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92.
枫香ISSR-PCR扩增条件的优化 总被引:2,自引:1,他引:1
对浙江省天台山枫香自然种群的DNA进行提取和ISSR-PCR扩增条件的优化。分析了Mg2+浓度、4×dNTP浓度、BSA浓度、模板DNA用量、引物用量、Taq DNA聚合酶用量等对反应结果的影响。建立了适用于枫香ISSR分析最适宜的反应体系:10μl PCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol.L-1Tris-HCl,pH值9.0,50 mmol.L-1KCl,0.1%TritonX-100),2.0 mmol.L-1Mg2+,0.15 mmol.L-14×dNTP,2 mg.mL-1BSA,10 ng模板DNA,6 pmol引物,0.9 U TaqDNA聚合酶,引物UBC808的最适退火温度为52.4℃。用此反应体系对天台山枫香自然种群进行了遗传多样性分析,结果显示其多态位点百分率为84.26%,Nei指数为0.2665,Shannon信息指数为0.4044,其遗传多样性处于较高水平。 相似文献
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车辆无法启动是一个相对比较常见的问题,在车辆无法启动的时候不妨从以下几点对车辆进行初步检查. 一、首先看看油表显示是否有油;很多新司机由于经验不足会忘记加油,车辆没有了油自然不能启动. 相似文献
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榧树(Torreya grandis)为中国特有的优良经济树种,种质资源十分丰富,揭示种质间的亲缘关系有利于对其进行有效保护与利用。采用ISSR分子标记技术,对16份榧树种质亲缘关系进行分析。通过对100条引物的筛选,获得13条重复性好且多态性高的引物,经扩增共得到75条清晰可辨条带,其中多态性条带41条,总多态性条带百分率P为54.67%,平均为57.04%。每条引物扩增条带数介于2~13条,平均5.77条。16份榧树种质总Shannon信息指数I为0.230 9,平均为0.242 8;总Nei基因多样性(H)为0.145 9,平均为0.153 5。P、I、H均表明16份榧树种质总体水平的遗传多样性较高。16份榧树种质的遗传距离介于0.027 0~0.385 7,平均为0.172 2;遗传相似度介于0.680 0~0.973 3,平均为0.844 3。根据遗传距离进行UPGMA聚类分析,可将16份榧树种质分为3个类群,其中第一个类群由‘东白珠’和‘细珍珠’组成;第二个类群包括‘象牙榧’、‘龙凤细榧’、‘新昌1号’、‘东榧1号’、‘东榧4号’、‘磐安20301’、‘磐安20302’、‘... 相似文献
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据从通过中塔边境卡拉苏口岸来我国新疆喀什地区购农药产品的塔籍客商了解,目前塔吉克斯坦化工产品市场对于农药有相当大的需求,市场比重越来越大,农药产品市场对防治效果好、选择性强、使用简便、易分解、毒性低的除草剂类以及家用和卫生检疫类的产品的需求日益增多。 相似文献
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目前我们国家的经济林普遍存在,系统的稳定性比较差,病害频繁发生,健康水平不容乐观,收益也大不如以前。从森林健康理论和生物灾害管理理论两方面入手,研究经济林管理的技术方法,以进一步提升经济林的健康水平,防止病虫害的发生,减少外来病毒的入侵。对于已经发生的病害问题,应该采取合适的治疗方法,及时补救,以最大程度降低损失。 相似文献
98.
99.
为探讨濒危植物夏蜡梅叶片次生代谢产物积累的一般规律,对自然条件下夏蜡梅
叶片不同
生长时期的生物碱、皂苷、游离蒽醌等3类次生代谢产物含量进行了测定与分析。结果表
明,夏蜡
梅叶片3类次生代谢产物含量随季节的不同而有差异。3类次生代谢产物总含量、皂苷含
量、游离
蒽醌含量的变化曲线均为“双峰型”,其中,3类次生代谢产物总含量、皂苷含量在5月
和9月出现2
个峰值,游离蒽醌的含量在6月和9月出现2个峰值;生物碱含量的变化曲线总体趋势逐渐
下降,
以5月最高,10月最低。 相似文献
100.
为了利用ISSR分子标记进行东南石栎(Lithocarpus harlandii)种群遗传多样性分析,获得重复性和可靠性较高的ISSR带谱,有必要对其影响因素进行优化.以东南石栎基因组DNA为研究对象,测试东南石栎ISSR扩增的最适退火温度,并采用单因素试验,对影响PCR扩增效果的一些因素,如Mg2 浓度、4×dNTP浓度、模板DNA用量、引物用量、BSA浓度、Taq DNA聚合酶用量等6个因素进行筛选和优化,最终确立了可用于东南石栎ISSR-PCR分析的最适宜的PCR反应条件:10μL PCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(200 mmol·L-1Tris-HCl,pH值8.8,100mmol·L-1 KCl,1%Triton X-100),0.5U Taq DNA聚合酶,2.25 mmol·L-1MgCl2,0.5 mmol·L-1 4×dNTP,6pmol引物,2 mg·mL-1BSA,10 ng模板DNA.在此最适条件下,比较了降落PCR的扩增结果与最适退火温度条件下的PCR扩增结果的差异,确定了最适的ISSR扩增程序:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,57℃退火1 min(每个循环降低0.5℃),72℃延伸1.5 min,共10个循环;94℃变性1 min,52℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,共25个循环;72℃延伸5 min.以此条件采用12个引物对千岛湖的东南石栎居群进行扩增,共扩增出174个DNA片段,多态位点百分率为81.61%,种群内遗传多样性处于较高水平. 相似文献