接种马传贫白细胞苗驴免疫形态学变化的连续观察

对接种马传贫白细胞弱毒苗后0.5～9个月的20头驴进行了免疫形态学连续观察。结果,免疫驴以免疫器官增大、免疫活性细胞活化、增殖为主要特征,既没见到马传贫证病性病理变化,但又与健康对照驴不同。本试验结果与连续跟踪的免疫马的结果相比又有很大差异:免疫驴的免疫器官增大、增重程度不及免疫马,丽免疫活性细胞增殖的幅度高于免疫马;免疫驴各免疫器官 T、B 淋巴细胞和巨噬细胞三者在平衡、增殖的基础上形成的高蜂期是在接苗后3～4个月,比马提前3个月,本文就免疫驴的免疫形态学特点进行了详尽描述,与免疫马的差异也进行了比较和讨论,揭示了发生的机理,并为免疫驴比马抗感染时间出现早、保护率高提出了免疫形态学根据.     

检测与诊断猪圆环病毒PCR技术的建立及病毒的分离鉴定

本研究建立了检测与诊断猪圆环病毒的PCR方法,并对该方法进行了标准化研究。该方法快速、敏感、特异性强,可扩增10ng的阳性质粒的DNA,可以从30μL病料组织悬液或全血中扩增检测出PCV,并且该方法可以区分PCV1和PCV-2,对其它病原微生物如PPV、PRRSV、SIV以及许多细菌不能检出。应用此方法对6省市的12个猪场的225份病料进行了检测,对阳性病料进行了病毒分离,对分离的病毒进行了电镜观察与序列测定,结果证实分离的病毒为PCV-2。     

用套式RT-PCR技术检测石蜡包埋组织中的猪瘟病毒RNA

利用套式反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,对实验性感染猪瘟病毒猪的福尔马林固定石蜡包埋组织标本中的病毒RNA进行检测,将所扩增产物点样于尼龙膜上进行Dot-blotting鉴定,扩增结果与各器官的病理组织学变化进行了比较。从攻毒对照组猪的肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结和扁桃体中检出了猪瘟病毒RNA,未从免疫攻毒猪只的脏器中检出猪瘟病毒RNA;所有扩增产物经Dot-blotting鉴定均得到了阳性信号;病毒基因的检出率与猪瘟病毒导致的病理组织学变化程度相一致。本试验成功建立了套式RT-PCR技术检测石蜡包埋组织中的猪瘟病毒RNA方法,为猪瘟病毒的诊断和回顾性分析提供了技术手段。     

琼脂免疫扩散试验和间接免疫荧光染色法在禽网状内皮组织增 …

应用琼脂免疫扩散试验和间接免疫荧光染以法检测鸡血清中抗ＲＥＶ抗体有很强的特异性，用以检测黑龙江，山东，辽宁，广东等地１７０３份鸡血清，阴性率分别为１４％和２３％，证明上述四省均有禽肉内皮组织增殖病病毒感染。     

绵羊蓝舌病发病过程中病毒抗原定位及免疫活性细胞动态观察

用云南绵羊益舌病病毒（ＢＴＶ）人工摘种绵羊３０只，接毒后１～１５天．每天剖检２只，同时剖检健康对照羊２只，用免疫荧光和细胞化学技术对靶器官和免疫器官进行连续观察．在接毒后６～８天．绵羊血片中发现了荧光阳性反应红细胞．接毒后２天，口角毛囊上皮，７天，颊、鼻粘膜上皮棘细胞层棘细胞胞浆观察到病毒抗原，且越接近糜烂溃疡灶含病毒抗原的棘细胞和游走进来蚕噬抗原的巨噬细胞越多．在免疫器官从接毒后５～６天起就可见嗜酸性粒细胞增生，巨噬细胞胞浆有病毒抗原．且在嗜酸性粒细胞周围观察到荧光强度不一、均质、多形态的抗原－抗体复合物附着．免疫器官中免疫活性细胞在接毒后６～９天受损较重，Ｔ细胞数减少．Ｂ细胞中成熟型和衰竭型浆细胞大量增加．有分泌抗体能力的未成熟型浆细胞不能形成增殖高峰，１２天后，Ｔ、Ｂ细胞增殖均形成高峰．本文就上述观察结果与动物发病、耐过等临床表现的相关性进行了讨论．     

