不同锌源及添加水平对肉仔鸡生长性能的影响及其生物学利用率评价

本试验旨在研究碱式氯化锌(BZC)和蛋白锌(PRZ)相对于一水合硫酸锌(ZSM)的生物学利用率以及对肉仔鸡生长性能的影响。采用双因素(3×3+1)完全随机试验设计,选取720只1日龄健康雄性爱拔益加(AA)肉仔鸡,随机分为10个组,每组6个重复,每个重复12只鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,3个ZSM组分别饲喂在基础饲粮基础上添加20、40和80 mg/kg ZSM的饲粮,3个BZC组分别饲喂在基础饲粮基础上添加20、40和80 mg/kg BZC的饲粮,3个PRZ组分别饲喂在基础饲粮基础上添加20、40和80 mg/kg PRZ的饲粮。各组不同锌源添加量均以锌计。试验期42 d,分为1～14日龄、15～28日龄和29～42日龄3个阶段。分别在14和28日龄时,从各重复中选取1只接近平均体重的鸡进行屠宰,测定血浆锌含量和抗氧化指标、组织锌含量以及胰脏锌相关蛋白基因表达水平。结果表明：1)1～14日龄,与对照组相比,饲粮添加不同锌源和添加不同水平锌显著提高肉仔鸡平均日增重(ADG)和14日龄体重(P<0.05),显著降低料重比(F/G)(P<0.05),且以添加40 mg...     

SMD残留检测的ELISA方法的建立和初步应用

用戊二醛法将SMD与载体蛋白BSA偶联 ,制备合成抗原SMD BSA作免疫原 ,同法合成包被抗原SMD OVA ,免疫健康家兔获得抗血清。分别用双向琼脂扩散试验和ELISA试验对抗血清进行定性定量测定 ,结果表明所获抗血清特异性针对SMD。用所制备的抗血清建立间接竞争ELISA方法。优化了ELISA的工作条件 ,方阵测定确定了包被抗原最佳浓度 (50 μg/mL) ,抗血清最佳稀释度 (1∶1 0 0 ) ,酶标抗体的最适工作稀释度 (1∶50 0 ) ,并建立了ELISA标准工作曲线。工作曲线表明在 1 0～ 2 0 0 0 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系。该法检测底限为 63μg/L,低于国际规定残留限量 (1 0 0 μg/kg)和国内规定残留限量 (30 0 μg/kg)的要求。本法同时测定了回收率以及实际样品血清中的SMD的残留含量     

北极狐白介素-18基因的克隆与序列分析

根据GenBank中登录的犬白介素-18（IL-18）基因序列,设计了1对特异性引物。将北极狐外周血淋巴细胞经植物血凝素（PHA）诱导,用TRIzol裂解,提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）扩增狐狸IL-18基因,连接pMD18-T载体,转化DH5d感受态细胞,获得阳性重组质粒。核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长590bp,含582bp的开放阅读框,编码193个氨基酸,与已知犬IL-18序列的同源性高达98．7％,氨基酸同源性为96．4％。     

高效液相色谱法测定巴氏杀菌乳中糠氨酸含量的不确定度评定

目的 对高效液相色谱法测定巴氏杀菌乳中糠氨酸含量的不确定度进行评定。方法 依据《NY/T939—2016 巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定》测定巴氏杀菌乳中糠氨酸的含量。通过建立数学模型,全面分析试验过程中各不确定度的来源,并对其进行量化评定,计算合成相对标准不确定度和扩展不确定度。结果 当牛奶中糠氨酸含量为7.3 mg/100 g 蛋白质时,测量结果的扩展不确定度为0.4 mg/100 g蛋白质（k=2）。结论 方法中测量不确定度的主要来源为糠氨酸标准物质称量、标准工作液的配制、标准曲线的拟合和样品水解液中蛋白质含量测定终点判定。     

外源无机盐与硫胺素对枝叶去除后紫花苜蓿的再生性影响

放牧活动是包含牧食折损、枝叶去除、唾液沉积等多个过程的融合,而觅食者分泌的唾液对牧草具有潜在影响。本试验选择外源无机盐与硫胺素处理作为试验组,以去离子水与羊唾液处理为参考对照,并将4种溶液涂抹作用于不同枝叶去除水平的紫花苜蓿截面处,探究植食性动物(羊)唾液中的无机盐与硫胺素是否对紫花苜蓿的再生性产生影响,分析枝叶去除与羊唾液是如何诱导植物的补偿再生,同时探寻紫花苜蓿从形态与生理上对无机盐和硫胺素的差异响应。试验结果表明,1)与单一的枝叶去除处理相比,在羊唾液的催化作用下,枝叶去除后的紫花苜蓿再生能力明显提高,其中硫胺素是羊唾液中的有效成分;2)相对于外源无机盐,硫胺素对枝叶去除紫花苜蓿牧草有更为显著的正效应,紫花苜蓿地上累积生物量显著增加,茎叶比差异也达到了4.3~7.9倍;在80%枝叶去除水平下,总分蘖数大约是无机盐组的1.56倍;3)不同处理下紫花苜蓿的生理指标差异性不均一。在各项处理中,紫花苜蓿的叶绿素含量值都接近49.3 mg/g;在20%枝叶去除水平下,清水与羊唾液处理均促进根系可溶性糖含量大幅度增加;对于无机盐组,POD活性随着枝叶去除水平呈递增变化,而硫胺素处理没有引起POD活性的改变。通过本研究,期望进一步了解紫花苜蓿响应放牧的内在机制,为改善人工草地现状和提高牧草的农业效益提供参考,同时也为放牧生态学的发展提供理论支持。     

