H5N1亚型禽流感病毒A/Guangxi/1/2005株抗药机制的研究

为研究H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的抗药机制,本研究选取Clade2.3.4亚群中一株对金刚烷胺敏感的人源AIV A/Guangxi/1/2005(H5N1)(S-GX05),用抗流感病毒药物金刚烷胺对其进行定向诱导,筛选出一株抗药性病毒株,命名为R-A/Guangxi/1/2005(R-GX05)。通过全基因测序并与S-GX05全基因序列进行对比,结果显示S-GX05只在其M2蛋白中有一个氨基酸位点发生突变,即A30P;抗药性鉴定这两株病毒的半数药物抑制浓度(IC50)分别为0.9μM和48.9μM,表明R-GX05对金刚烷胺表现出一定程度的抗性。动物实验证实,这两株病毒对BALB/c小鼠的致病性基本一致,均表现出高致病性,其MLD50分别为4.7 log10 EID50和5.0 log10 EID50,两株病毒在小鼠体内各组织脏器中的分布及增殖能力也基本相同。这些结果表明,S-GX05在药物压力下产生抗药性后,并未引起其它生物学特性的改变。A30P的发现为进一步从分子水平上研究H5N1亚型AIV的抗药机制及新型抗流感新药的研发奠定了基础。     

中华蜜蜂和意大利蜜蜂对糖浓度的反应

为了研究蜜蜂嗅觉反应,选取葡萄糖、蔗糖和果糖,将浓度为1%,3%,5%,7%的糖对饿过2 h的蜜蜂进行不接触刺激,观察蜜蜂吻伸展的情况.结果表明:当糖浓度在1%～5%时,随着糖浓度增加,中蜂和意蜂吻伸展率都显著性增大;糖浓度为1%和3%时,中蜂显著偏好于蔗糖,但当浓度等于或高于5%时,中蜂吻伸展率在各类糖之间差异不显著.意蜂在糖浓度为1%时,蜜蜂偏好于蔗糖和果糖,但当浓度等于或高于3%时,则蜜蜂吻伸展率在各类糖之间差异不显著.     

散养条件下不同设施配置对蛋鸡产蛋性能、鸡蛋品质和空气质量的影响

为比较散养条件下不同设施配置对商品蛋鸡产蛋性能、鸡蛋品质和舍内空气质量的影响,采用单因子设计,选取23周龄商品代蛋用型北京油鸡2800只,随机分为4组,每组630只,每组设3个重复,每个重复210只。均采取舍外散养、舍内地面铺设厚垫料方式。各组配置分别为:1组(对照组)配置平铺型栖架,标准产蛋箱;2组配置平铺型栖架,普通产蛋箱;3组配置直立型栖架,普通产蛋箱;4组配置直立型栖架,标准产蛋箱。观察测定鸡只24~32周龄产蛋性能、产蛋位置和鸡蛋品质变化,以及32周龄平均氨气、二氧化碳浓度。结果表明,散养条件下不同设施配置对蛋鸡24~32周龄的产蛋性能具有显著影响,配置平铺型栖架和标准产蛋箱的对照组产蛋率(平均值为33.25%)显著高于配置平铺型栖架和普通产蛋箱组(平均值分别为21.83%、26.04%、27.48%,P<0.05)。同时蛋箱内第一层的产蛋比例要显著高于第二层(P<0.05),而不同配置对24~32周龄鸡的蛋品质影响不显著(P>0.05)。32周龄3、4组的平均氨气、二氧化碳浓度均显著高于1、2组(P<0.05)。可见,散养条件下舍内设施的应用有助于提高蛋鸡产蛋率,尤其是在配置平铺型栖架和标准产蛋箱的情况下,而且对舍内空气质量也有一定影响。     

替米考星和甲硝唑对猪外周血淋巴细胞增殖的影响

采用细胞形态学观察、淋巴细胞标记和噻唑兰(MTT)法,探究替米考星和甲硝唑单独用药和联合用药对猪外周血淋巴细胞转化率、α-醋酸萘酯酶法阳性率和淋巴细胞增殖的影响。试验结果显示甲硝唑具有提高细胞免疫的功能。在体外试验时,终浓度为0.25~100μg/mL的甲硝唑可以促进淋巴细胞的增殖和转化;在体内试验时,浓度为2.5~10 mg/kg的甲硝唑可以增加成熟T淋巴细胞的数量。但是替米考星在体内和体外试验的结果却与阴性对照差异不显著,表明它不具有促进或抑制淋巴细胞增殖的能力,对机体的细胞免疫无影响。     

