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[目的]对SELEX技术中ssDNA文库的PCR扩增条件进行优化。[方法]采用L16(45)正交试验设计在4个水平上对影响单链随机DNA文库PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶含量、引物浓度和随机单链DNA文库量5个重要因素进行了优化,同时对PCR反应的退火温度和循环次数进行了优化,确立最优反应体系和扩增程序。[结果]20μlPCR反应体系及反应程序中各因素优化组合为:10×Buffer2.0μl,随机ssDNA文库0.5ng,Mg2+2.5mmol/L,dNTP Mixture0.25mmol/L,上下游引物各0.6μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5U;退火温度为68℃,最佳循环数为12。此反应系统下,随机ssDNA文库PCR扩增谱带清晰、稳定、特异性高。[结论]为SELEX技术中筛选到特异性更强的适配子奠定了基础。 相似文献
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近年来推广玉米高产优质品种,施用氮、磷化肥逐年增加。而有机肥用量不断减少,加速了土壤钾肥的消耗,因此土壤缺钾成了制约玉米高产的主要因素之一。对此我们于2000~2005年在全区多点开展玉米钾肥肥效试验,实践证明,钾肥对玉米的增产幅度可达14%~18%。增产效果显著。 相似文献
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<正>恒温动物由于其自身的新陈代谢、物质循环以及能量流动来维持自身体温的恒定,并且能够随着环境温度的变化调整自身代谢率来适应环境,体温基本恒定是保证和维持机体内环境相对稳定,维持其正常生理活动的一个重要基础。 相似文献