蛋白质周转代谢及其测定

蛋白质是生物体的重要组成部分。动物蛋白质周转是动物体内蛋白质积累形成动物产品的唯一生物学途径和基本生物学机制 ,是生物体细胞结构和功能的根本动力学过程。本文对蛋白质周转代谢的概念、术语、动物蛋白质周转代谢的意义做了阐述 ,介绍了蛋白质周转代谢的测定方法 ,并重点介绍了蛋白质周转代谢的随机分析与房室分析方法。     

几株乳酸杆菌耐逆性的比较研究

试验主要比较研究了6株乳酸杆菌对热(55℃和65℃)、酸(pH值1.0、2.0和3.0)、胆盐(0.1%和0.3%)、微量元素铜(0、10、50和250mg/L)和锌(0、120、600和3 000mg/L)的耐受性。结果表明:各菌株对这些因子的耐受性有不同程度的差异,如菌株LGG增殖速度、产酸性、耐酸性和耐温度55℃的能力都较其他菌株好,但该菌株在65℃下存活率极低;菌株ZJ614耐高温能力较强,在65℃处理20min后存活率能达到19.2%,但Cu2+(50 mg/L)对其增殖的不良影响较大;菌株ZJ621虽对酸的耐受性较强,但对胆盐的耐受性较差。经全面考察各菌株对各逆性因子的耐受性,初步推断,菌株ZJ610和ZJ617的综合耐逆性相对较强。     

两栖蔊菜种群及其入侵群落特征

两栖蔊菜(Rorippa amphibia)是近年来备受关注的入侵植物,主要出现在草坪中,并有不断向各种生境扩张的趋势,往往会成为其入侵群落中的优势种,因此研究其种群和群落特征及环境影响因素,对于更好地了解其入侵机制具有重要理论意义。本研究调查了不同小生境中受到两栖蔊菜入侵的草坪群落,采用扩散系数(C)、负二项参数(K)、平均拥挤度(m*)、丛生指标(I)、聚块性指标(PI)、Cassie指标(CA)和Green指数(GI) 7个指标对两栖蔊菜的空间分布格局进行研究,并分析两栖蔊菜的种群密度、盖度等特征。运用聚类分析、主成分分析(PCA)探讨了群落类型的差异及主要环境影响因子。结果表明,在不同生境条件下两栖蔊菜种群均呈聚集分布。无遮阴和半遮阴条件下,两栖蔊菜的种群密度分别为全遮阴条件的2.93倍和2.73倍,盖度分别为4.52倍和4.79倍,高度分别为1.57倍和2.37倍。即在全遮阴条件下两栖蔊菜种群的密度、高度、盖度均最低,且与无遮阴生境种群间差异显著(P <0.05);半遮阴条件下,两栖蔊菜的高度和盖度最高,与全遮阴生境下差异显著(P <0.05),与无遮阴生境种群高...     

酵母β-葡聚糖和抗生素对早期断奶犊牛生长性能和肠道菌群的影响

分别在犊牛代乳粉中添加酵母β-葡聚糖和杆菌肽锌,研究其对早期断奶犊牛生长性能及肠道微生物菌群变化的影响。选取20头新生荷斯坦公犊牛,随机分为4个处理,每个处理5个重复,每个重复1头牛,分别饲喂以下日粮:试验A组为基础日粮组(对照组)、试验B、C组均为基础日粮+酵母β-葡聚糖75mg·kg-1、试验D组为基础日粮+杆菌肽锌60mg·kg-1。试验全期共28d,每日记录犊牛采食量、每2周逐一称重并计算日增体质量,在试验第21天晨饲时,给A、B、D3组犊牛口服大肠杆菌(O141∶K99)肉汤培养基进行攻毒,C组继续正常饲喂。于试验第28天晨饲前,采集犊牛直肠内约10cm处靠近上壶腹黏膜部的粪便样品用于测定肠道微生物区系变化。结果显示,大肠杆菌攻毒前,B组犊牛0～14d和14～21d两阶段ADG比A组分别提高了26.18%和24.93%(P0.05);攻毒后,B、D组21～28dADG比A组分别提高了30.38%、30.82%(P0.05)。试验各期F/G,B、D组均显著低于A组(P0.05)。与A组相比,B、D组犊牛攻毒后12和24h时,直肠中大肠杆菌数量显著降低(P0.05),同时D组犊牛直肠中乳酸杆菌数量也显著降低(P0.05);C组犊牛直肠中乳酸杆菌数量显著高于A组(P0.05)。利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分析显示,B、C两组条带数多于A、D组,且C组与A、D组相比差异显著(P0.05);不同试验组犊牛的总菌区系相似性处于50%～75%。结果表明,在代乳粉中添加75mg·kg-1酵母β-葡聚糖可改善犊牛肠道微生物区系,优化肠道微生物结构,从而保证犊牛健康生长,并能在一定程度上替代或减少抗生素的使用。     

SOE PCR重构SLA-Ⅰ复合体研究

利用剪接重叠延伸PCR(SOE PCR)技术,中间加一富含甘氨酸/丝氨酸的linker(G4S)3,将SLA-Ⅰ重链基因SLA-2和轻链基因β2m连接,形成复合体基因链SLA-2-(G4S)3-β2m,然后将复合体基因链克隆入p2X表达质粒,导入受体菌TB1并进行表达。结果显示,利用SOE PCR技术成功得到了复合体基因链SLA-2-(G4S)3-β2m,并且克隆入p2X载体。SDS-PAGE检测表明,复合体基因导入宿主菌后获得了融合蛋白MBP-SLA-2-(G4S)3-β2m,大小为84.1 ku。试验结果为今后在体外进行相关基因重组表达提供参考。     

