全文获取类型
收费全文 | 26938篇 |
免费 | 1616篇 |
国内免费 | 2650篇 |
专业分类
林业 | 2371篇 |
农学 | 2105篇 |
基础科学 | 1258篇 |
2812篇 | |
综合类 | 12403篇 |
农作物 | 2058篇 |
水产渔业 | 1316篇 |
畜牧兽医 | 3837篇 |
园艺 | 1852篇 |
植物保护 | 1192篇 |
出版年
2024年 | 195篇 |
2023年 | 466篇 |
2022年 | 1085篇 |
2021年 | 1176篇 |
2020年 | 1200篇 |
2019年 | 1118篇 |
2018年 | 845篇 |
2017年 | 1201篇 |
2016年 | 885篇 |
2015年 | 1235篇 |
2014年 | 1367篇 |
2013年 | 1611篇 |
2012年 | 2183篇 |
2011年 | 2273篇 |
2010年 | 2098篇 |
2009年 | 1852篇 |
2008年 | 1853篇 |
2007年 | 1657篇 |
2006年 | 1380篇 |
2005年 | 1143篇 |
2004年 | 714篇 |
2003年 | 621篇 |
2002年 | 748篇 |
2001年 | 719篇 |
2000年 | 514篇 |
1999年 | 236篇 |
1998年 | 136篇 |
1997年 | 95篇 |
1996年 | 96篇 |
1995年 | 72篇 |
1994年 | 71篇 |
1993年 | 63篇 |
1992年 | 51篇 |
1991年 | 59篇 |
1990年 | 45篇 |
1989年 | 31篇 |
1988年 | 27篇 |
1987年 | 18篇 |
1986年 | 5篇 |
1985年 | 4篇 |
1984年 | 4篇 |
1983年 | 3篇 |
1981年 | 7篇 |
1980年 | 4篇 |
1978年 | 3篇 |
1977年 | 2篇 |
1965年 | 2篇 |
1962年 | 5篇 |
1956年 | 12篇 |
1955年 | 4篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
31.
AIM: To prepare gfp-bcl-XL-contained recombinant adenovirus(rAd-gfp-bcl-XL).METHODS: Bcl-XL gene was amplified from pEGFP-C3-bcl-XL, subcloned into shuttle plasmid and formed transfer plasmid of pAdTrack-CMV-bcl-XL. Then pAdTrack-CMV-bcl-XL was linealinzed with PmeI and co-transformed into BJ5183 bacteria with adenovirus genomic plasmid of pAdEasy-1. The identified recombinant adenovirus plasmid was digested with PacI and transfected into 293 cells to package recombinant adenovirus particles. The target gene was detected by PCR.RESULTS: There were about 35% positive recombinant bacterial clones after the co-transformation of pAdTrack-CMV-bcl-XL and pAdEasy-1 into BJ5183. Recombinant adenovirus particle were produced and further amplified after the transfection of pAdEasy-1-gfp-bcl-XL into 293 cells. PCR test indicated that the recombinant Ad contained bcl-XL gene. The titer of the purified rAd-gfp-bcl-XL was 6.5×1012 PFU/L. CONCLUSIONS: The homologous recombination in bacteria is a convenient and high efficient method to prepare rAd-gfp-bcl-XL. This affords a good gene transfer vector for the gene therapy in human’s diseases. 相似文献
32.
刺梨及其近缘种PCR实验体系的建立与优化 总被引:13,自引:2,他引:13
以刺梨及其近缘种月季为试材,进行了RAPD-PCR实验参数的确立和优化试验。结果表明,刺梨及月季25μL反应体系的最优组成为2.5μL10×反应缓冲液,2mmol/LMg2+,0.2mmol/LdNTP,1.6mg/L模板DNA,0.4μmol/L随机引物和1.2UTaqDNA多聚酶。经PCR扩增验证,此反应体系亦适宜于刺梨的部分近缘种,可有效用于RAPD分析;通过将退火温度提高至50℃或采用“Touchdown”扩增程序,并在50μL反应体系中适当增加特异引物对浓度(1.0μmol/L),模板DNA(4.0mg/L)和TaqDNA多聚酶(3.0U/管)的使用量,建立起适合于刺梨特异DNA片段检测及回收的特异PCR扩增实验体系,为刺梨的分子克隆奠定了技术基础。 相似文献
33.
