全文获取类型
收费全文 | 2757篇 |
免费 | 35篇 |
国内免费 | 75篇 |
专业分类
林业 | 349篇 |
农学 | 196篇 |
基础科学 | 119篇 |
129篇 | |
综合类 | 956篇 |
农作物 | 125篇 |
水产渔业 | 103篇 |
畜牧兽医 | 644篇 |
园艺 | 209篇 |
植物保护 | 37篇 |
出版年
2024年 | 11篇 |
2023年 | 26篇 |
2022年 | 27篇 |
2021年 | 35篇 |
2020年 | 34篇 |
2019年 | 57篇 |
2018年 | 60篇 |
2017年 | 44篇 |
2016年 | 45篇 |
2015年 | 40篇 |
2014年 | 107篇 |
2013年 | 82篇 |
2012年 | 86篇 |
2011年 | 107篇 |
2010年 | 126篇 |
2009年 | 159篇 |
2008年 | 138篇 |
2007年 | 126篇 |
2006年 | 152篇 |
2005年 | 128篇 |
2004年 | 128篇 |
2003年 | 77篇 |
2002年 | 80篇 |
2001年 | 64篇 |
2000年 | 72篇 |
1999年 | 62篇 |
1998年 | 53篇 |
1997年 | 50篇 |
1996年 | 57篇 |
1995年 | 59篇 |
1994年 | 65篇 |
1993年 | 84篇 |
1992年 | 47篇 |
1991年 | 59篇 |
1990年 | 47篇 |
1989年 | 59篇 |
1988年 | 23篇 |
1987年 | 27篇 |
1986年 | 29篇 |
1985年 | 25篇 |
1984年 | 26篇 |
1983年 | 15篇 |
1982年 | 18篇 |
1981年 | 10篇 |
1980年 | 13篇 |
1979年 | 3篇 |
1978年 | 3篇 |
1964年 | 2篇 |
1958年 | 2篇 |
1957年 | 4篇 |
排序方式: 共有2867条查询结果,搜索用时 0 毫秒
31.
通过对江苏西来原羊场20016—2019年湖羊母羊的产羔数据进行统计分析,研究了湖羊不同胎次与母羊产羔数之间的关系.结果表明,该养殖场湖羊平均窝产羔数2.23只,窝产羔数与窝产活羔数随着胎次增加呈先增加后下降的特征,窝产羔数的峰值在第四胎与第五胎之间.湖羊的平均窝产羔数回归方程为Y1=0.326X-0.036X2+1.... 相似文献
32.
33.
34.
利用鹿流行性出血病(EHD)病毒核酸的保守靶序列(VP7),设计引物和TaqMan荧光探针,建立了EHDV荧光定量RT-PCR技术,并进行了特异性、敏感性、重复性等实验评价。结果显示,该技术可有效检出EHD-1、EHD-2、EHD-4、EHD-7型病毒,与蓝舌病病毒(BTV)等病毒无交叉反应;对阳性模板(重组质粒)的检测灵敏度为1个copies;重复检测CV〈5%。因此,所建立的EHDV TaqMan/荧光定量RT-PCR方法可为鹿流行性出血病病毒检测提供一种快速、可靠的病原检测手段。 相似文献
35.
为建立可检测鹿流行性出血病病毒(EHDV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中EHDV的VP7基因进行序列分析,设计EHDV特异性探针并用生物素标记,与荧光编码微球偶联后与病毒VP7基因的PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪(Liquichip200)检测荧光信号建立了EHDV快速高通量液相芯片检测方法。检测结果显示,该法具有较好的特异性,不与其他虫媒病病毒反应;检测灵敏度为100个TCID50。建立了快速检测EHDV的液相芯片技术,为进一步搭建EHDV快速高通量检测平台奠定了基础。 相似文献
36.
参照GenBank中小反刍兽疫病毒(PPRV)H抗原基因序列,人工合成了PPRVH基因,将其克隆至PUC18-T质粒中,转化E.coli JM109感受态细胞,构建并选择PPRVH基因克隆重组质粒,经核苷酸序列分析正确,将其克隆至pBAD/Thio—TOPO载体中,转化E.coli TOP10感受态细胞,核苷酸序列分析证实,成功构建了PPRVH基因重组表达载体。经不同浓度L-阿拉伯糖诱导,可稳定、高效地表达PPRVH抗原。SDS-PAGE分析结果表明,用终浓度为0.2g/L的L-阿拉伯糖诱导5h的表达量最高,表达蛋白为分子质量约83ku的融合蛋白;经薄层扫描分析,其表达产量约占菌体总蛋白的10%。Western-blotting检测表明,诱导的蛋白能与PPRVH蛋白单抗发生特异性反应,说明表达的融合蛋白中含有PPRVH糖蛋白抗原。 相似文献
37.
为了建立鉴别检测小反刍兽疫疫苗毒与野毒的快速分子生物学检测方法,通过对自行测序的疫苗毒基因组序列及GenBank中登录的野毒基因组序列进行比对分析,设计了2套引物和TaqMan荧光探针,对实时荧光RT-PCR反应条件进行优化,建立了小反刍兽疫疫苗毒与野毒实时荧光RT-PCR鉴别检测方法。特异性试验证实,该检测方法只能检测到目的病毒核酸,表明其具有良好的特异性。灵敏性试验发现,检测疫苗株的最低检测限可达1.38mg/L的总RNA,检测野毒株的最低检测限为0.16mg/L的核酸。对同一样品进行重复性检测,检测的荧光扩增曲线阈值完全重舍,证明其重复性极好。从180份临床样品中,检测出2份疫苗病毒株阳性样品,其余均为阴性。结果表明,本研究所建立的实时荧光RT-PCR方法能对小反刍兽疫疫苗毒及野毒进行鉴别检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性极好的优点,是开展小反刍兽疫疫情监测的有力工具。 相似文献
38.
39.
40.
为了制备一种新型基因工程疫苗BTV-16 VLP疫苗,将蓝舌病病毒16型VP3与VP7基因片段插入杆状病毒双表达载体pFastBac Dual质粒中,通过转染Sf9细胞,同时表达VP3与VP7蛋白。经负染后电镜观察到有与蓝舌病病毒形态相似的核心样颗粒,表明蓝舌病VP3与VP7蛋白能自主组装形成核心样颗粒,并通过Western Blot试验验证该核心样颗粒与蓝舌病病毒具有相同的抗原性。因此本研究成功构建出16型蓝舌病病毒核心样颗粒,为病毒样颗粒装配打下了基础,为制备16血清型BTV VLP疫苗做好前期准备。 相似文献