基因编辑技术及其在家畜生产中的应用

基因编辑技术是一类对目的基因进行靶向改变的现代生物技术,因其具有修饰效率高、特异性强、无物种限制等特点,得到了广泛的关注和应用.文章综述了4种基因编辑技术及其在家畜育种、生产性状改良、生物模型构建、优质饲草培育与供应等方面的研究与应用情况,并对该技术的应用前景进行了展望.     

不同放牧制度对荒漠草原表层土壤氮素空间异质性的影响

以荒漠草原不同放牧制度下表层土壤氮素含量为研究对象,采用GS+软件和地统计学分析方法对其空间异质性分布进行了研究.结果显示,划区轮牧区表层士壤碱解氮含量显著低于对照区和自由放牧区,土壤全氮含量没有发生显著性变化.样点间土壤氮素含量差异表明,表层土壤氮素含量存在空间异质性.划区轮牧使得土壤碱解氮含量和土壤全氮含量空间分布受随机因素影响大,自由放牧使土壤全氮含量空间分布受随机因素影响大,围封状态的对照区土壤碱解氮含量和土壤全氮含量空间分布几乎不受随机因素影响.划区轮牧能够减小土壤氮素空间分布的异质性,自由放牧导致表层土壤碱解氮含量空间差异较大.在划区轮牧区,土壤碱解氮含量和土壤全氮含量空间分布都比较均匀,呈片状分布,自由轮牧区土壤碱解氮整体呈破碎斑块分布.     

Regulatory effect of Panax notoginseng saponins on the oxidative stress and histone acetylation induced by porcine circovirus type 2

Porcine circovirus type 2 (PCV2) exists widely in swine populations worldwide, and healthy PCV2 virus carriers have enhanced the severity of the infection, which is becoming more difficult to control. This study investigated the regulatory effect of Panax notoginseng saponins (PNS) on the oxidative stress and histone acetylation modification induced by PCV2 in vitro and in mice. In vitro, PNS significantly increased the scavenging capacities of superoxide anion radicals (O₂^•-) and hydroxyl radicals (^•OH) and reduced the content of hydrogen peroxide (H₂O₂) induced by PCV2 in porcine alveolar macrophages (3D4/2). In addition, PNS decreased the protein expression level of histone H4 acetylation (Ac-H4) by increasing the activity of histone deacetylase (HDAC) in PCV2-infected 3D4/2 cells. In vivo, PNS enhanced the scavenging capacities of ^•OH and O₂^•− and reduced the content of H₂O₂ in the spleens of PCV2-infected mice. PNS also reduced the protein expression level of histone H3 acetylation (Ac-H3) by reducing the activity of histone acetylase (HAT) and increasing the activity of HDAC in the spleens of PCV2-infected mice. PCV2 infection activated oxidative stress and histone acetylation in vitro and in mice, but PNS ameliorated this oxidative stress. The research can provide experimental basis for exploring the antioxidant effect and the regulation of histone acetylation of PNS on PCV2-infected 3D4/2 cells and mice in vitro and in vivo, and provide new ideas for the treatment of PCV2 infection.     

抗猪输血传播病毒1型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

为制备抗猪输血传播病毒1型(TTV1) Cap蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究采用PCR法扩增TTV1ORF1 (1501nt～2475nt)编码重组Cap蛋白的C末端截短序列,将PCR产物克隆于pGEX-6P-1载体中,并在大肠杆菌Rosetta (DE3)菌株中诱导表达,获得含GST标签的重组蛋白(rCap),经SDS-PAGE和western blot鉴定表明rCap约为64.0.ku,以包涵体形式存在.用纯化的rCap免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗rCap蛋白的杂交瘤细胞株,MAb亚类均为IgGl/κ型;western blot鉴定表明有7株MAbs与rCap产生特异性反应,另1株MAb呈阴性.为验证8株MAbs与真核表达的Cap蛋白的免疫反应性,将全长与截短的TTV1ORF1基因片段克隆于pcDNA3.1载体,转染293T细胞进行蛋白瞬时表达,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法检测表明,这8株MAbs均能够与瞬时表达的全长rCap产生特异性反应,其中6株与截短表达的rCap反应.本研究表达的rCap蛋白及制备的MAbs,为该病毒检测方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础.     

