双拷贝抑制素基因免疫对大鼠卵泡发育、产仔及生殖激素的影响

将90只大鼠随机分为5组,分别注射10μg.100μL-1 pcISI(T1)、50μg.100μL-1 pcISI(T2)、100μg.100μL-1(T3)pcISI、100μg空载体pcMV-S(V)和100μL生理盐水(S),以探讨在不使用免疫佐剂的情况下,不同剂量的双拷贝抑制素pcISI基因免疫对大鼠卵泡发育、产仔和生殖激素的影响。结果表明,加强免疫能提高抗体P/N值,加强免疫后各剂量组平均抗体P/N值大于2,T3组抗体P/N值显著高于T1和T2组(P<0.05)。T3组成熟卵泡数显著高于对照组(P<0.05),且抗体阳性鼠成熟卵泡数比阴性鼠多12.45个(P<0.05)。除了T1组外,其他2个剂量组产仔数和胎盘数均高于对照组(P<0.05)。抗体阳性鼠胎盘数比阴性鼠多5.09个(P<0.05),产仔数比阴性鼠多5.39个(P<0.05)。抑制素pcISI基因免疫大鼠后促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)和孕酮(P4)含量均高于对照组,T3组的FSH含量与对照组差异显著(P<0.05),T3组的E2含量与对照组差异极显著(P<0.01),各剂量组P4含量与对照组差异均不显著(P>0.05)。这些结果说明,在没有免疫佐剂的前提下,双拷贝抑制素pcISI基因免疫可产生抗体,促进FSH分泌和卵泡发育,增加产仔数。本试验条件下100μg.100μL-1是最佳免疫剂量。     

滁菊挥发油提取工艺研究

目的:采用正交试验法筛选滁菊挥发油最优提取工艺。方法:以挥发油得率为考察指标,分别以药材粉碎度、加水量、浸泡时间、蒸馏时间为考察因素进行正交试验设计,确定滁菊挥发油的最佳提取工艺。结果:影响滁菊挥发油提取的最主要因素为粉碎度,其次为蒸馏时间、加水量、浸泡时间,滁菊中挥发油最佳提取工艺条件为:菊花粉碎度80-100目,14倍加水量,浸泡10 h,提取13 h。结论:此提取工艺合理可行,试验重复性较好,可用于滁菊挥发油的提取。     

阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂诱导大鼠大脑皮质内Fos蛋白表达的影响

研究阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂(XFM)麻醉下大鼠大脑皮质Fos蛋白表达的影响,探讨阿替美唑颉颃XFM催醒大鼠与大脑皮质c-fos基因的关系。将72只SD纯种大鼠随机分为XFM对照组、XFM+阿替美唑组、XFM+生理盐水组,每组又按采脑时间点分成4个亚组。采用蛋白质印迹法检测大脑皮质内Fos蛋白表达量。结果表明:XFM麻醉大鼠大脑皮质内Fos蛋白表达量逐渐增加,与给药后10min比较差异显著(P<0.01或P<0.05);XFM麻醉大鼠腹腔注射生理盐水,各时间点Fos蛋白表达量与对照组间比较无显著差异(P>0.05);阿替美唑注射后引起XFM麻醉大鼠大脑皮质Fos蛋白表达量减少,与XFM对照组比较差异显著(P<0.01或P<0.05)。结果提示,大脑皮质c-fos基因参与了阿替美唑颉颃XFM麻醉作用。阿替美唑抑制XFM诱导大鼠大脑皮质Fos蛋白表达,可能是阿替美唑催醒XFM麻醉大鼠的重要机理之一。     

重组SEA增强H5亚型禽流感灭活疫苗对肉鸡的免疫效果研究

为评价重组葡萄球菌肠毒素A(rSEA)对H5亚型禽流感病毒(AIV)灭活疫苗免疫效果的影响,本研究以原核表达的rSEA为免疫增强剂,制备成含有rSEA高(167 μg/0.5 mL)、低(16.7 μg/0.5 mL)两种剂量的AIV油乳剂灭活苗,分别免疫7d龄肉鸡,通过检测免疫鸡AIV HI抗体滴度及外周血CD4+/CD8+值评价其免疫效果.HI 抗体检测结果显示,免疫后2周高剂量组HI抗体平均滴度为5.6 log2,低剂量组为4.2 log2,而无rSEA疫苗对照组为2.9 log2(p＜0.01);同时在免疫后前4周,rSEA免疫组的HI抗体平均滴度及峰值与对照组相比均差异显著(p＜0.05).T淋巴细胞亚群检测结果显示,肉鸡免疫高剂量rSEA的灭活苗后,其外周血CD4+百分含量及CD4+/CD8+值均显著高于对照组(p＜0.05).上述结果表明,rSEA作为AIV灭活苗免疫增强剂,能够快速诱导较高的HI抗体滴度,同时也可增强细胞免疫反应,有效缩短免疫空白期,使肉鸡短时间内产生较强的免疫应答反应.     

