全文获取类型
收费全文 | 161篇 |
免费 | 5篇 |
国内免费 | 12篇 |
专业分类
农学 | 1篇 |
7篇 | |
综合类 | 77篇 |
农作物 | 2篇 |
水产渔业 | 48篇 |
畜牧兽医 | 43篇 |
出版年
2024年 | 5篇 |
2023年 | 5篇 |
2022年 | 11篇 |
2021年 | 11篇 |
2020年 | 9篇 |
2019年 | 4篇 |
2018年 | 2篇 |
2017年 | 1篇 |
2016年 | 1篇 |
2014年 | 2篇 |
2013年 | 3篇 |
2012年 | 5篇 |
2011年 | 9篇 |
2010年 | 9篇 |
2009年 | 9篇 |
2008年 | 8篇 |
2007年 | 13篇 |
2006年 | 9篇 |
2005年 | 5篇 |
2004年 | 6篇 |
2003年 | 8篇 |
2002年 | 2篇 |
2001年 | 3篇 |
2000年 | 8篇 |
1999年 | 6篇 |
1998年 | 7篇 |
1997年 | 4篇 |
1996年 | 8篇 |
1995年 | 3篇 |
1994年 | 1篇 |
1984年 | 1篇 |
排序方式: 共有178条查询结果,搜索用时 15 毫秒
31.
一株分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞的鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]应用杂交瘤技术获得稳定分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[方法]先将原核表达产物His—PoIFN一γ免疫BALB/c小鼠4次,然后进行细胞融合,再以纯化的GST—PoIFN一1作为包被抗原,用间接ELISA筛选阳性杂交瘤无性系,最终获得能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对其进行问接ELISA和Westernblot检测。[结果]试验获得l株能稳定分泌抗猪IFN一1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,被命名为B3株,经间接ELISA和Westernblot检测,该株分泌的抗体能与融合蛋白His—PoIFN一γ和GST—PoIFN一γ发生特异性反应,而与其他表达鸡γ-干扰素、His和GST蛋白等的重组质粒均不发生反应。B3株分泌的抗体小鼠腹水的ELISA效价达到1:160000,抗体亚型为IgG1型,且轻链为κ链。[结论]该研究为建立猪γ-干扰素检测方法,研究机体的免疫状态及免疫机制提供了技术基础。 相似文献
32.
为研究NDV-F蛋白抗原表位在动物免疫应答中的作用特点,作者克隆和表达了NDV-F蛋白基因的部分片段,并检测其免疫反应性.首先根据F基因和载体pGEX-4T-1的多克隆位点自行设计了1对引物,以已克隆的NDV(F48E9株)的F基因为模板,通过PCR扩增获得长度为594 bp的片段.接着在电泳和酶切鉴定后将其定向插入pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-F594,并经PCR、双酶切及测序鉴定后,进一步将其转化到大肠杆菌BL21中.最后用IPTG诱导表达,提取物用SDS-PAGE和Western-blotting分析.结果表明,该基因片段表达的融合蛋白大小约为46 000,以包涵体形式存在,并具有良好的免疫反应性. 相似文献
33.
细菌染色体DNA G+C mol%含量测定方法研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
生物体的遗传物质DNA中四种碱基G、C、A、T的排列和比例是DNA特性的决定因素。染色体DNAG Cmol%含量即DNA的碱基组成具有种特异性且不受菌龄和外界因素的影响,成为细菌分类和菌种鉴定的重要指标,其测定方法不断被改进和创新,主要包括纸层析法、浮力密度法、高效液相色谱法、热变性温度测定法(Tm法)和荧光法等,其中Tm法操作简便、精确度高、重复性好,最为常用,此法在国外早已发展,在国内也引起越来越多的重视,此法利用DNA的增色效应求Tm值(热变性温度),G Cmol%含量与Tm值呈正比例关系。简略比较了测定细菌染色体DNAG Cmol%含量的五种主要方法,具体介绍了Tm法测定细菌染色体DNAG Cmol%含量的原理、测定程序、操作注意事项、G Cmol%含量测定的意义和应用局限性及G Cmol%含量测定方法的前景展望。 相似文献
34.
[目的]研究鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)的免疫佐剂功能,构建ChIFN-γ与新城疫F蛋白抗原表位(NDV F2-3)的融合基因,并进行原核表达。[方法]以头尾相连的方式构建鸡γ-干扰素基因与NDVF2-3的pET-32a重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组子在E.coliBL21细胞进行IPTG诱导融合蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot方法分别检测表达的产物。[结果]获得了726 bpChIFN-γ与NDVF2-3融合基因,经原核表达,融合蛋白分子量约为35 000,能与相应的抗体结合。[结论]ChIFN-γ与NDVF2-3串联基因在原核细胞中能有效表达,且融合蛋白具有一定的免疫活性。 相似文献
35.