34.
35.
36.
BsC3-41杀蚊幼制剂对蚊幼虫毒杀效果研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过以BsC3- 41杀蚊幼制剂对 3种蚊幼虫进行生物活性测定和野外灭蚊试验 ,结果表明 :该制剂对致乏库蚊CulexfatigansWiedemann的毒杀效果最好、对中华按蚊AnophelessinensisWiedemann次之、对白纹伊蚊AedesalbopictusSkuse的效果较差 ,2 4小时LC50值分别为 0 2 0 2 5 μg/ml、 2 5 363μg/ml和 5 9 730 2 μg/ml。野外水体灭蚊使用 3ml/m2 的浓度防治淡色库蚊效果可达 98 88%~ 1 0 0 0 0 % ,使用 1 0ml/m2 的浓度防治中华按蚊效果可达96 81 %~ 1 0 0 0 0 % ,使用 2 0 0ml/m2 的浓度防治白纹伊蚊效果达到 90 64%以上。 相似文献
37.
透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠杆菌中的高效表达 总被引:3,自引:0,他引:3
利用PCR技术将透明颠菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白在30℃诱导获得可溶表达。利用Ni^2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到重组的透明颠菌血红蛋白,蛋白呈红色。实验现象显示重组蛋白与血红索相结合。紫外光区和可见光区波长扫描分析显示:蛋白粗提物和纯化后的血红蛋白在230nm和413nm都有强吸收峰,初步表明,尽管重组蛋白比天然蛋白多36个氨基酸,重组蛋白仍然具有生理活性。诱导后4h和6h的培养液氨基乙酰丙酸含量分别达到17mg/L和21mg/L。说明重组蛋白的表达明显促进了体内heme合成途径。 相似文献
38.
Branched‐chain amino acid ratios in low‐protein diets regulate the free amino acid profile and the expression of hepatic fatty acid metabolism‐related genes in growing pigs
下载免费PDF全文
![点击此处可从《Journal of animal physiology and animal nutrition》网站下载免费的PDF全文](/ch/ext_images/free.gif)
Y. H. Duan F. N. Li C. Y. Wen W. L. Wang Q. P. Guo Y. H. Li Y. L. Yin 《Journal of animal physiology and animal nutrition》2018,102(1):e43-e51
Liver metabolism is affected by nutrients. The aim of this study was to explore the effects of low‐protein diets (17% crude protein, CP) supplemented with branched‐chain amino acids (BCAAs), including leucine (Leu), isoleucine (Ile) and valine (Val), on hepatic amino acid profile and lipid metabolism in growing pigs. The ratio of Leu : Ile : Val in all groups was 1 : 0.51 : 0.63 (20% crude protein, CP), 1 : 1 : 1 (17% CP), 1 : 0.75 : 0.75 (17% CP), 1 : 0.51 : 0.63 (17% CP) and 1 : 0.25 : 0.25 (17% CP) respectively. Results revealed that compared to the positive control group (1 : 0.51 : 0.63, 20% CP), the low‐protein diets significantly augmented the concentrations of most essential amino acids and non‐essential amino acids (p < .05), with the greatest values observed in the 1 : 0.25 : 0.25 group. Moreover, relative to the control, the low‐protein diets with the Leu : Ile : Val ratio ranging from 1 : 0.75 : 0.75 to 1 : 0.25 : 0.25 markedly downregulated the mRNA abundance of acetyl‐CoA carboxylase (ACC), lipoprotein lipase (LPL) and fatty acid‐binding protein 4 (FABP‐4) (p < .05), and upregulated the mRNA expression of hormone‐sensitive lipase (HSL), peroxisome proliferator‐activated receptor‐g coactivator‐1α (PGC‐1α), uncoupling protein 3 (UCP3) and liver carnitine palmitoyltransferase 1 (L‐CPT‐1) (p < .05). Therefore, our data suggest that protein‐restricted diets supplemented with optimal BCAA ratio, that is, 1 : 0.75 : 0.75–1 : 0.25 : 0.25, induce a shift from fatty acid synthesis to fatty acid oxidation in the liver of growing pigs. These effects may be associated with increased mitochondrial biogenesis. 相似文献
39.
40.