猪繁殖与呼吸综合症病毒ORF5基因的融合表达

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus , PRRSV)ORF5基因的核苷酸序列设计3对特异性引物，从重组质粒pMD- ORF5中扩增去除ORF5基因中包括全部信号肽在内的N端跨膜区(28 residues)和中部跨膜区(60 residues)。改造后的ORF5基因分别命名为ORF5-1和 ORF5-2。将2个基因片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-ORF5-1和pET-ORF5-2,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞，经IPTG诱导表达和SDS-PAGE电泳分析，ORF5-1和ORF5-2基因获得融合表达，表达量分别为12.2%和39%，证明删除双跨膜区能明显提高ORF5基因的表达量。经Western blot分析，融合蛋白具有一定的免疫学活性，表明摘除跨膜区对该蛋白的抗原性影响不大。     

四川省大户治理水土流失现状及对策

四川是长江上游水土流失最严重的省份.大户治理是加快水土保持生态建设步伐的重要力量.四川省各重点治理县在扶持大户治理水土流失方面进行了积极探索,总结了不少好的经验.针对存在的一些问题,提出了对策,一是完善大户治理的政策机制,二是依法加强治理大户的引导和监管.     

黄骅市海水养殖现状与发展对策

为深入贯彻落实我国现代渔业发展要求,基于黄骅市海水养殖现状,分析了当前存在的养殖水域生态环境恶化、水产种业发展滞后、海水养殖模式落后、养殖结构不合理、海水养殖产业化及品牌化程度低等问题,提出科学合理布局养殖规划,保护水域生态环境,做优做强水产种业体系,丰富海水养殖种类,推广生态健康养殖新模式,优化养殖产业结构,发挥政府引导作用,完善政策法规体系等相应的具体策略。     

日粮色氨酸水平对蛋鸡生产性能及蛋白质代谢的影响

试验旨在研究色氨酸对罗曼蛋鸡产蛋高峰后期生产性能和蛋白质代谢的影响。选用576羽300日龄、体重相近的罗曼蛋鸡随机分成4组,每组3个重复。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ~Ⅲ组分别饲喂添加400、800、1 200 g/t色氨酸的试验日粮。结果表明:试验Ⅰ组产蛋率显著高于对照组和其他处理组(P<0.05),各组间平均蛋重和料蛋比差异不显著(P>0.05);与其他组相比,试验组Ⅰ血清尿素氮显著降低(P<0.05),血清总蛋白和白蛋白含量显著提高(P<0.05);随日粮中色氨酸摄入量的增加,蛋黄中色氨酸等氨基酸沉积量增加(P>0.05)。结果提示,在蛋鸡日粮中添加适宜的色氨酸水平,有助于促进机体的蛋白质代谢,进而提高其产蛋性能。     

垂柳叶黄酮的微波提取工艺

[目的]研究利用微波提取技术提取垂柳叶中总黄酮的方法,测定不同时期垂柳总黄酮含量,以确定垂柳的最佳采收期。[方法]采用正交试验,考察微波功率、提取溶剂浓度、提取时间对总黄酮含量的影响,确定微波萃取垂柳总黄酮的最佳工艺条件,并与超声波提取法、索氏提取法进行比较。[结果]微波萃取的最佳条件为:以70%乙醇为溶剂,微波功率2 000 W,提取40 min。微波萃取40 min与索氏提取8 h、超声波提取2 h得率相当。[结论]微波萃取具有快速、高效、节能、选择性好的特点。     

猪·牛·羊源性成分实时等温扩增检测方法的建立

[目的]建立一种快速检测猪、牛、羊动物源性成分的实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。[方法]针对猪、牛、羊物种ND1、COXⅠ、cytB特异性基因分别设计LAMP引物,通过实时检测荧光强度判断反应结果。[结果]猪、羊源性成分的检测灵敏度为10 pg,牛源性成分的检测灵敏度为1 pg。对模拟掺杂肉制品检测时,掺杂猪肉、牛肉、羊肉的检出限为0.01%。[结论]该研究所建立的LAMP法特异性强、灵敏度高,能有效地对肉制品掺杂的猪、牛、羊源性成分进行检测,可作为肉类鉴别的一种快速检测方法。     

大豆对大豆疫霉菌株Pm14抗性的遗传分析及基因定位

 【目的】研究大豆对大豆疫霉菌株Pm14的遗传模式,并对其抗性基因进行定位。【方法】采用下胚轴创伤接种方法进行抗性鉴定,利用苏88-M21与新沂小黑豆构建的重组自交系群体进行遗传分析,并通过SSR技术结合BSA方法对苏88-M21的抗性基因进行定位。【结果】苏88-M21对大豆疫霉菌株Pm14的抗性由1对主效基因控制,抗病对感病表现为显性。通过分子作图,将抗性基因RpsSu定位于大豆分子遗传图谱O连锁群微卫星标记Satt358和Sat_242之间,与这2个标记的遗传距离分别为3.5 cM和7.4 cM。【结论】苏88-M21对大豆疫霉菌株Pm14的抗性是由1对单显性基因控制的,并将在苏88-M21发现的抗性基因RpsSu定位于O连锁群。     

东方百合OT系列试管鳞茎的诱导与植株再生体系的建立

[目的]通过对东方百合OT系列品种康佳德奥、罗宾娜试管鳞茎的诱导,建立康佳德奥、罗宾娜的植株再生快繁体系,为进一步建立脱毒快繁体系奠定基础.[方法]采用康佳德奥、罗宾娜不同部位的外植体进行试管鳞茎的诱导,比较用不同部位的外植体诱导的难易及快慢程度,筛选适合的诱导激素、增殖激素及生根激素水平.[结果]在百合OT系列选择外植体诱导时,最好用茎尖作外植体进行诱导;由于罗宾娜、康佳德奥所含内源激素水平不同,因而增殖培养基BA最好控制在1.0～0.5 mg/L;生根激素水平罗宾娜为NAA 0.5mg/L,康佳德奥为NAA0.3 mg/L,生根率为100;,试管苗结鳞茎率大于50;;试管苗移栽在条件容允许的情况下,用山土最为适宜,成活率可达到93;以上.[结论]在百合OT系列选择外植体诱导时,最好用茎尖作外植体进行诱导;罗宾娜的增殖培养基为MS+BA0.5 mg/L+ NAA0.5 mg/L、康佳德奥的增殖培养基为MS+BA0.5 mg/L+ NAA0.1 mg/L;生根激素水平罗宾娜为NAA 0.5 mg/L,康佳德奥为NAA 0.3 mg/L,试管苗移栽最好使用山土.     

镇麦10号在苏南地区的种植表现及高产栽培技术

正镇麦10号(曾用名镇08178)系江苏省镇江市农科院用苏麦6号×97G59配组选育而成的春性中熟小麦品种,2013年通过江苏省小麦新品种审定(审定编号:苏审麦201301)。该品种具有高产稳产、品质优良、熟期适宜、植株较矮、抗倒性好、田间发病轻、后期熟相好等特点。2012年秋季引入昆山市小麦新品系观察试验,综合性状表现好,2013年秋播起列入苏州市、昆山市品比试验,2014~2015年昆山市组织实施了较大面积的示范。现将该品种多年来在苏南地区昆山等