育成鸡弯曲杆菌性肝炎的诊治

弧菌性肝炎是由弯曲杆菌属空肠弯曲杆菌引起的鸡的一种传染病。现将诊治过程报告如下： 1基本情况及临诊表现 　　该栋鸡舍实用笼位为 14256个，存栏为 14450只，全封闭负压通风，机械上料、机械刮粪、乳头饮水，在发病前的整个饲养阶段未发生任何疾病，成活率 98.2％，生长发育良好。在 115日龄时发现死亡增加，日死亡数达 10只左右。病死鸡仅表现为鸡冠苍白、拉稀，肛门周围羽毛污秽，整个大群精神状态、采食、饮水及粪便等未发现异常。 2剖检病理变化 　　在跟踪剖检过程中，发现发病初期与后期病理变化有所不同，尤其是肝脏病变。 　　…     

赤羽病病毒核衣壳蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

以纯化的重组赤羽病病毒核衣壳蛋白作为诊断抗原，建立了检测牛血清特异性核衣壳蛋白抗体的间接ELISA方法，初步组装成便于现地使用的试剂盒。经对试验条件进行优化，确定最佳抗原包被量为每孔1μg（100μL），样品稀释度为1：100，兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1：8000。经特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。应用初步研制的间接ELISA试剂盒和微量中和试验法分别对云南省的89份、内蒙古的100份牛血清样本进行了检测，以中和试验为参照，经统计学处理，得出检测临界值分别为0．411和0．303，2种方法的符合率分别为72．7％（56／77）和91．4％（85／93）。试剂盒在37℃保存3d，对敏感性无明显影响。     

猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗诱导小鼠免疫保护效果的观察

重组表达猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要毒力因子基因:apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣ、apfa和omp,以重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP组合免疫小鼠作为试验I组,重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢr、OMPr、ApxⅣ和rApfa组合免疫小鼠作为试验Ⅱ组,PBS为对照组,分3次免疫小鼠,采用背部皮下多点注射,每次间隔2周,免疫剂量为0.2 mL/只,3免后1周分别以APP1型菌Shope 4074株(5×109cfu)和APP2型菌S1536株(5×1010cfu)进行攻毒试验。通过小鼠保护率与抗体效价的相关性研究、肺部病理变化及肺脏细菌的分布情况等指标进行综合评价。结果显示,试验Ⅰ组4种重组蛋白特异性抗体水平显著高于其他两组(P<0.05),对APP1型菌攻毒的保护率(9/10)明显高于试验Ⅱ组(5/10)和对照组(0/8),小鼠的免疫保护率与抗体效价之间存在显著正相关;且该组对APP2型菌攻毒的保护作用(无肺脏损伤)也明显优于其它两组(典型肺部损伤)。间接免疫荧光试验表明试验Ⅰ组对肺脏细菌的清除效果也明显优于其他两组。本试验揭示试验Ⅰ组对不同血清型APP攻击能够提供很好的交叉保护作用,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。     

抗牛白血病试验羊肿瘤细胞膜抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

建立4株分泌抗牛白血病试验羊肿瘤细胞膜抗原(TAA)单克隆抗体细胞株,用抗鼠 Ig 亚类标准血清双扩证明4株均为 IgG,轻链为 K,染色体数平均为104.3次克隆,4次复苏,4个月传代培养,细胞分泌抗体稳定.用 TAA 包被的 ELISA 检测证明免疫鼠血清、单克隆抗体呈阳性反应,健康鼠血清呈阴性反应.中和试验 OD值与健康对照相同,抑制试验单抗 OD 值明显下降.建立了完整细胞包被的 ELISA 和间接免疫荧光检测试验羊肿瘤细胞的方法,并证明瘤细胞膜呈阳性反应,而健康羊外周淋巴及淋巴结中的淋巴细胞呈阴性反应,表现了很高的特异性,为提高牛白血病肿瘤细胞诊断和研究其肿瘤细胞发生提供了新试剂.