数字PCR技术在动物疫病检测中的应用

为了支持动物疫病流行地区的控制及消除计划,以及在动物疫病非流行地区进行有效筛查,必须使用更加准确灵敏的诊断手段。数字PCR可实现绝对定量及痕量核酸的检测,与传统检测方法相比具有不依赖参考物或标准品、对抑制剂具有较高耐受性、灵敏度和精准度更高的优点。数字PCR作为一种定量分析的核酸检测新方法,在动物疫病检测中得到了应用,围绕数字PCR技术的原理、应用、存在的问题及发展趋势等进行综述及分析,为数字PCR在动物疫病检测中的进一步应用提供参考。     

海藻酸钠茶多酚复配涂膜对滇橄榄贮藏品质的影响

采用不同浓度的茶多酚和海藻酸钠对滇橄榄进行涂膜保鲜单因素试验,根据测定结果,选择浓度为0.10%、0.20%的海藻酸钠与浓度为0.75%、1.00%、1.50%的茶多酚进行复配涂膜,研究其对滇橄榄贮藏品质的影响。结果表明:经涂膜处理后的滇橄榄贮藏品质优于CK组,在6组不同浓度配比下,以0.10%海藻酸钠与1.50%茶多酚复配保鲜液的保鲜效果较好,可保持滇橄榄较好的感官品质,延缓果实失重率、可溶性固形物含量的升高和VC含量的下降,保持较高的好果率,抑制呼吸强度,能将滇橄榄保鲜期延长至15 d。     

反相高效液相色谱法测定克林霉素含量

本实验建立了一种快速检测克林霉素HPLC，用反相C18柱分离克林霉，用乙酰胺做内标，在UV205mm条件下，用乙腈－磷酸盐缓冲液－四氢呋喃（V：V：V＝29：70：1）作流动相测定克林霉素含量。结果表明：标准曲线范围在0.05-40mg/mL回归方程为Y＝0.6547X-0.0034(R^3=0.9992）。     

不同水平复合益生菌制剂添加对奶牛生产性能、乳品质及体细胞数量的影响

为分析不同水平复合益生菌制剂添加对奶牛生产性能、乳品质及体细胞数量的影响,试验选择胎次、产奶量、泌乳天数相近的荷斯坦奶牛160头随机分成4个组,每个组4个重复,每个重复10头,1组饲喂基础日粮为对照组,试验2、3、4组每头奶牛分别在基础日粮中添加20、40、60 g/d复合益生菌制剂,预试验7 d,试验期为60 d。结果表明:(1)试验后的30、60 d,试验3、4组的平均产奶量较1相比分别提高16.0%、14.9%、25.6%、24.1%(P<0.05);(2)试验2、3、4组的4%乳脂校正、乳蛋白率、总固形物均高于1组(P>0.05);试验2、3、4组的尿素氮均低于1组(P>0.05);试验3、4组的乳糖率、乳脂率较1组分别提高14.6%、13.4%、5.0%、4.2%(P<0.05);(3)试验后的60 d,试验3、4组乳中体细胞数量较1组相比降低9.3%、7.1%(P<0.05)。综上,每头牛每天添加40 g复合益生菌制剂可以提高奶牛的生产性能、乳品质,减少体细胞数量。     

拉曼光谱结合支持向量机对猪胞质内单精子显微注射胚胎性别的鉴定分析

【目的】 探求一种无损的、非侵入性的、快速的胚胎性别鉴定方法。【方法】 以207个猪卵胞质内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)胚胎及其培养液为研究对象,单个胚胎经巢式PCR扩增鉴定其性别后随机分成训练集和测试集,同时利用拉曼光谱技术获取单个ICSI胚胎培养液的拉曼光谱。原始光谱经过处理后,采用支持向量机(support vector machine,SVM)算法构建分类模型,先用训练样本进行训练和建模,然后预测测试样本的性别,结合PCR性别鉴定的结果,计算分类准确率。【结果】 通过巢式PCR对207个胚胎进行性别鉴定,鉴定出71个雄性胚胎、128个雌性胚胎,8个样品扩增失败。猪ICSI雄性胚胎培养液在1 082和1 360 cm^-1拉曼位移处特征峰强度明显高于雌性胚胎,构建的胚胎性别鉴定模型的分类准确率为81.5%,雌性和雄性胚胎的分类准确率分别为81.3%和81.8%。【结论】 本研究将拉曼光谱技术与SVM法相结合构建了胚胎性别鉴定模型,分类准确率达到81.5%,提供了一种新的、无损的胚胎性别鉴定方法。     

