苦荞细胞色素CYP81家族同源基因FtP450-R4的克隆、分子鉴定及其功能分析

细胞色素P450 (cytochrome P450,CYP450)是高等植物中最大的酶蛋白家族之一,广泛参与植物的次生代谢和抗逆生理.本研究采用同源克隆和cDNA末端快速克隆(rapid-amplification of cDNAends,RACE)技术,获得苦荞(Fagopyrum tataricum) CYP81家族同源基因FtP450-R4 (GenBank登录号:KM271986).FtP450-R4 cDNA全长1770bp,5'-UTR为49 bp,3'-UTR为194bp,ORF为l 527 bp,其ORF序列可编码508个氨基酸残基的蛋白.生物信息学分析表明,FtP450-R4蛋白通过N-端4～24位氨基酸残基定位于内质网,与F3'H (flavonoid 3'-hydroxylase)、I2'H (isoflavone 2'-hydroxylase)和其他CYP450的同源性在44％～46％之间;多重序列比对显示,FtP450-R4具有CYP450中经典的基序和保守序列,但不含F3'H的特征基序(GGEK);系统进化树分析显示,FtP450-R4与拟南芥(Arabidopsis thaliana) CYP81家族和I2'H聚为一大簇,说明其可能参与苦荞黄酮类化合物的羟化或对逆境胁迫的应答.UV-B、寒冷和干旱均能引起FtP450-R4在苦养子叶中表达量的显著变化,而在胚轴中其表达量变化不显著.利用大肠杆菌(Escherchia coli) BL21 (DE3)菌株对FtP450-R4蛋白进行了可溶性表达,活性鉴定表明,重组FtP450-R4蛋白能以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate, NADPH)和山奈酚为底物进行酶促反应,具有生物学活性.本研究可为了解CYP450在黄酮合成代谢中的功能,明确苦荞黄酮代谢调控的分子机制提供了基础资料.     

施用生物质炭对不同蔬菜生长发育及重金属镉污染吸收的影响

以代表性蔬菜小白菜、樱桃萝卜、空心菜、番茄为试材,采用盆栽试验法,研究了不同生物质炭施用量(0％、1％、5％)对重金属镉污染条件下土壤酶活性、不同蔬菜作物生长性状、营养品质、膜脂过氧化及抗氧化酶系统和镉吸收能力的影响,以期评价生物质炭对不同蔬菜生长和减轻重金属镉污染的作用.结果表明:随着生物质炭施用量的增加,土壤过氧化物酶活性、土壤脲酶活性显著提高,土壤酸性磷酸酶活性受抑制;在镉污染条件下,生物质炭可显著提高不同蔬菜可食用部分生物量、维生素C和还原糖含量,且生长性状差异显著.小白菜和番茄叶片丙二醛、游离脯氨酸含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性呈下降趋势,樱桃萝 卜则相反.当生物质炭施用量为5％时,不同蔬菜的硝酸盐含量和镉积累量显著降低,其生物富集系数急剧下降.综上,生物质炭可能起到了一定的肥效作用,吸附土壤中的部分硝酸盐,促进蔬菜作物维生素C的形成,降低镉积累量和生物有效性,从而减缓了镉污染对蔬菜作物的毒害作用,利于调节蔬菜作物的生理代谢和生长发育.     

植酸酶基因工程酵母PP-NP~m-8培养条件的研究

对植酸酶基因工程菌PP-NPm-8的培养条件进行了研究,发现种龄、接种量、生长培养基初始pH值及生长时间、诱导培养基初始pH值、甲醇诱导浓度均对工程菌的产酶有很大影响,优化后的工程菌培养条件为:种龄16 h,接种量3%,麦芽汁生长培养基最适初始pH 4.5,生长培养时间18 h,麦芽汁诱导培养基最适初始pH值5.0,甲醇诱导终浓度4%。工程菌在此条件下诱导培养36 h后产酶量可达85067 U/mL,比未优化培养条件时提高了近一倍。     

产弹性蛋白酶芽孢杆菌的筛选与鉴定

从屠宰场,牛奶场和啤酒厂附近采集的土样和污水中,通过弹性蛋白平板筛选获得209株产弹性蛋白酶的细菌菌株,将弹性蛋白水解圈和菌落直径之比(HC)比值较大的83株菌通过摇瓶复筛后得到一株酶活力较高的菌株SCEL01,产酶活性达到33 u/mL。结合形态学、生理生化特性和16SrDNA序列同源性分析,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

态度、信任关系对农户安全生产行为意向的影响

通过对湖北省荆州市、枣阳市和武汉市32位水稻种植户、乡村干部和农资店主的深入访谈,发现农户的行为意向在安全生产中发挥着主导作用.由于农户与消费者之间信任关系的割裂,农户与消费者在农产品安全的主观认同标准上存在差异,农户对从事安全生产阻碍因素的感知,会降低农户从事安全生产行为的意愿.     

不同年份陈皮多糖的益生元活性比较

以不同年份的陈皮为研究对象,分析比较了其中水溶性多糖的性质和益生元活性。研究发现,与一年陈皮相比,五年和十年陈皮多糖的酯化度显著减低;体外培养实验表明五年和十年陈皮多糖的添加可以促进双歧杆菌和乳酸杆菌的增殖,同时产生大量的乙酸和少量的丁酸。结果表明五年以上的陈皮水溶性多糖对肠道菌群具有调节作用,是一种潜在的益生元。     

水杨酸对草莓白粉病的防治效果

用叶面喷施水杨酸的方法对设施栽培下的草莓进行白粉病防治效果试验,结果表明,适宜的水杨酸溶液浓度为2.0~4.0 mmol·L-1,能显著降低草莓白粉病的病情指数,施用2次防治效果好。2.0 mmol·L-1浓度的水杨酸溶液的防治效果达到87.5%,在生产中对于防治草莓白粉病具有较好的推广应用价值。     

30份四川茶树种质资源遗传多样性与亲缘关系的SRAP分析

为给四川省茶树种质资源评价与鉴定、核心种质资源筛选、遗传改良、资源保护与利用等提供参考,利用SRAP标记对30份四川茶树种质资源进行遗传多样性与亲缘关系分析。结果显示:11对SRAP引物共扩增出2744条带,其中,2474条为多态性条带,占90.16%;多态性信息指数为0.22～0.36,平均0.30;基因多样性指数为0.342 1～0.5455,平均0.422 7;Shannon信息指数为0.204 3～0.371 0,平均0.271 1。表明,30份茶树资源的遗传多样性程度较高。聚类分析表明,供试材料遗传差异较大,遗传相似系数为0.583～0.919;在遗传相似系数为0.66时,可将30份茶树资源划分为A、B两大类。