奥利亚罗非鱼（♀）×鳜（♂）远缘杂交子代与亲本血液学指标的比较

本研究对奥利亚罗非鱼（Oreochromisaurea）（♀）×鳜（Sinipercachuatsi）（♂）远缘杂交子代（F2和F3）与双亲的血液常规参数和血液生化指标进行了比较,探讨杂交对子代血液学指标的影响。杂交子代具有两种来源,第一种的杂交母本为中心奥利亚罗非鱼（子代简称中心奥利亚杂交）：另一种的母本为埃及奥利亚罗非鱼（子代简称埃及奥利亚杂交）。用于对照实验的母本为中心奥利亚罗非鱼。结果显示,中心奥利亚杂交F2与对照母本F2在2个血液常规参数和1个血液生化指标上存在显著差异（P〈0．05）,与父本鳜则有6个血常规参数和4个血液生化指标具有显著差异（P〈0.05）。中心奥利亚杂交F3与对照母本F3在4个血液常规参数和2个血液生化指标上存在着显著差异（P〈0.05）,与父本鳜有6个血常规参数和4个血液生化指标具有显著差异（P〈0．05）。埃及奥利亚杂交F2与对照母本F2在4个血液常规参数和4个血液生化指标上存在着显著差异（P〈0.05）,与父本鳜则有6个血常规参数和4个血液生化指标具有显著差异（P〈0．05）。埃及奥利亚杂交F3与对照母本R在2个血液常规参数和3个血液生化指标上存在显著差异（P〈0.05）,与父本鳜则有7个参数和3个血液生化指标具有显著差异（P〈0．05）。不同品系来源的杂交后代中,2个F2群体在1个血常规参数和1个血液生化指标上具有显著差异（P〈0．05）,而2个F3群体仪1个血液生化指标具有显著差异（P〈0．05）。研究结果表明,杂交子代与双亲在血液组成上均存在差异,但其更接近于母本。这些差异可能是由于杂交所引起的遗传结构变化所致。     

罗非鱼杂交F1代与亲本的遗传关系及其杂种优势的利用

用ＲＡＰＤ 技术研究奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼杂交子代和亲本的遗传关系及其在杂种优势中的应用。在所用的１６ 个随机引物中,有１１ 个引物在罗非鱼亲代和杂交子代间呈现多态。遗传相似性指数和遗传距离的计算结果表明,正交子代（ 尼罗罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂） 在遗传关系上界于亲代之间,不表现出明显的倾向性;而反交子代（ 奥利亚罗非鱼♀×尼罗罗非鱼♂） 却与母本奥利亚罗非鱼极其相似。说明正、反交子代与两亲本遗传相似性有明显的不同,表明遗传性状介于两亲本之间的杂交子代更有可能形成显著的杂种优势。同时发现,扩增片段ＯＰＡ０７１９００ 、ＯＰＡ０７９６０ 、ＯＰＺ１４７２０ 和ＯＰＺ１４６００ 可以作为鉴别尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼和正交子代的遗传标记。     

尼罗罗非鱼p38MAPK基因克隆与表达分析

为了探究p38MAPK与尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫功能的相关性,本实验运用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)获得尼罗罗非鱼埃及品系ntp38MAPK的cDNA全长序列,结果显示,该序列全长1789 bp,开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)长1086 bp,5′非编码区(Untranslated Region,UTR)长342 bp,3′UTR为361 bp。ORF编码361个氨基酸,预测分子量为41.598 kD,理论等电点为5.10。序列含有p38家族典型保守的Thr-Gly-Tyr(TGY)双磷酸化位点以及紧密相连的底物结合位点Ala-Thr-Arg-Trp(ATRW)。同源性以及系统进化树分析结果显示,尼罗罗非鱼的p38MAPK与大黄鱼(Larimichthys crocea)和鲈(Dicentrarchus labrax)的相似性最高。采用qRT-PCR的方法研究了ntp38MAPK在各组织以及无乳链球菌感染过程中的表达差异情况,结果显示,ntp38MAPK在各组织均有表达,其中在肌肉的表达量最高,心脏、肝脏、脾脏次之,头肾中的表达量最低。无乳链球菌感染过程中,脾脏、头肾中ntp38MAPK的表达量在2 h开始上调,肝脏中4 h开始上调,8 h后肝脏、脾脏和头肾中的表达量都有所下降,24~72 h趋于平稳,表明ntp38MAPK在尼罗罗非鱼抵抗链球菌侵染过程中发挥重要作用。     