稳定转化家蚕BmN细胞表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

为了建立稳定转化家蚕细胞持续表达外源基因的技术体系,构建了基于piggyBac转座子的带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(hGM-CSF)和新霉素抗性基因(neo)表达元件的转基因载体pigA3GFP-IE-neo-FH-hGM-CSF-polyA-fib-L-intron1,以及带有hGM-CSF和吉欧霉素(zeocin)抗性基因的昆虫细胞转化载体pIZT-IE-hGM-CSF,分别转染家蚕卵巢BmN细胞,并以含相应抗生素G418或zeocin的培养液筛选,得到稳定的转化细胞系FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF。ELISA检测结果显示,hGM-CSF在FH-hGM-CSF和IE-hGM-CSF转化细胞系的表达水平分别为1.534 55 fg/个细胞和2.227 38 fg/个细胞。     

茯苓酸对SLT-Ⅱe诱导的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌P-选凝素、sICAM-1及TNF-α的影响

通过检测茯苓酸对SLT-Ⅱe诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌P-选凝素、sICAM-1及TNF-α的浓度变化,探索茯苓主要成分茯苓酸对仔猪水肿病的疗效机制.将培养的肠黏膜微血管内皮细胞分为对照组、SLT-Ⅱ e组、不同质量浓度茯苓酸处理组5个组,采用ELISA法测定了培养3,6,9,12 h细胞上清液中P-选凝素、sICAM-1及TNF-α浓度的变化.结果表明,不同质量浓度茯苓酸处理组对SLT-Ⅱ e诱导肠黏膜微血管内皮细胞过量分泌P-选凝素、TNF-α无明显的抑制作用;0 mg/L茯苓酸处理组对SLT-Ⅱ e诱导肠黏膜微血管内皮细胞sICAM-1的分泌具有明显的下调作用,使其分泌sICAM-1的浓度逐渐下降至正常水平.由此可见,茯苓酸通过抑制SLT-Ⅱ e诱导肠黏膜微血管内皮细胞sICAM-1的过量分泌,阻止白细胞与内皮细胞之间的牢固黏附,防止过度炎症反应对机体的损害,以达到治疗疾病的目的.茯苓酸保护大鼠肠黏膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量为10 mg/L.     

添加纤维素酶或甲酸对青贮菠萝茎叶饲用品质的影响

本试验旨在研究添加不同浓度的纤维素酶或甲酸青贮菠萝茎叶后对其饲用品质的影响。以菠萝茎叶作为研究材料,青贮处理方式分别为直接青贮（对照组）及添加0.1 g/kg纤维素酶、0.2 g/kg纤维素酶和3.0 g/kg甲酸、6.0 g/kg甲酸青贮,青贮45 d后进行营养成分、养分的瘤胃降解分析。结果表明,与对照组相比,2个纤维素酶处理组显著提高了单宁含量（P＜0.05）,其他成分含量均没有显著变化（P＞0.05）;3.0 g/kg甲酸处理组显著降低了氨态氮（NH₃-N）、钙和磷含量（P＜0.05）,显著提高了可溶性碳水化合物（WSC）含量（P＜0.05）;6.0 g/kg甲酸处理组显著提高了干物质（DM）、可溶性碳水化合物含量（P＜0.05）,显著降低了粗蛋白质（CP）、酸性洗涤纤维（ADF）、中性洗涤纤维（NDF）、氨态氮、钙和磷含量（P＜0.05）;6.0 g/kg甲酸处理组显著提高了72 h内干物质的瘤胃降解率（P＜0.05）,而对72 h粗蛋白质降解率和中性洗涤纤维降解率无显著影响（P＞0.05）。综上所述,在本试验条件下,添加6.0 g/kg甲酸青贮菠萝茎叶效果最好,其次为直接青贮组。     

五指山小型猪DAZAP2 cDNA的克隆及其生物信息学分析

为了克隆五指山小型猪DAZ相关蛋白2(DAZAP2)cDNA全长并进行生物信息学分析,试验以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法克隆得到DAZAP2全长cDNA序列,并运用生物信息学软件对其核苷酸序列进行分析,预测其编码蛋白的理化性质及二级结构等。结果表明:五指山小型猪DAZAP2基因的核苷酸序列及其氨基酸序列与人、苏门达腊猩猩、斑马鱼、非洲爪蟾、牛、褐家鼠等动物具有很高的相似性。DAZAP2 cDNA全长943 bp,5’非翻译区长69 bp,3’非翻译区长367 bp,含有1个完整的开放阅读框,编码168个氨基酸。该蛋白的分子质量为17 311 ku,等电点为7.48。     

植物甾醇对产蛋鸡生产性能、血液常规指标和血清生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮中添加高剂量植物甾醇对产蛋鸡生产性能、血液常规指标和血清生化指标的影响,以确定植物甾醇对产蛋鸡的安全性。选取体重和产蛋率相近的21周龄海兰褐蛋鸡360只,随机分为5组,每组6个重复,每个重复12只。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮中分别添加20、80(最高推荐有效剂量)、400(5倍最高推荐有效剂量)、800 mg/kg(10倍最高推荐有效剂量)植物甾醇的试验饲粮,预试期3周,试验期12周。结果表明:植物甾醇对产蛋鸡产蛋率、采食量、产蛋量和料蛋比均无显著影响(P>0.05),对各项血液常规指标均无显著影响(P>0.05)。植物甾醇仅对血液葡萄糖含量有显著影响(P<0.05),葡萄糖含量与植物甾醇添加量呈显著线性关系(P=0.010),对其他血清生化指标没有显著影响(P>0.05)。可知,在产蛋鸡饲粮中添加高剂量植物甾醇对产蛋鸡本身没有副作用。