仔猪生殖—呼吸道综合症病理形态学观察

对自然感染并经病毒分离和血清学定性的４头ＰＲＲＳ死胎和弱仔和２头人工感染断乳仔猪进行了病理形态学观察。１／３病例出现了病变，全身淋巴结（尤其下颌淋）、扁桃体肿大并伴有不同程度出血；脾脏，尤其脾头部肿胀。死胎和弱仔还见头部，尤其颌下肿。一侧肺前叶、心叶和膈叶前部出现体积不等的肉样病变区，断乳仔猪在该区出现散在的灰黑色栗粒大质度稍硬的病灶。喉、心外膜、肝、肾、后肢肌肉，脑侧室等见有不同程度点状出血。病     

绵羊蓝舌病发病过程中病毒抗原定位及免疫活性细胞动态观察

用云南绵羊舌病病毒（ＢＴＶ）人工摘种绵羊３０只，接毒后１～１５天，每天剖检２只，同时剖检健康对照羊２只，用免疫荧光和细胞化学技术对靶器官和免疫器官进行连续观察，在接毒后６～８天，绵羊血片中发现了荧光阳性反应红细胞，接毒后２天，口角毛囊上皮，７天，颊、鼻粘膜上皮棘细胞层棘细胞胞浆观察到病毒抗原，且接近糜烂溃疡灶含病毒抗原的棘细胞和游走进来吞噬抗原的巨噬细胞越多。在免疫器官从接毒后５～６天起就可见嗜酸     

以小鼠为模型评价重组伪狂犬病病毒rPRV-HA的免疫效力

以小鼠为动物模型，对此前构建的表达H3N2亚型猪流感病毒（SIV）血凝素（HA）基因的重组伪狂犬病病毒（rPRV-HA）进行了免疫效力评价。按每只10^5.0 TCID50 rPRV-HA的剂量通过滴鼻接种8周龄雌性BALB／c小鼠（n=60），同时设Bartha-K61免疫对照组（n=60）、非免疫攻毒对照组（n=20）和非免疫不攻毒对照组（n=10）。于免疫后不同时间分别从rPRV-HA免疫组和Bartha—K61免疫对照组随机剖杀一定数量的小鼠，其余小鼠于免疫后第28天用10^5.0 TCID50同亚型SIV毒株A／Swine／Heilongjiang／74／2000（H3N2）进行强毒攻击。攻毒后第4、7、14天分别剖杀小鼠，进行间接免疫荧光、病毒分离、血清学和病理组织学检测。结果表明，重组病毒主要分布于肺脏；免疫后14d起，从rPRV—HA免疫组及Bartha—K61免疫对照组均可检测到针对PRV的荧光抗体；从rPRV—HA免疫组可以检测到针对SIV的荧光抗体和血凝抑制抗体，而各对照组均呈阴性。攻毒后从rPRV—HA免疫组小鼠未分离到攻击病毒，血凝抑制抗体显著升高，病理变化显著轻于对照组，表明rPRV—HA免疫小鼠可以抵抗同亚型SIV的攻击，可以作为rPRV—HA免疫效力评价模型。     

猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗在小鼠体内的免疫机制及其保护效力

 【目的】欲构建具有较好交叉免疫保护效果的多组分重组亚单位疫苗，从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。【方法】 利用分子克隆和重组表达技术获得了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要毒力因子rApxI、rApxII、rApxIII、rApxIV、rApfa和rOMP。并设立以灭活苗（5×108cfu）为试验I组，以重组蛋白rApxI、rApxII、rApxIII和rOMP为试验II组，以rApxI、rApxII、rApxIII、rApxIV、rApfa和rOMP为试验III组，以PBS为空白对照组。分3次免疫BALB/c小鼠，每次间隔2周，第3次免疫后的第7天以APP1型（5×109cfu）和APP2型（5×1010cfu）进行攻毒保护试验。【结果】试验II组的4种抗体水平（ApxI、ApxII、ApxIII和OMP）和脾淋巴细胞诱生IL-2水平显著高于其它3组(P<0.05)，脾淋巴细胞增殖水平也一直高于其它3组(P>0.05)。且试验II组对APP1型保护作用（9/10）明显高于试验I组（6/10）、试验III组(5/10)和对照组（0/10），而对APP2型保护作用（无肺脏损伤）也明显优于其它3组（典型肺部损伤），显示出细胞免疫和体液免疫水平与免疫攻毒保护之间存在着正相关性。【结论】试验II组通过激活体液免疫和细胞免疫，对不同血清型APP的攻击提供了很好的交叉保护作用。     

猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染对仔猪致病性的评估

本研究通过猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)强毒共感染3周龄健康仔猪来评价其致病性。试验动物随机分为3组,空白对照组(n=3头),PRRSV单独感染组(n=3头),PCV2和PRRSV共感染组(n=6头),从而比较相互之间的差异。通过临床症状、病理学变化、病原学和血清学检查,对二者混合感染仔猪的致病性进行了研究。结果表明PCV2和PRRSV共同感染能引起仔猪断奶后多系统消耗性综合征,表现为淋巴组织肿大、出血,肉芽肿性炎症,坏死性肝炎,仔猪消瘦、生长缓慢等特征性病变;混合感染能加重PRRSV对仔猪引起的间质性肺炎的严重程度。混合感染可以出现支气管肺炎和明显的肝病变,淋巴结多呈界限明显的块状出血等典型病变。     

鸡新城疫V4弱毒疫苗免疫效果观察

选用Ｖ４弱毒疫苗免疫ＳＰＦ来航鸡，结果表明：接种该苗，１０天即产生免疫ＨＩ效价均值为５．０ｌｏｇ２，免疫后２０天达到免疫高峰ＨＩ效价均值为５．６ｌｏｇ２，免疫持续期为３４０天，此时，ＨＩ效价均值为５．０ｌｏｇ２。Ｖ４弱毒疫苗稍优于ｃｌｏｎ３－３０弱毒疫苗，但两者差异不显著。     

J亚群禽白血病Hrb-1分离株env基因克隆及gp85杆状病毒表达载体的构建

自哈尔滨某送检患病鸡群中分离出一株病毒,经RT-PCR检测、SPF鸡胚成纤维细胞增殖后,获取其前病毒DNA,采用依据原型毒株HPRS-103cDNA序列设计并合成的一对引物,PCR扩增病毒的囊膜基因,连接pMD18-T载体并转化大肠杆菌JM109,培养后提取质粒分别用HindⅢ,BamHI进行单酶切和双酶切鉴定,得到了阳性重组质粒pMD18-T-Hrb-1/env,对其进行Pst Ⅰ酶切,回收包含J亚群禽白血病病毒株Hrb-1 gp85基因的997bp片段,应用Bac to Bac杆状病毒表达系统,将外源片段与线性化的杆状病毒载体pFast Bac HTA进行连接,获得重组载体pFAST BacHTA/gp85,将该重组载体转化DH10Bac感受态细菌,在体内进行重组,经抗性和蓝白斑筛选,获得了杆状病毒重组载体Bacmid/gp85,为表达gp85并建立适于国内应用的ELISA诊断方法奠定了基础.     

从湖羊肺脏中分离绵羊肺炎支原体的鉴定

从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f，用其培养物人工感染80日龄健康绵羊，28d后剖杀，剖检可见肺表面肉粉色实变，显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列，设计一对扩增700bp片段的通用引物，直接提取肺脏组织DNA进行PCR扩增并克隆、测序。将该序列与GenBank中33种支原体序列比较，结果证明该序列与绵羊肺炎支原体（M．ovipneumonia）标准株Y．98同源性为99．9％，而与山羊支原体山羊亚种（M．capricolum subsp．capricolum，Mcc）、丝状支原体山羊亚种（M．mycoides subsp．Capri，Mmc）、丝状支原体丝状亚种LC型（M．mycoides subsp．mycoides LC，M．mmLC）等同源率为81％。以感染羊血清和Y．98与从发病羊肺脏中分离出的三株支原体茵体蛋白进行Western blot，证明均与感染羊血清有特异性反应，且与Y．98相比无明显差异，故确定分离株为绵羊肺炎支原体（M．ovipneumonia）。     

鸡传染性法氏囊病超强毒毒株的分离和初步鉴定

从死亡率高达55％的鸡传染性法氏囊病(IBD)发病鸡群的病例中分离到一株IBD强毒。该强毒可使人工发病鸡36小时发病,发病率100％,死亡率60％。剖检可见到与野外病例相同的病理变化,如肌肉、心脏、腺胃出血,法氏囊呈“紫葡萄”样外观。免疫保护性试验、血清学试验、鸡胚接种和电镜形态学观察均证明该分离物为IBD病毒。并排除了新城疫和大肠杆菌混合感染,从而表明,我国鸡群中存在不同于经典IBD病毒的超强毒变异株。     

禽网状内皮组织增殖病琼脂免疫扩散抗原的研制及应用

禽网状内皮组织增殖病（ＲＥ）琼脂免疫扩散抗原为淡粉红色液体，具有良好的特异性，与抗鸡马立克氏病、鸡传染性法氏囊病、禽白血病、鸡传染性贫血病、鸡新城疫病毒标准阳性血清不发生交叉反应。抗原还具有良好的敏感性，在实验室对人工感染ＲＥＶ的ＳＰＦ鸡７天即可检出抗体，检出率为４０％，１４天检出率为１００％。抗原在３７℃保存７天，在１５℃保存１５天，在４℃保存３０天，在－２０℃至少保存１８０天，未见效价下降。用本抗原检查血清沉淀抗体来诊断ＲＥ，是一种特异，敏感简便的方法，适于在生产中推广应用。