二氟沙星对实验性感染猪支原体性肺炎及链球菌病的药效学研究

以试管两倍稀释法测得二氟沙星对猪肺炎支原体（ Ｆ１６ 株）和兰氏 Ｃ 群类马链球菌（ Ｃ５５ １ ２０ ）的最小抑菌浓度分别是０１６ｍ ｇ／ Ｌ及 １６ｍ ｇ／ Ｌ。肌注给药对猪支原体性肺炎及链球菌病的实验性治疗结果表明,低、中、高剂量二氟沙星组（２５、５、１０ｍ ｇ／ｋｇ）及蒽诺沙星组（２５ｍ ｇ／ｋｇ）用药 ５ 天（每隔 １２ 小时给药一次）对猪支原体性肺炎的治愈率分别是 ８０％ 、９０％ 、１００％ 及９０％ ;而支原体感染对照组的自愈率为１０％ 。低、中、高剂量二氟沙星组及蒽诺沙星组（２５ｍ ｇ／ｋｇ）用药 ４ 天（每隔 １２ 小时给药一次）对猪链球菌病的治愈率分别是 ５０％ 、８０％ 、８０％ 及 ８０％ ,而链球菌感染对照组的死亡率为 ５０％ 。     

大肠杆菌acrR插入序列对acrAB表达水平及多重耐药性的影响

为研究大肠杆菌(E.coli)分离株ED28的acrR基因中777bp插入片段对外排泵AcrAB表达水平及多重耐药性的影响,本研究将野生型acrR通过互补实验导入ED28中得到C-ED28。通过药物的最低抑菌浓度(MIC)测定、有机溶剂耐受性试验和实时定量PCR(qPCR)等方法检测菌株中AcrAB外排泵的活性。通过PCR方法检测ED28和C-ED28喹诺酮耐药决定区(QRDR)的氨基酸突变及携带的质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因。结果显示,临床分离菌株ED28对12种抗生素呈多重耐药表型,而互补菌株C-ED28恢复了对多种药物的敏感性。当能量抑制剂(CCCP)存在时,喹诺酮类和β-内酰胺类药物对ED28的MIC普遍降低,而对C-ED28的MIC保持不变。ED28对染料溴化乙锭(EB)的MIC为512μg/mL,对正己烷和环己烷耐受;而C-ED28对染料EB的敏感性增强,MIC为16μg/mL,对正己烷耐受,对环己烷不耐受。qPCR结果显示,基因acrA和acrB在C-ED28中的表达水平低于亲本菌株ED28,而基因marA在C-ED28中的表达水平高于ED28。靶位突变检测和耐药基因检测结果显示,ED28存在gyrA(Ser83Leu和Asp87Asn)和parC(Ser80Ile)双突变,携带aac(6’)-Ib-cr、blaCTX-M-27和blaTEM-13个质粒编码耐药基因;而C-ED28仅存在gyrA(Asp87Asn)一个突变位点,并丢失aac(6’)-Ib-cr、blaTEM-1两个基因。     

红砂种群繁殖特性的研究

以 2个不同生境条件及发育阶段的红砂种群为对象 ,开展了红砂种群繁殖特性的研究。结果表明 ,红砂除以种子和根基劈裂方式繁殖外 ,特定条件下还存在不定根繁殖方式。3种繁殖方式在种群繁殖中所占比例因种群所处生境及发育阶段的不同而有较大差异。位于干旱、沙化生境的成熟阶段红砂种群以无性繁殖为主 ,占种群繁殖比例的 72 .4 % ,样地内未见当年实生苗和幼龄有性繁殖个体。位于相对湿润、以侵入种出现在山地草原的幼龄阶段种群以有性繁殖为主 ,占种群繁殖比例的 5 3.5 % ,其中当年实生苗占 3.9%。两个红砂种群中 ,红砂灌丛的劈裂繁殖体数与冠径均呈显著的正相关关系 (n=30 ,P<0 .0 1)。不定根繁殖与灌丛大小不相关 (n=30 ,P>0 .0 5 ) ,其发生主要依赖于枝条被流沙掩埋后 ,再遇降水使沙土含有足够萌根的水分。封育条件下 ,红砂种群当年仅有 4 8%的灌丛开花结实 ,平均种子产量为 0 .89g/丛 ,变化在 0 .0 4～ 3.6 3g/丛之间。此外 ,讨论了繁殖特性与环境条件的关系     

