腐败梭菌无毒重组α毒素的表达与免疫保护性分析

本研究旨在获得腐败梭菌无毒重组α毒素,并评价其免疫保护性。对已知的腐败梭菌α毒素编码基因进行优化设计和人工合成,获得了缺少第212-222位共11个氨基酸编码序列的基因片段（GCSA_Δ11）。将该基因克隆至原核表达载体pET-30a（+）中进行表达与纯化。利用Western blot方法检测获得的重组α毒素（rCSA_Δ11）与腐败梭菌天然毒素抗血清的反应性,并采用小鼠检测其毒力。随后,以rCSA_Δ11制备疫苗免疫家兔,按照《中华人民共和国兽药典》（2015年版）规定的方法检测家兔血清的中和抗体效价。结果表明,rCSA_Δ11可溶表达比例可达46%,且能与腐败梭菌天然毒素抗血清反应。进一步的试验结果显示,rCSA_Δ11丧失了对小鼠的毒力,0.1 mL的一免兔血清可中和8~12个小鼠最小致死量（MLD）的腐败梭菌天然毒素;二免兔血清可中和32~45个小鼠MLD的腐败梭菌天然毒素。1个家兔MLD的腐败梭菌天然毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔得到了100%（4/4）的保护。综上表明,无毒性的rCSA_Δ11保留了良好的免疫保护性,从而为腐败梭菌病基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的试验数据。     

重组C型肉毒梭菌毒素的表达与免疫保护性分析

本研究旨在获得重组C型肉毒梭菌毒素蛋白,并评价其免疫保护性。将麦芽糖蛋白（MBP）和C型肉毒梭菌毒素重链C末端（CH_C）的编码基因序列进行优化和串联,获得基因片段GMBPCH_C。将GMBPCH_C克隆至pET28a-（＋）后转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,分别在15和37℃两种温度条件下诱导表达。利用Ni-IDA亲和层析方法对可溶性表达的目的蛋白进行纯化,从而获得重组蛋白rMBPCH_C。将rMBPCH_C与Montanide ISA 201佐剂混合制备成疫苗,免疫4只家兔,剂量为100 μg/只。根据《中华人民共和国兽药典》（2015年版）规定的方法检测一免后21 d及二免后14 d家兔血清的中和抗体效价。同时,在二免后14 d对家兔进行攻毒。结果表明,rMBPCH_C在37℃的诱导温度下,主要以包涵体的形式表达;在15℃的诱导温度下,可溶性表达的比例可达50%。一次免疫后,免疫组4只家兔血清对C型肉毒梭菌天然毒素（简称天然毒素）的中和效价均可达到1（0.1 mL血清中和1个小鼠最小致死量（MLD）的天然毒素）。二免后,家兔血清的中和抗体效价可达到4~8。用10个家兔MLD的天然毒素攻毒后,免疫组家兔得到了100%（4/4）的保护,而用1个家兔MLD的天然毒素攻毒后,对照组家兔100%（2/2）死亡。以上结果说明,rMBPCH_C具有良好的免疫原性,从而为C型肉毒梭菌病基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的试验数据。     

果胶/羧甲基纤维素钠复合涂膜液在冷鲜肉保鲜中的应用效果

冷鲜肉(猪里脊)分别用2%的果胶和羧甲基纤维素钠(二者体积比为8∶2)复合液和2%果胶溶液单独处理10 min,喷洒2%Ca Cl2溶液,自然晾干30 min后,以空白处理为对照,再用PE保鲜膜包装,于(4±1)℃条件下储藏,分析不同处理冷鲜肉的菌落总数、挥发性盐基氮、p H等指标的变化,探讨复合涂膜液对冷鲜肉的保鲜效果。结果表明,对照组和2%果胶处理组的冷鲜肉分别在储藏第13天和第16天时已经低于冷鲜肉的评价标准,腐败变质,果胶和羧甲基纤维素钠复合涂膜液处理的冷鲜肉在储藏第19天时,菌落总数对数值为6.08,挥发性盐基氮为19.8 mg/100 g,高铁肌红蛋白含量为32.06%,p H为6.65,均符合有关冷鲜肉的评价标准。说明该复合涂膜液对冷鲜肉有明显的保鲜效果,可以有效延长冷鲜肉的货架期至19 d。     