鸭DCN基因编码区扩增、序列分析及其在大肠杆菌中的表达、蛋白纯化

采用RT-PCR方法从鸭腿肌总RNA中扩增了鸭核心蛋白聚糖基因编码区序列,进行序列分析,并将编码鸭核心蛋白聚糖成熟蛋白的核酸片段连入原核表达载体pET-32a(+)中,加入IPTG诱导其表达后,亲和层析纯化表达的蛋白。采用SDS-PAGE检测,用质谱方法对表达的蛋白进行鉴定。研究成功克隆出鸭核心蛋白聚糖基因编码区序列,序列分析表明,鸭DCN编码区序列由1074个碱基组成,编码357个氨基酸,其中信号肽有16个氨基酸。将鸭DCN蛋白划分为9个结构域(LRR1-9),结合人DCN序列进行序列分析推测结构域中LRR4、5与TGF-β可能存在一定关系。SDS-PAGE检测和质谱鉴定结果表明获得了分子量为54.7ku的鸭DCN融合蛋白。     

猪圆环病毒2型LN株初步分离与全基因组测序

为了解猪圆环病毒2型(PCV-2)在河南地区猪场的流行情况,采用常规方法对采集自河南省洛阳市某猪场病料中的PCV-2进行了分离,并对其全基因组进行了扩增、克隆和测序。结果表明,从患病仔猪的病料中分离到了1株PCV-2,命名为LN株,该毒株的全基因组序列大小为1 767 bp。该试验结果为从分子水平上揭示PCV-2的致病特性,开发PCV-2的相关疫苗和诊断产品奠定了基础。     

激素对白三叶愈伤组织形成的影响及体细胞胚的组织学观察

以白三叶3个品种瑞文德、铺地和海法的子叶和下胚轴为外植体,采用正交设计试验研究2,4-D、6-BA和KT三种生长调节剂的不同浓度水平对白三叶愈伤组织诱导及继代的影响,筛选最佳激素组合并进行体细胞胚的组织学观察.结果表明:同一品种同一时期不同外植体愈伤诱导的最佳激素组合不相同,不同品种间也不一致;瑞文德子叶胚性愈伤诱导的最佳培养基为改良SH+2,4-D 2mg/L+6-BA 0.35mg/L+KT 0.5mg/L,下胚轴为改良SH+2,4-D 2mg/L+6-BA 0.2mg/L+KT 0.35mg/L;铺地子叶胚性愈伤诱导的最佳培养基为改良SH+2,4-D 2mg/L+6-BA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L,下胚轴为改良SH+2,4 D 5mg/L+6-BA 0.35mg/L+KT 0.5mg/L;海法子叶胚性愈伤诱导的最佳培养基为改良SH+2,4-D 2mg/L+6-BA 0.2mg/L+KT 0.35mg/L,下胚轴为改良SH+2,4-D5mg/L+6-BA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L.组织学观察表明,体细胞胚的发育经历球形胚、心形胚、鱼雷胚及子叶胚四个阶段后形成一个完整的体细胞胚.     

麦卢卡蜂蜜的抗菌活性及其机理

麦卢卡蜂蜜是产自新西兰的一种医疗级蜂蜜,具有优越的抗菌活性,是近年来国际蜂蜜研究的一大热点。综述了麦卢卡蜂蜜的抗菌种类、抗菌效果,麦卢卡蜂蜜中甲基乙二醛等抗菌活性物质以及可能的抗菌机理方面的研究进展,以期为蜂蜜抗菌活性的研究及其应用提供参考。     

一起蛋雏鸡皮肤型鸡痘病毒与大肠埃希菌混合感染的病理学观察

采用细菌分离技术、病理组织学观察、PCR鉴定及致病性试验对临床一例疑似雏蛋鸡皮肤型鸡痘混合感染进行了确诊。结果显示,病鸡眼分泌物及脚趾结痂处均分离到大肠埃希菌,内脏器官未分离到细菌。组织学观察发现,在皮肤痘痂和眼睑组织内发现上皮细胞呈水泡变性,空泡化,胞质内出现圆形嗜酸性包涵体,腺胃胃壁增厚,复管腺腺腔内可见局灶性的淋巴细胞样细胞聚集,肺脏淤血,散在的肝细胞和肾小管上皮细胞变性、坏死,其他内脏器官未出现明显病变。体表病灶内PCR扩增出1 358bp的禽痘病毒的特异性片段。将痘痂病料接种9日龄的SPF鸡胚可致鸡胚死亡,呈暗红色。确诊该起病例为皮肤型鸡痘伴大肠埃希菌局部感染。     

BVDV对后备牛生长发育状况及繁殖性能的影响

牛病毒性腹泻/黏膜病(BVD/MD)是一种严重危害奶牛健康的病毒性传染病,其病原为牛病毒性腹泻病毒(BVDV)。BVDV感染牛后主要表现两种状态,即一过性感染(TI)和持续性感染(PI)。BVD在牛场的流行,可严重影响奶牛的生产性能、繁殖性能及牛群健康状况,对奶牛的影响可表现为流产、胎儿畸形、腹泻和免疫抑制等。怀孕母牛在特定妊娠阶段感染BVDV后,可娩出PI犊牛,部分PI犊牛能像正常犊牛一样生长发育至成年,但其生长发育状况和繁殖性能较同龄健康牛差异十分明显。为评价BVDV对后备牛生长发育及繁殖状况的影响,笔者采用ELISA方法检出北京地区28个规模化奶牛场141头BVDV-PI牛,并与同龄健康牛生长发育及繁殖数据相比较,结果表明,BVDV-PI后备牛各月龄段的体高、体重均低于健康后备牛,其首次输精日龄、配准日龄、耗精量明显高于健康后备牛,而一次情期受胎率显著低于健康后备牛。数据显示,BVDV严重影响后备牛的生长发育及繁殖状况。