36株气单胞菌外毒素溶血性和致病性的测定 总被引:4,自引:0,他引:4
溶血试验和动物试验检测36株气单胞菌外毒素的溶血性和致病性。结果显示其中30株细菌产生的外毒素有溶血性。溶血价在菌株间差异较大。毒素的溶血介与对实验动物的致死率有明显相关性,溶血价在1:16以上的外毒素对小鼠的致死率均为100%,溶血价在1:8以下的餐毒素对小鼠的致死率在0 ̄100%。此外,两株浊和气单力培养物无菌上清液无溶血性,但对小鼠的致死率达66.6%,可能与细菌产生了胞外蛋白酶有关。 相似文献
36.
传染性法氏囊病毒分子生物学研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
传染性法氏囊病病毒(Infectiousbursal disease virus , IBDV)是鸡的重要传染病病原之一,除了直接引起3周龄~6周龄易感鸡发病死亡外,更为重要的是破坏机体的免疫器官,引起免疫抑制,导致鸡群丧失对其它病原的免疫力,给世界养鸡业造成巨大的经济损失。本文主要从病毒的特性、基因组结构和病毒蛋白及变异几方面对IBDV研究进展进行浅述。1主要特性1.1分类由于IBDV在鸡胚肾细胞上培养出现的细胞病变、对某些理化因素的抵抗力及电镜下形态同呼肠孤病毒(RH)V相似,所以一开始被误… 相似文献
37.
[目的]获得研究鸡CD8分子的单克隆抗体。[方法]用自行设计的引物PCR扩增鸡CD8分子α链部分基因片段,构建2个原核重组质粒,该片段经原核表达和纯化后免疫BALb/c小鼠,最后将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,细胞上清液用ELISA检测。[结果]PCR扩增获得大小约为510 bp的基因片段。构建的pET-32a-CD8α导入大肠杆菌,诱导表达获得了大小为39 kD的融合蛋白H is-CD8α。融合细胞经亚克隆,其上清液用ELISA检测和筛选,获得1株稳定传代和分泌抗CD8α的抗体的杂交瘤细胞株。该株细胞被命名为C11。上清液的ELISA抗体效价达1:600。[结论]该研究以原核表达的CD8α为抗原制备了1株单克隆抗体。 相似文献
38.
[目的]研究法氏囊病毒VP2蛋白的抗原表位在机体免疫应答中的作用和特点。[方法]以接种传染性法氏囊病毒(IBDV)的鸡胚尿囊液为模板,根据Genbank中登录的IBDV的VP2蛋白基因的全序列设计引物,通过RT-PCR扩增获得VP2高变区部分片段,将其克隆到原核表达质粒PGEX-4T-1中,经酶切鉴定后,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)BL21,筛选阳性克隆并对其进行测序鉴定。[结果]通过PCR扩增获得一个504bp的扩增片段,序列分析结果表明它与GenBank中登录的IBDV的VP2蛋白基因的核苷酸序列同源性达99.8%,其氨基酸序列的同源性为99.4%,说明各毒株间高变区基因序列保守性很高。[结论]法氏囊炎病毒毒株在两个大小亲水区内的氨基酸都非常保守。 相似文献
39.
草鱼细菌性败血症的诊断及流行病学调查 总被引:8,自引:0,他引:8
1998~ 1999年六安市万亩渔业基地的多种鱼类发生了细菌性疾病的流行 ,其中草鱼受损更为突出。为了研究起因 ,从根本上有效地防治此类疾病的流行 ,我们对该地区草鱼的疾病进行了诊断 ,并进行了有关流行病学的调查。1 诊断与调查方法1 1 1998年 6~ 10月和 1999年 5~ 7月 ,在六安市万亩渔业基地的精养鱼塘收集患病草鱼 ,现场观察 ,记录肉眼鉴别的症状 ,并将其用冰桶保存 ,带回实验室解剖观察后 ,对各器官进行显微检查 ;同时取症状基本一致的同批患病草鱼 (保持低温在 6h内 ) ,分离细菌。1 2 细菌的分离、培养 :无菌操作取呈弥漫性的… 相似文献
40.
应用灭活嗜水气单胞菌作为凝集原,兔源抗血清作为凝集素,比较承不同条件下微量凝集反应的结果。当菌液浓度约为10^8/ml,每孔反应液为30μl时,与常规的玻板凝集反应比较,可提高2-3个血清滴度。应用振荡器可加快反应,在10min内就可判读结果。温度(在10-37℃范围内)的影响不明显。应用该法和玻板凝集法同步检测免疫鱼鳖血清的结果表明,该法不仅具有敏感性高,提高检测率的优点(比平板法提高32%), 相似文献