南方獭兔养殖模式化操作技术

1饲喂技术 1．1饲喂方法 先青料后精料（全价颗粒料）。 1．2饲喂量 1．2．1乳兔（出生至断奶）。18日龄开始补料,日喂4—6g,以后逐步增加,到断奶时日喂量达40-50g。每天补饲4～5次。每天喂青料50-100g。为防拉稀,乳兔补料期间不宜多喂多汁饲料。     

对中国利用外资的反思

伴随着我国经济的快速发展和整体经济环境的不断改善,近年来,外商对华直接投资一直不断增长。截至2004年12月底,全国累计批准设立外商投资企业508941个,合同外资金额10966.08亿美元,实际使用外资金额5621.01亿美元,2004年一年增速接近20%。在中国自改革开放以来经济的飞速发展过程中,外商投资在改变我国传统的经营方式、经营观     

NaCl胁迫对刚果臂形草种子萌发及幼苗生理效应的研究

研究了NaCl胁迫对刚果臂形草种子的萌发及幼苗的生理效应,结果表明:低浓度盐处理有利于促进种子萌发,对幼苗的生长也未表现出不利影响,但叶片中脯氨酸含量成倍增加;随着盐胁迫浓度的增大,刚果臂形草种子发芽率、发芽指数、活力指数及幼苗的生长高度、鲜重、干重均降低,质膜透性增加,形态和生理上都表现出盐害效应;叶片中脯氨酸和叶绿素含量增加,是刚果臂形草自身为抵御外界不良盐滞环境所做出的适应性生理效应。     

滇中温带地区红火蚁防治方法及效果评价

为筛选滇中温带高海拔地区红火蚁（Solenopsis invicta Buren）的最佳防治方法,本研究选用不同剂型的3种药剂,分别使用“惊扰撒施”法、药液“辅助喷淋灌巢”法与普通撒施法和喷淋灌巢法进行比较,探索不同方法对红火蚁工蚁减退率的影响和对蚁巢的灭除效果。结果表明：饵剂、粉剂使用“惊扰撒施”法和药液“辅助喷淋灌巢”法,对工蚁减退率和蚁巢的灭除效果均高于普通撒施法和喷淋灌巢法;药后3 d、10 d,饵剂“惊扰撒施”法和药液“辅助喷淋灌巢”法灭除效果最好,工蚁减退率和蚁巢防效均为100%;粉剂普通撒施法灭除效果最差,工蚁减退率和蚁巢防效分别为65.67%、59.62%和25.00%、25.00%。药液“辅助喷淋灌巢”法和饵剂“惊扰撒施”法对红火蚁的灭除效果较为彻底,值得推广应用,粉剂普通撒施法效果较差,不建议使用,其他方法可作备选方法轮换使用。     

质量、态度和服务决定市场占有量——从批发商的角度看蔬菜供销

“我坐在火车上,看着窗外贫瘠的黄土地,感叹道:‘我们国家还有这么穷的地方啊!’不敢相信这里真的能种出好蔬菜.”2005年,刚刚步入蔬菜批发行业的陈才林第一次来到位于祖国大西北的甘肃兰州进行考察走访时如此感慨,全因沿途看到的景象让他大跌眼镜.     

呼伦贝尔羊种公羊培育及饲养管理技术

<正>呼伦贝尔羊种公羊由于受高寒地区条件所限,配种期时间短(每年的10~11月),非配种期时间长。属于季节性发情配种,因此,抓好种公羊的育种、选留、科学饲养、规范管理和合理利用,严格按照《呼伦贝尔羊》品种标准,巩固和提高呼伦贝尔羊的优良特征,保留遗传基因,采取本品种选育提高的方法,增加品种内优良个体的比例,保持品种纯度并提高群体的质量。1种公羊的选择主要根据种公羊的体型外貌、生长发育状况和种羊场核     

利用煤矸石和蚯蚓粪进行棉花工厂化育苗的研究

以棉花工厂化育苗推荐基质为对照,以不同配比的煤矸石、蚯蚓粪代替河沙,研究了不同基质的秧苗素质及移栽后的动态生理性状.结果表明,以30％煤矸石+50％专用基质+20％蚯蚓粪和40％煤矸石+50％专用基质+10％蚯蚓粪两种基质的棉苗素质显著优于推荐基质.考虑到经济效益,则以后者配比最优,较对照节省成本30％～50％.以煤矸石和蚯蚓粪代替河沙可以显著提高秧苗质量,提高秧苗抗逆性,缩短移栽后缓苗时间,不仅能大大降低育苗成本,且有利于培育壮苗.