猪A组轮状病毒HN2019-01株的分离鉴定及VP6基因序列分析

为了解猪轮状病毒(RV)在河南省的流行情况及其分子遗传特征,利用反转录PCR方法,从河南某猪场腹泻样品中扩增得到RV特异性核酸片段,并将腹泻样品利用MA-104细胞进行RV的分离和传代,将分离得到的RV命名为RVA/Pig-wt/HN2019-01.对分离毒株VP6基因片段的序列测定及生物信息学分析结果表明,分离毒株V...     

落羽杉属树种及其杂交后代亲缘关系的RAPD分析

利用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术,对落羽杉属原种及其杂交后代共13个样本进行亲缘关系鉴定.从100个10 bp的随机引物中筛选出13个扩增效果较好的引物,共扩增出92条带,其中72条为多态性带.根据扩增结果进行聚类分析,结果表明杂交F1代中山杉302(落羽杉×墨西哥落羽杉)与母本落羽杉更为接近.在回交后代(中山杉302×墨西哥落羽杉)中,BCF1118与BCF1140相似系数最大;BCF11与母本F1302亲缘关系最近;BCF1118与父本墨西哥落羽杉亲缘关系最近.     

水稻种子储藏技术研究

种子是农业发展的芯片,种子的安全储藏是一项非常重要的工作.为了寻求更安全简便的种子储藏方式,延长种子寿命以提高商用价值,促进农业发展,尝试以低温冷藏方式储藏种子,以杂交水稻种子为试验材料,从控制入库种子含水量(15.0％、13.0％、12.0％、11.0％、10.0％)、包装方式(编织袋包装和铝箔袋密封包装)和储藏环境...     

落羽杉赤枯病病原菌的分离鉴定及生物学特性分析

为明确落羽杉属树木赤枯病的致病菌种类,对采自南京中山植物园及周边地区的病叶进行病原菌分离,结合形态学特征与分子生物学技术对其进行鉴定,并分析病原菌的生物学特性。结果表明,共获得9种菌种,分别标号为1~9,其中2号菌株检出率最高,占总数的36.40%,用该菌株侵染健康叶片后发病症状与自然发病症状一致,并可再次分离到2号菌株,符合柯赫氏法则;形态学鉴定结果显示,病原菌分生孢子为梭形、直或弯曲,5个细胞,顶胞和尾胞均为圆锥形,无色透明;r DNA-ITS序列分析结果表明,该菌株与斑污拟盘多毛孢Pestalotiopsis maculans同源性最高,为99.00%。结合形态特征与分子鉴定最终确定落羽杉赤枯病病原菌为斑污拟盘多毛孢。生物学特性分析结果表明,该病原菌在25℃、p H 6~7的PDA培养基上长势最好;在以淀粉为碳源、谷氨酸为氮源的培养基上生长最快。     

缓释复混肥料对马铃薯产量、土壤硝态氮含量及氮肥利用率的影响

为探讨青海省山旱区马铃薯发展的新途径,研究了缓释复混肥料对地膜覆盖马铃薯产量、土壤硝态氮含量、硝态氮累积量及氮肥利用率的影响。结果表明:施用1 050 kg·hm~(-2)缓释复混肥(RZ70)处理马铃薯产量最高,为47 240 kg·hm~(-2);较农民习惯施肥(NXG)处理增产2 175 kg·hm~(-2),增产率为4.83%;较马铃薯专用肥(MZY)处理增产5 085 kg·hm~(-2),增产率为12.06%。马铃薯从苗期到成熟期,农民习惯施肥(NXG)和马铃薯专用肥(MZY)处理显著提高了0～100 cm各土层硝态氮的含量,1 050 kg·hm~(-2)缓释复混肥(RZ70)处理显著降低了0～100 cm各土层硝态氮的含量。马铃薯生长季0～100 cm各土层硝态氮含量呈先增加后降低的趋势。硝态氮含量在团棵期出现了一个峰值,且主要集中在20～40 cm土层。随着马铃薯的生长发育,0～100 cm各土层硝态氮含量差异逐渐减小,至成熟期趋于稳定并降至最低。农民习惯施肥(NXG)处理下,马铃薯整个生育期0～100 cm土层硝态氮累积量呈现降低的趋势;除了习惯施肥(NXG),马铃薯整个生育期0～100 cm土层硝态氮累积量与土壤硝态氮含量变化一致。1 050 kg·hm~(-2)缓释复混肥(RZ70)处理下,氮肥利用率最高,达到了53.70%。较农民习惯施肥(NXG),增幅为3.38%～40.85%;较马铃薯专用肥(MZY)施肥处理,增幅为5.01%～33.25%。该结果可为缓释复混肥料在青海省马铃薯种植中的合理施用提供理论依据。     

