全文获取类型
收费全文 | 763篇 |
免费 | 13篇 |
国内免费 | 36篇 |
专业分类
林业 | 19篇 |
农学 | 54篇 |
基础科学 | 31篇 |
55篇 | |
综合类 | 352篇 |
农作物 | 47篇 |
水产渔业 | 16篇 |
畜牧兽医 | 143篇 |
园艺 | 73篇 |
植物保护 | 22篇 |
出版年
2024年 | 21篇 |
2023年 | 46篇 |
2022年 | 30篇 |
2021年 | 40篇 |
2020年 | 15篇 |
2019年 | 48篇 |
2018年 | 48篇 |
2017年 | 32篇 |
2016年 | 36篇 |
2015年 | 35篇 |
2014年 | 62篇 |
2013年 | 56篇 |
2012年 | 61篇 |
2011年 | 51篇 |
2010年 | 45篇 |
2009年 | 45篇 |
2008年 | 37篇 |
2007年 | 24篇 |
2006年 | 16篇 |
2005年 | 3篇 |
2004年 | 8篇 |
2003年 | 18篇 |
2002年 | 6篇 |
2001年 | 6篇 |
2000年 | 3篇 |
1999年 | 5篇 |
1998年 | 2篇 |
1996年 | 1篇 |
1992年 | 1篇 |
1991年 | 2篇 |
1990年 | 2篇 |
1989年 | 3篇 |
1988年 | 1篇 |
1987年 | 1篇 |
1986年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
排序方式: 共有812条查询结果,搜索用时 15 毫秒
811.
为制备猫冠状病毒(feline coronavirus, FCoV)核衣壳(nucleocapsid, N)蛋白的特异性抗体,本研究将Ⅰ型FCoV(ZJU1709)的N蛋白基因全长c DNA亚克隆到pCold TF原核表达载体上,通过低温诱导表达、镍柱亲和纯化获得可溶性重组N蛋白;进一步以纯化的重组N蛋白为免疫原制备兔多克隆抗血清(多抗血清),再通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)、蛋白质印迹法(Western blotting, WB)、间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, IFA)等多种方法对兔多抗血清进行反应性鉴定。结果显示:经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside, IPTG)和低温诱导,成功表达出分子量约为100 kDa的可溶性重组N蛋白,在非变性条件下亲和纯化获得的重组N蛋白质量浓度达到1.4 mg/mL;N蛋白兔多抗血清的ELISA效价可达1×106,与真核表达的重组蛋白Flag-N以及FCoV... 相似文献
812.
检疫-扑杀是牛结核病防控与净化的重要措施,而准确诊断是有效实施结核病“检疫-扑杀”控制策略的基础和前提。近年来,许多牧场在结核检疫净化中采用牛结核皮试辅以牛结核γ-干扰素体外释放检测作为判定标准。随着两种方法结合使用的增加,皮试是否影响γ-干扰素体外释放检测日益引起关注。本研究在两个牛场分别对48头牛和55头牛进行了连续6周的γ-干扰素体外释放检测跟踪,明确了奶牛结核病γ-干扰素体外检测检出率和验证率随时间变化的规律,皮试后6周内γ-干扰素体外试验检出率呈“V”字形变化;验证率逐步上升,在皮试后7~42d维持在100%。 相似文献