农户种草意愿及其影响因素的实证分析

为寻求促进扩大栽培牧草种植面积的有效途径,本研究对西藏拉萨、日喀则和山南地区的797个农户的种草意愿情况进行调查,并采用Logistic回归分析对影响该地区农户种草意愿的因素进行分析。结果表明,农户的受教育年限、家庭总收入、耕地总面积、牲畜头数、牧草种子来源受到政府或项目支持及农户参加牲畜合作社对农户种草意愿具有积极的影响,而家庭劳动力人数对种草意愿具有负向影响。其中,户主年龄、家庭人口数和户主是否有村干部或科技特派员经历3个因素对种草意愿无显著影响。基于以上研究结果,本研究提出了加快普及种草养畜相关知识、研发适宜农区种草相关技术和加强牧草种植补贴额度的对策。     

油茶耐低磷指标鉴定及芽苗砧筛选

目的 本研究旨在探讨不同油茶半同胞子代实生苗的耐低磷能力,筛选耐低磷性强的砧木以及可用来鉴定油茶耐低磷性的关键指标,为油茶良种繁育以及耐低磷的机制研究奠定基础。 方法 以12个品种油茶的半同胞实生苗为研究对象,进行盆苗试验,设定正常磷1 mmol·L−1 KH2PO4、低磷0 mmol·L−1 KH2PO4 2个浓度,测定生物量、叶形态、根系形态、全磷等14个指标,以耐低磷系数为衡量油茶耐低磷的依据,建立逐步回归模型判别耐低磷关键指标。 结果 低磷胁迫减少了大部分油茶地上部分和根系的生物量积累,增加了根冠比和总磷利用效率。主成分分析将14个指标转化为4个独立的综合指标,累计贡献率达90.398%。依据综合评价值（D）,12个品种油茶半同胞子代聚类为3种类型,其中,GF20、CL3、84-3为相对不耐低磷类型;W1、CL53、GX48为中间型;G8、CL4、W2、CL40、CL18、83-4为相对耐低磷类型。PA（总磷积累量）、SPC（地上全磷）、TRA（总根表面积）、LW（叶宽）、RPC（根全磷）指标的回归模型为：D = −0.960 + 0.666PA + 0.341SPC + 0.379TRA + 0.460LW + 0.197RPC。 结论 低磷胁迫或许会抑制油茶的生长,但普遍增加根冠比和总磷利用效率。长林18、长林40、赣8、长林4、赣无2、赣石83-4相对耐低磷。总磷积累量、地上全磷、总根表面积、叶宽、根全磷可作为油茶耐低磷性的判断指标。     

紫薇花器官发育调控基因LiFUL1的分离与表达分析

紫薇湘韵具有只开花不结实的特性,表现为花药不开裂、花粉败育、胚珠发育异常。紫薇红叶为普通紫薇,可正常开花结实。以紫薇湘韵为试验材料,采用RT-PCR方法,从花芽中分离得到1个FRUITFULL(FUL)同源基因,命名为LiFUL1(GenBank登录号为MN894547)。序列分析结果表明,其cDNA开放阅读框长度为753 bp,编码251个氨基酸,分子质量为28.453 13 ku。序列比对和保守结构域分析结果表明,LiFUL1基因编码蛋白具有典型的MADS-MEF2和K-box结构域,C末端含有一个保守性高的基序euFUL MOTIF,因此,LiFUL1属于MADS家族的FUL/AP1亚家族。进化分析表明,紫薇的LiFUL1基因编码的蛋白氨基酸序列与木本植物蓝桉的FUL/AP1氨基酸序列亲缘关系最近。qRT-PCR分析结果表明,LiFUL1基因在紫薇湘韵花器官分化阶段的花萼分化时期、花瓣与雄蕊分化时期、雄蕊与雌蕊分化时期的表达量显著高于紫薇红叶。另外,利用原核表达系统在大肠埃希菌中成功表达了LiFUL1蛋白,为进一步研究LiFUL1基因的功能奠定了基础。