表达系统及蛋白复性方案,获得了DUF1943活性多肽,为进一步研究其生物功能及应用奠定了基础。     

几种饵料对南美白对虾亲虾性腺发育的影响

【目的】筛选能有效促进亲虾性腺发育的生物饵料,为进一步开展饵料对南美白对虾亲虾繁殖影响的研究及研发安全、高效、优质、廉价亲虾催熟培育饵料提供参考依据。【方法】以鲢鱼卵、鲢鱼肉、水丝蚓、蚯蚓、水丝蚓+鲢鱼卵、配合亲虾饲料6种饵料饲喂南美白对虾亲虾,分析比较不同饵料对南美白对虾亲虾性腺发育的影响。【结果】投喂鲢鱼肉的雌、雄亲虾性腺与肝胰腺比重、性腺指数均高于其他处理组,综合表现较好;投喂蚯蚓、配合亲虾饲料的则相对较差。【结论】相对于鲢鱼卵、水丝蚓、蚯蚓、水丝蚓+鲢鱼卵、配合亲虾饲料,鲢鱼肉对南美白对虾亲虾性腺发育有显著的促进效果,更适合开发成为亲虾催熟培育的可替代饵料。     

南美白对虾精子超低温保存前后形态和超微结构的研究

应用光学显微镜和电子显微镜对超低温保存前后南美白对虾精子的形态和超微结构进行了观察。结果发现,正常精子由圆球形的主体部和棘突组成,主体部由顶体、亚顶体区、细胞核和环核细胞质带组成。超低温冷冻处理及升温复苏后受损精子棘突脱落,顶体囊泡化,精子细胞膜皱缩、肿胀,膜间腔增大,损伤严重者,顶体脱落,核变形,核膜破裂,核出现空泡化。结果表明,超低温冷冻处理及升温复苏过程主要造成南美白对虾精子的顶体和膜结构的损伤,致使精子成活率降低。     

人工海水培育罗氏沼虾幼体试验

按海盐∶MgSO4∶CaCl2∶KCl∶H3B3O3∶KBr∶EDTA∶生石灰为2000∶600∶72∶36∶24∶4∶1∶2的比例配制成人工海水,研究在该人工海水中培育罗氏沼虾幼体的可行性。结果表明,人工海水中的Mg2+、K+、Ca2+的比值为3∶1∶1,与天然海水接近,且水质无毒性作用;人工海水培育80万尾罗氏沼虾虾苗,获得68万尾幼体,成活率约为85%,蜕皮率为16.82%,特定生长率为25.34%/d,高于天然海水的培育水平。结果表明,自制人工海水可用于罗氏沼虾幼体培育。     

罗氏沼虾生态育苗技术

<正>为了提高出苗率,很多人应用了大量的抗生素类药物,这虽然能提高虾苗的出苗率,但对虾苗自身产生很大的危害,为探索罗氏沼虾全生态育苗技术,笔者于2014年3-8月多次在广西南宁国家级罗氏沼虾良种场进行幼体培育实验,并取得了理想的结果。一、育苗场地与设施育苗池规格为1.5米×4.0米×0.8米,为了方便控制温度,育苗池内装有加热管道,充气方式为底层微孔充气,由鼓风机经管道输送到育苗车间,同时备有海水、淡水蓄水池等设施。     

同源雌核发育银鲫子代微卫星杂合位点的分离

使用14对银鲫（Carassius autatus gibelio Bloch）微卫星引物对同源雌核发育的银鲫子代及其亲本进行多态性研究，探讨雌核发育银鲫的母本微卫星杂合位点在同源传代中是否有分离的情况发生。在所选用的14对微卫星引物中，有8对在父母本间检测出不同的多态性，在所检测的第1组银鲫自交的子代中，只有1个个体在所检测的8个微卫星位点均存在变异，有明显的父本特异性条带出现，表现出了大量父本遗传信息，出现率为4．55％；在第2组检测到1个个体只在SCM13位点上出现母本部分特异性条带的缺失、弱化，而在其他位点上没有发现变异，出现率为1．52％。此结果表明，雌核发育银鲫卵子大部分在配子发生过程中没有发生减数分裂，即使用同源精子刺激，也行雌核发育生殖；但是，有极少数卵子在配子发生过程中，可能发生了部分减数分裂，具有部分融合同源精子的能力，从而在子代中检测到父本以及在融合过程中重组来的特异条带，用微卫星分于标记证实了银鲫两种生殖方式的存在，即雌核发育生殖和两性融合生殖。     

南美白对虾精子超低温冷冻保存技术研究

【目的】建立一种南美白对虾精子超低温冷冻保存方法,为南美白对虾优良种质的长期保存奠定基础。【方法】利用胰蛋白酶消化法获得游离的南美白对虾精子,分别使用灭菌天然海水、无钙人工海水、3％等渗NaCl溶液和0．9％生理盐水作为基础液,并以不同浓度的二甲基亚砜（DMSO）、甘油、甲醇及其与海藻糖的混合溶液作为抗冻剂,在4种不同降温程序下超低温冷冻保存南美白对虾精子,然后在不同的温度下复苏冷冻精子,以伊红-苯胺黑染色法检测精子存活率。【结果】使用1．00g／L胰蛋白酶消化精荚5min能获得大量游离的南美白对虾精子,以灭菌天然海水为基础液,以10％DMSO和0．25mol／L海藻糖为抗冻剂,在P．1降温程序（4℃平衡30min,以．5℃／min的速率降至-20℃;-20℃平衡5min,以-10℃／min的速率降至-80℃;-80℃平衡5min,然后置于液氮中保存）下超低温冷冻保存南美白对虾精子,经37℃水浴复苏后精子存活率最高。【结论】建立的南美白对虾精子超低温冷冻保存方法具有可行性,为南美白对虾精子冷冻保存库的建立提供了技术支撑。