环青海湖地区两种引种禾本科牧草根际真菌群落对有机肥的响应

本研究以环青海湖地区引进的两种禾本科牧草‘川草2号’老芒麦(Elymus sibiricus‘Chuancao No.2’)和‘阿坝’垂穗披碱草(Elymus nutans‘Aba’)为研究对象,通过田间试验,采用ITS rDNA Illumina高通量测序技术和分子生态网络的方法,分析施用有机肥后两种牧草生长及根际真菌群落结构变化。结果显示,与对照相比,有机肥显著增加两种牧草的地上及地下生物量,降低牧草茎叶比(P<0.05);有机肥处理改变了土壤理化性质,提高全氮(TN)和有机碳(SOC)含量(P<0.05),降低土壤pH。土壤真菌群落结构表明：有机肥降低老芒麦根际主要优势菌和次要优势菌的相对丰度;提高披碱草根际赤霉菌(Gibberella)、内生真菌属(Preussia)相对丰度。RDA结构显示pH和SOC是驱动微生物变化的主要环境因子(P<0.01),有机肥添加重新构建了土壤真菌群落间的网络关系。高寒地区短期施加有机肥明显促进牧草生长,提高土壤肥力,改变微生物群落结构。     

Effects of fermented garlic powder supplementation on growth performance,nutrient digestibility,blood characteristics and meat quality in growing‐finishing pigs

One hundred pigs (BW = 50.7 ± 1.89 kg) were used to investigate the effects of fermented garlic powder (FGP) in growing‐finishing pigs. Pigs were allotted to one of five treatments, included: (i) NC (basal diet); (ii) PC (NC + 44 mg/kg of Tylosin); (iii) FGP1 (NC + 1 g/kg FGP); (iv) FGP2 (NC + 2 g/kg FGP); and (v) FGP4 (NC + 4 g/kg FGP). Supplemental FGP increased average daily gain (ADG) and gain/feed ratio compared with those fed NC diet throughout the experiment (P < 0.05, linearly). Dietary PC treatment increased the ADG and average daily feed intake during the first 6 weeks (P < 0.05). The inclusion of FGP2 and FGP4 treatments had higher apparent total tract digestibility of dry matter and nitrogen (P < 0.05) than those in the NC treatment. Dietary NC treatment exhibited lower (P < 0.05) lymphocyte count (6 and 12 weeks) and immunoglobulin G (12 weeks) than those in the other treatments. Marbling scores were higher (P < 0.05) in FGP treatment groups than the NC treatments. Pigs fed on FGP2 and FGP4 diets evidenced lower 2‐thiobarbituric acid reactive substances value (P < 0.05) than those in the NC and PC treatments. Collectively, our findings demonstrated that the administration of FGP at a level of 2 or 4 g/kg improved growth performance, nutrient digestibility and meat quality in growing‐finishing pigs.     

新城疫病毒作为疫苗载体的研究进展

在综述新城疫病毒(NDV) 的分子生物学特征、致病本质、复制机理以及利用反向遗传操作技术获得NDV的感染性克隆的基础上,着重介绍了以NDV作载体,将报告基因、功能基因包括鸡传染性法氏囊病毒VP2基因及流感病毒HA基因等插入NDV基因组的不同位置构建重组新城疫病毒,并对外源基因进行成功表达的研究进展。同时对DNV作为新的疫苗载体表达外源基因的可行性及未来应用前景进行了初探。     

A型猪塞内卡病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立

本研究针对A型猪塞内卡病毒(Senecavirus A, SVA)基因组保守区域设计了特异性引物及探针,建立了快速检测SVA的Taq Man荧光定量PCR方法。结果显示,以构建的重组质粒为标准品建立的Taq Man荧光定量PCR方法,标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9974;特异性良好,与口蹄疫病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒不存在交叉反应;对SVA核酸最低检测下限为3.75 copies/μL,而普通PCR最低检测下限为3.75×103 copies/μL;批内和批间的变异系数为均小于5%,重复性良好。本研究建立的SVA TaqMan荧光定量PCR方法为检测猪水疱性疾病病原提供了一种快速、灵敏的检测方法,为开展SVA流行病学调查提供了技术支持。     

菠菜新品种蔬菠2号的选育

蔬菠2号是以雌性系221为母本、自交系213为父本配置的菠菜一代杂交种。该品种植株直立,生长势强,叶片大、深绿色、尖圆形,叶面平展;植株生长速度较快,适于早春露地、秋露地及设施栽培。