苹果树叶片常见的缺素症状及防治技术

近年来,渭北长武随着果园面积的增大,粮食种植面积逐渐减少,果农施用有机肥量越来越少,甚至不施用有机肥,化肥的施用量越来越大,果农特别注重氮磷钾肥的施用,不注意及时补充中微量元素肥,致使果树缺素症越来越严重.为了更好地促进果业健康发展,达到提质增效的目的,笔者根据长期工作实践简要介绍果树营养失调的症状及防治技术.     

稳定表达T7 RNA聚合酶BHK-21细胞株的构建

【目的】通过建立过表达T7 RNA聚合酶(T7 RNA polymerase, T7 RNAP)的慢病毒系统,构建可稳定表达T7 RNAP的BHK-21细胞株。【方法】根据GenBank中公布的大肠杆菌BL21(DE3)基因组中T7 RNAP基因序列(登录号：NZ＿CP081489.1)设计引物,并采用PCR扩增T7 RNAP基因片段,将其克隆至慢病毒载体中,构建pCDH-CMV-T7 RNAP重组质粒。筛选阳性克隆及测序鉴定后,利用脂质体将包含重组质粒pCDH-CMV-T7 RNAP的包装系统和辅助包装质粒共转染至HEK-293T细胞,进行慢病毒的包装及纯化,获得高病毒滴度的重组慢病毒。将收集的病毒液分别以感染复数(multiplicity of infection, MOI)为1、5、10和20感染BHK-21细胞,72 h后观察荧光情况,筛选最佳MOI。将重组慢病毒在最佳MOI条件下感染BHK-21细胞,通过绿色荧光蛋白copGFP的表达观察感染细胞的阳性率。使用4μg/mL嘌呤霉素作为抗性筛选物进行多轮筛选,最终筛选得到BHK-21-T7 RNAP细胞株。进一步对所筛选的细胞株...     

2个柑橘三倍体有性群体果实糖酸性状遗传评价

【目的】探讨柑橘三倍体有性后代果实糖酸性状的遗传变异特点,为倍性杂交科学选配亲本提供理论支持。【方法】以W.默科特橘橙（MCK）为母本,异源四倍体体细胞杂种诺瓦橘柚+埃及糖橙（NS）和埃及糖橙+丹西红橘（SD）为父本倍性杂交获得的2个三倍体有性群体的成熟果实为材料,测定果实可溶性固形物（total soluble solid content,TSS）、可滴定酸（titratable acid,TA）及糖酸组分含量。【结果】三倍体有性后代果实TSS含量遗传偏向低糖亲本,TA含量遗传趋向高酸亲本,但偶有高糖低酸单株存在。蔗糖、果糖和葡萄糖是三倍体有性后代果实的主要糖组分,且以积累蔗糖为主,各糖组分含量均趋近正态分布,总糖含量低于双亲的单株较多,平均低低亲比率（ratio of lower than low parent,LL）为70.56%。柠檬酸和苹果酸是三倍体后代果实的主要酸组分,且以积累柠檬酸为主;柠檬酸含量呈偏态分布,果实总酸含量高于双亲的单株较多,平均超高亲比率（ratio of higher than high parent,HH）为76.00%。【结论】蔗糖、果糖和葡萄糖是由...     

穿龙薯蓣的病虫害防治

穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makim.)为薯蓣科多年生草质藤本植物,别名穿地龙、穿山龙,俗称穿龙骨、串地龙等。广泛分布于全球热带和亚热带。我国仅有一属(薯蓣属),约80种,分布于东北、西北、华北、华中一带。长白山区是其重要分布区和资源供应基地之一,薯蓣皂苷含量高。     

严厉打击拼装车辆促进农机健康发展——记容县整治非法拼(改)装拖拉机行动

容县位于桂东南,地处丘陵地带,部份乡镇属边远山区。近年来,随着速生丰产林业的发展,大量树木的砍伐运输,给林区道路提出了更高要求。但因目前林区道路(多是因伐林新开)窄小弯多,而作为木材运输主力的多功能拖拉机,因山路崎岖难以进出林区。为此,有的村民根据山区道路特点自行设计,拼(改)装的小型前后轮驱动拖拉机便日趋增多。这种擅自拼(改)装的小型前后轮驱动拖拉