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根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus , PRRSV)ORF5基因的核苷酸序列设计3对特异性引物,从重组质粒pMD- ORF5中扩增去除ORF5基因中包括全部信号肽在内的N端跨膜区(28 residues)和中部跨膜区(60 residues)。改造后的ORF5基因分别命名为ORF5-1和 ORF5-2。将2个基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-ORF5-1和pET-ORF5-2,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达和SDS-PAGE电泳分析,ORF5-1和ORF5-2基因获得融合表达,表达量分别为12.2%和39%,证明删除双跨膜区能明显提高ORF5基因的表达量。经Western blot分析,融合蛋白具有一定的免疫学活性,表明摘除跨膜区对该蛋白的抗原性影响不大。 相似文献
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影响奶牛乳腺炎抗性性状的遗传因素 总被引:1,自引:0,他引:1
乳腺炎,即乳腺组织由于细菌入侵或者物理损伤等原因引起的炎症反应。降低治疗乳腺炎的费用对于提高奶牛生产者的经济效益非常重要。抗性是指奶牛抵抗微生物系的建立、生存与繁殖的能力。抗性性状(RT)是指能够检测奶牛对病原微生物抵抗能力的性状。如果该性状受多基因控制,它应该是可遗传的,且具有遗传相关性,这样可以通过其父母代进行选育良好的基因型。如果该性状由一个或少数基因控制,我们可以用探针检测,通过其父母代可以选育较好的等位基因型。 相似文献