鸭传染性浆膜炎疫苗的研究

用从浙江省分离鉴定的鸭疫里氏杆菌RA-J、RA-L菌株研制疫苗,采用改进的液体培养和鸭胚培养工艺,抗原含量分别达120-186亿CFU／ml和280-310CFU／ml,免疫0.5ml/只,2MLD强毒攻击,平均保护率达94.2％（48／52）,免疫后第7天保护率达80％（16／20）,10天达93.8％（15／16）,疫苗在4℃-8℃条件下保存7个半月和1年的保护率达90％和85％。野外扩大试验和临床推广试用236万羽份表明,效果良好。     

水通道蛋白研究进展

水通道蛋白是专门运输水的跨膜蛋白,其基因结构、基因表达调控、染色体定位、蛋白质结构、组织分布和生理功能得到了较为深入的研究。作者从水通道蛋白的发现,水通道蛋白的分子结构、分类、分布和生理功能及水通道蛋白的研究展望作一综述。     

基于猪丁型冠状病毒重组M蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)是近年新发现的一种猪肠道病原体,主要感染仔猪并引起仔猪腹泻甚至死亡,针对该病建立快速、准确的血清学检测方法尤为重要.本研究以PDCoVHNZK-04毒株为模板扩增M基因并将其克隆至原核表达载体pET-32a中,构建了重组质粒pET-32a-P...     

猪传染性胃肠炎病毒YK株N基因的原核表达与N蛋白的生物学活性检测

将猪传染性胃肠炎病毒的N基因克隆到表达载体pET28a后,转化到BL21(DE3)大肠杆菌表达系统中.通过筛选表达温度和IPTG的浓度,使N基因在原核表达系统中表达并使目的表达产物产量达到最高值.将诱导表达的产物进行SDS-PAGE蛋白电泳和Western检验,证明该表达产物是猪传染性胃肠炎病毒的N蛋白.试验结果说明,猪传染性胃肠炎病毒N基因能够在原核表达系统中大量表达,而且表达的蛋白质具有生物学活性.     

行比对不同豆禾间作模式产量与品质的影响

豆禾间作是有效提高土地利用率的方式,有利于缓解江淮地区草地面积不足的情况。本研究在2017-2018年,通过对五个播种比例下的金花菜（Medicago polymorpha L.）+燕麦（Avena sativa L.）间作与箭筈豌豆（Vicia sativa L.）+燕麦间作进行比较;通过其产量及营养价值等数据评价其优劣。结果表明,箭筈豌豆与燕麦比例3.3：8的间作具有最高总干草产量,为1 595.72 g·m^-2。金花菜与燕麦比例6.6：4的间作具有最高的土地当量比和土地利用率,分别为1.36和132.58%,且总干草产量第二。竞争力指数表明金花菜的种群竞争力要高于箭筈豌豆。在营养价值方面,金花菜+燕麦间作更具优势;燕麦与金花菜间作后的粗蛋白含量达到13.88%~14.09%,高于箭筈豌豆间作中的13.19%~13.44%。综合来看,两种间作模式各有优劣,以燕麦产量为导向时,箭筈豌豆+燕麦比例为6.6：4和3.3：8的间作模式更优;而若是只考虑最高的土地利用率,则金花菜+燕麦比例为6.6：4的间作模式更优。     

匍匐翦股颖HSP26.7基因启动子的表达分析

为研究匍匐翦股颖HSP26.7基因启动子在植物抗逆方面的功能,克隆了匍匐翦股颖的一个小热激蛋白HSP26.7基因的启动子并进行了序列分析;构建了同时具有该启动子序列和GUS报告基因的植物表达载体,并通过农杆菌侵染法转化拟南芥植株.结果显示:该启动子存在HSE,ABRE等响应高温和其他胁迫的调控元件,受高温胁迫强烈诱导,...