Comparative expression profile of microRNAs and piRNAs in three ruminant species testes using next‐generation sequencing

microRNA (miRNA) and piwi‐interacting RNA (piRNA) are two classes small non‐coding regulatory RNAs that play crucial roles in multiple biological processes such as spermatogenesis. However, there are no published studies on conjoint analysis of miRNA and piRNA profiles among cattle, yak and their interspecies (the dzo) using sequencing technology. Next‐generation sequencing technology was used to profile miRNAs and piRNAs among those three ruminants to elucidate their functions. A total of 119, 14 and six differentially expressed miRNAs were obtained in cattle vs. dzo, cattle vs. yak and yak vs. dzo comparison groups, while there were 873, 1,065 and 1,158 differentially expressed piRNAs in those three comparison groups. The expression of three miRNAs was validated in the three ruminants, and the results suggested that the miRNA expression profiles data could represent actual miRNA expression levels. Moreover, the putative targets of differentially expressed miRNAs were predicted by their own genome, it is worth to note that both the cattle and yak genome were used for dzo, then the targets were subjected to GO enrichment and KEGG pathway analysis, revealing the likely roles for these differentially expressed miRNAs in spermatogenesis. In conclusion, this study provided a useful resource for further elucidation of the miRNAs and piRNAs regulatory roles in spermatogenesis. It may also facilitate the development of therapeutic strategies for dzo reproduction research.     

中国荷斯坦牛运动评分的遗传参数估计

本研究利用2007年间武汉惠尔康扬子江乳业有限公司武湖牧场887头母牛运动评分的鉴定记录,配合单性状动物模型,利用MTDFREML软件,采用REML方法估计了相关的参数。结果表明,运动评分受泌乳期和饲养方式的影响,运动评分随泌乳期的增加有增加的趋势,栓系式饲养奶牛相对于散栏式饲养奶牛有更高的运动评分。运动评分的遗传力为0.09,为低遗传力性状。     

DNA甲基化酶抑制剂对体细胞染色体的影响

在动物的体细胞克隆过程中,供体细胞的细胞核要由高度甲基化状态转变为胚胎细胞的非甲基化状态,从而实现全能性的重新获得。试验利用DNA甲基化酶（5-aza-dc）抑制剂处理供体细胞,尝试建立一种既不影响染色体结构和数目,又能降低供体细胞细胞核的甲基化状态的最适浓度和方法,从而提供一种提高体细胞克隆动物效率的方法。在试验中,用不同浓度的甲基化酶抑制剂（5-aza-dc）处理奶牛成纤维细胞72 h,通过常规染色体核型分析方法制备染色体分裂相,检测其染色体数目、结构等的改变,结果显示,低浓度的甲基化酶抑制剂（0.005和0.01 μmol/L）处理,染色体没有发生明显的畸变（P＞0.05）,染色体能够保持正常的形态,高浓度（0.03与0.05 μmol/L）处理导致染色体畸变率显著增加（P＜0.05）,而0.1 μmol/L的5-aza-dc处理后染色体畸形率增加更为明显（P＜0.01）。总之,此试验的结果说明在对供体细胞做甲基化处理时用0.005和0.01 μmol/L的5-aza-dc处理不会影响细胞染色体结构和数目,但是高浓度处理则会导致染色体畸变率显著增加,不能用于体细胞克隆动物生产。     

徽县绵羊寄生虫病调查

对徽县不同区域40只绵羊寄生虫剖检和体表检查发现,徽县绵羊寄生虫有14种,体内12种,体外2种。隶属于线虫、吸虫、绦虫和蜘蛛昆虫4纲12科14属。双腔吸虫和捻转血茅线虫乏弱,有拉稀症状羊只全部感染,平均感染强度依次分别为1765.5和586.4,体外寄生虫硬蜱全部感染。营养健康状况良好羊只毛圆线虫平均感染强度为2005个,双腔吸虫平均感染强度为1327。绵羊感染寄生虫种类为7～12种,以感染9种的居多。     

奶牛边缘无浆体MSP2的原核表达及抗原性鉴定

为克隆和原核表达牛边缘无浆体(A.marginale)膜表面蛋白2(MSP2),并分析其免疫原性,本研究通过PCR方法扩增A.marginale的MSP2基因,将其连接到pGEX 6p-1载体中,转化感受态细胞BL21(DE3),经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析,将纯化的MSP2重组蛋白免疫小鼠。结果表明表达并纯化了A.marginaleMSP2,其免疫原性良好,为制备单克隆抗体及亚单位疫苗的研制奠定了基础。