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[目的]从分子生物学水平对独龙牛的瘤胃纤维素酶基因资源进行筛选及酶学特性研究,为后续开发利用新的纤维素酶提供参考依据,也为揭示瘤胃微生物降解纤维素的作用机理打下基础.[方法]提取独龙牛瘤胃微生物中的大片段基因组DNA,构建瘤胃微生物基因组文库,并进行纤维素酶活性筛选,筛选获得的高活性基因经测序后进行生物信息学分析与酶学性质研究.[结果]从独龙牛瘤胃中共获得20352个阳性克隆,白斑率达92%,构建的瘤胃微生物基因组文库容量899.6 Mb,空载率1.82%.从瘤胃微生物基因组文库筛选获得2个具有纤维素酶活性的阳性克隆(B1和B2),其中,B1基因序列长1230 bp,编码409个氨基酸,基因编码产物与来自Ruminococcusalbus纤维素酶基因编码产物(β-1,4-内切葡聚糖酶,GenBank登录号P23661.1)的覆盖率高达99%,其同源性高达97%;B2基因序列长1002 bp,编码333个氨基酸,基因编码产物与Unculturedmicroorganism纤维素酶基因编码产物(纤维糊精酶,GenBank登录号ADB80112.1)的覆盖率高达99%,其同源性为83%.B1和B2基因可在Rosetta原核表达宿主菌中成功诱导表达,B1纤维素酶的最适pH为6.0,最适温度40℃;B2纤维素酶的最适pH为6.0,最适温度40~50℃.[结论]从构建的独龙牛瘤胃微生物基因文库中筛选获得2株具有较高活力的纤维素酶(B1和B2),其中,B1为β-1,4-内切葡聚糖酶,而B2为新的纤维糊精酶,可为纤维素的体外降解提供新型材料. 相似文献
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本试验旨在研究云上黑山羊生长育肥公羊能量需要量。选择体况良好、体重相近(约为30 kg)的云上黑山羊生长育肥公羊50只,随机分为5组,每组10只羊。各组分别饲喂代谢能(ME)水平为8.01(1组)、8.70(2组)、9.39(3组)、10.07(4组)、10.75 MJ/kg(5组)的试验饲粮。预试期15 d,正试期30 d。结果表明:1) 3组的平均日增重(ADG)显著高于其他各组(P<0.05),3组的干物质采食量(DMI)显著高于1、2、5组(P<0.05),3组的料重比(F/G)显著低于其他各组(P<0.05)。2)3组的粗蛋白质表观消化率显著高于其他各组(P<0.05),1组的磷表观消化率显著低于其他各组(P<0.05),2、3组的粗灰分表观消化率显著高于1组(P<0.05),5组的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维表观消化率显著高于1组(P<0.05)。3)3、4、5组的总能摄入量、甲烷能、消化能和ME显著高于1、2组(P<0.05),5组的总能表观消化率显著高于1组(P<0.05)。4)对云上黑山羊生长育肥公羊的ADG、ME和... 相似文献
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本研究对成团泛菌低分子脂多糖(Pantoea agglomerans lipopolysaccharide,LPSp)的安全性进行初步评估。本研究采用一次限量法,用昆明种小鼠进行LPSp急性经口毒性试验,了解LPSp的急性毒性;采用新西兰兔分别进行LPSp急性和多次皮肤刺激性试验以及急性眼刺激性试验,了解LPSp的皮肤和粘膜刺激性;采用豚鼠进行LPSp皮肤变态反应试验,了解LPSp的致敏性;应用平板掺入法进行鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验和小鼠骨髓细胞微核试验考察LPSp的遗传危害。急性毒性试验结果显示,LPSp对小鼠经口一次灌胃的LD50大于5000mg/kg体重,属实际无毒级别;LPSp急性和多次皮肤刺激性试验以及急性眼刺激性试验结果显示,皮肤刺激和眼刺激积分均为0分,LPSp对皮肤无刺激性、对眼睛无急性刺激性;在皮肤变态反应试验中,LPSp在各观察时间点的皮肤变态反应积分均为0分,其致敏率均为0%,说明LPSp对豚鼠无致敏性;LPSp的鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验结果呈阴性(P〉0.05);LPSp的小鼠骨髓细胞微核试验结果亦呈阴性,LPSp各剂量组的微核发生率与阴性对照组未见统计学差异(P〉0.05),而与阳性对照组有明显差异(P〈0.01)。本研究结果表明,在本实验剂量范围内,LPSp对小鼠经口毒性极低,属实际无毒级别,对家兔皮肤和眼睛无明显刺激性,对豚鼠无致敏性,对所试菌株和小鼠体细胞无诱变性和致突变性。 相似文献
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凌海地区具有二茬不足,一茬有余的气候特点,在水稻插秧前和收获后有2个多月的空挡期,不能充分提高土地利用率。为了增加复种指数,最大限度的发挥粮食增产潜力,增产增收。2007年建业乡实施了小麦和水稻套种的 相似文献
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