天鹅洲通江型长江故道“四大家鱼”种群遗传结构研究

利用淀粉胶电泳技术，对天鹅洲通江型故道青鱼（Ｍｙｌｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｐｉｃｅｕｓ）（６０尾），草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｕｓ）（４０尾），鲢（Ｈｙｐｏｔｈａｌｍｉｃｈｔｈｙｓｍｏｌｉｔｒｅｉｘ）（４０尾），鳙（Ａｒｉｓｔｉｃｈｔｈｙｓｎｏｂｉｌｉｓ）（４０尾）的心、眼、脑、白肌、肝五种组织中ＬＤＨ、ＭＤＨ、Ｇ６ＰＤＨ及ＥＳＴ四种同工酶进行分析，并对这几种酶的一系列基因座位作了比较和定位，以此分别计算青、草、鲢、鳙的种群遗传变异率，为构建通江型长江故道“四大家鱼”种质资源生态库提供重要依据。     

尼罗罗非鱼β-actin基因启动子的分离及其在真核细胞中的活性验证

采用高保真PCR方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)基因组DNA中分离出β-actin基因启动子序列,将β-actin基因启动子插入pN1-EGFP构建成真核细胞表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染法将重组载体导入人胚肾上皮细胞HEK 293T,荧光显微镜下观察外源基因EGFP...     

饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼生长性能、体组成、血液学指标和肝脏非特异性免疫指标的影响

本试验旨在探讨饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼生长性能、体组成、血液学指标和肝脏非特异性免疫指标的影响。以鱼粉、豆粕、棉籽粕、菜籽粕、酪蛋白和明胶为蛋白质源配制成蛋白质水平分别为25%、30%、35%、40%和45%的5种等能饲料(脂肪水平均为9%)。选取初始平均体质量为(4.70±0.01)g的尼罗罗非鱼幼鱼300尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复20尾鱼。试验期为10周。结果表明:饲料蛋白质水平对终末体质量、增重率、特定生长率、饲料系数、成活率、肥满度、肝体比和内脏比均未产生显著影响(P>0.05)。随饲料蛋白质水平的增加,蛋白质效率显著降低(P<0.05),蛋白质沉积率呈现先升高后下降的趋势。饲料蛋白质水平对全鱼水分、粗蛋白质和灰分含量无显著影响(P>0.05),而对全鱼粗脂肪含量有显著影响(P<0.05)。蛋白质水平为25%的组全鱼粗脂肪含量显著高于其他各组(P<0.05)。饲料蛋白质水平对全血中白细胞计数、红细胞计数和红细胞压积无显著影响(P>0.05),而对全血中血红蛋白含量有显著影响(P<0.05)。蛋白质水平为40%的组全血中血红蛋白含量显著高于蛋白质水平为25%的组(P<0.05)。饲料蛋白质水平对血清中肌酐、总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯和胆固醇含量以及碱性磷酸酶活性均无显著影响(P>0.05)。蛋白质水平为25%的组肝脏中溶菌酶活性最低,显著低于其他各组(P<0.05)。肝脏中超氧化物歧化酶活性各组间无显著差异(P>0.05)。肝脏中过氧化氢酶活性随饲料蛋白质水平的增加呈现先上升后下降的趋势,以蛋白质水平为25%的组最低,显著低于蛋白质水平为35%和45%的组(P<0.05)。蛋白质水平为45%的组肝脏中丙二醛含量显著高于其他各组(P<0.05)。由此可知,在饲料脂肪水平为9%条件下,饲料蛋白质水平为25%时即可满足尼罗罗非鱼幼鱼的生长需求,但适当提高饲料蛋白质水平可在一定程度上提高尼罗罗非鱼幼鱼的非特异性免疫功能。     

奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼SRY基因同源克隆和序列分析

采用人SRY基因保守序列的特异性引物，对奥利亚罗非鱼（Orcocbromis aureus）和尼罗罗非鱼（O．nilotica）雌、雄个体基因组进行PCR扩增，回收其中的600bp片段，分离克隆并双向测序。用DNAStar分析比较所得序列，表明克隆的600bp片段为SRY基因的同源序列。对两种罗非鱼雌、雄个体SRY同源序列进行多序列比较分析（CLUSTAL W分析），表明罗非鱼间SRY同源序列的相似性非常高，但仍存在性别间、种间差异。奥利亚罗非鱼雌、雄间序列相似性为99．5％，尼罗罗非鱼雌、雄间为99．5％，奥利亚罗非鱼与尼罗罗非鱼种间则为98．7％，罗非鱼与人类SRY基因间只有7．1％，结果为进一步研究罗非鱼SRY同源基因与性别决定的关系提供了可能性。根据这些结果构建了罗非鱼系统分类树，表明奥利亚罗非鱼与尼罗罗非鱼具有很近的亲缘关系。     

黄颡鱼Sox9基因的分离及分析

Sox9基因是号陛别分化形成有关的重要基因之一。以黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）为研究材料，使用RT-PCR在脑、精巢和卵巢分离和克隆到了黄颡鱼Sox9基因，序列比对分析表明，脑和精巢Sox9基因序列一致，称Sox9al（GenBank accession No．AY684328），卵巢的则与其有差异称Sox9a2（GenBank accession No．AY684329）。Sox9al与Sox9a2的核苷酸相似性为77％，氨基酸的相似性为84％，可以认定是由两个基因表达的。和其它动物Sox9氨基酸序列的同源性分析表明：黄颡鱼Soxga1与其它动物Sox9的相似性在8l％，89％之间，平均在86％左右；黄颡鱼Sox9a2的相似性在76％～86％，平均在83％左右。系统树分析揭示了Sox9为单起源，遗传距离远近也与传统分类结果一致。使用RT-PCR对Sox9a1与Sox9a2在雌雄黄颡鱼前脑和性腺组织的表达检测结果显示，Sox9a1在雌雄鱼的前脑和性腺均有表达，但Sox9a2只在卵巢表达，说明该基因可能与雌性性别形成及卵巢发育具有调控作用。     

PBP治疗低血压综合症的研究

ＰＢＰ是利用动物的内脏加工产物与中药配制而成，不含有毒化学药品或添加剂、防腐剂、色素等物质。经测定，ＰＢＰ中的各种氨基酸及微量元素含量较高而且具有提高机体免疫功能的作用，为安全有效之保健药品。经门诊试验表明，低血压综合症患者经几个疗程治疗后，其血压可以逐渐上升并持续稳定，而且患者的食欲、睡眠均转正常，其有效率达９６．７７％。     

1990年一2011年《应用生态学报》核心作者分析

基于CNKI的中国学术期刊网络出版总库,采用综合指数法,对1990年—2011年《应用生态学报》第一作者或独立作者进行分析,从中筛选并确定核心作者.结果表明:1990年—2011年, 《应用生态学报》共有核心作者43位,目前,除2位不知道现状以及4位副研究员或副教授外,其余37位均为研究员或教授.43位核心作者中,23位来自中国科学院的相关研究所,1位来自于中国水产科学研究院东海水产研究所,其余均来自国内比较著名的大学.迄今, 《应用生态学报》已拥有一支比较稳定和较高水平的核心作者群,但在激烈的学术期刊竞争中,尚需不断开发优秀作者、丰富核心作者群体.