禽腺病毒流行株FAdV-4-AH-F41的分子特征及对细胞因子的诱导作用

【目的】分析1株血清4型禽腺病毒（FAdV-4）流行株的分子特征及其感染对细胞因子的影响。【方法】采集安徽省某禽类养殖场疑似心包积水 肝炎综合症的鸡肝脏组织样本,用鸡肝癌细胞（LMH）对病原进行分离,采用PCR、透射电镜（TEM）观察和间接免疫荧光试验（IFA）对分离的毒株进行鉴定。采用分段扩增后拼接的方法克隆分离毒株的全基因组,对其进行遗传进化分析和序列重组分析。基于柯赫法则,用分离毒株接种无特定病原体（SPF）鸡,检验其致病性。采用实时荧光定量PCR法,检测分离毒株对LMH细胞天然免疫相关细胞因子环鸟苷酸-腺苷酸（cGAS）、干扰素刺激因子（STING）、白介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-8、干扰素-α（IFN-α）、IFN-β、干扰素调节因子7（IRF7）、线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）、主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ-α、MHCⅡ-β等11种细胞因子的诱导作用。【结果】分离鉴定到1株FAdV,其在LMH细胞中培养未出现明显细胞病变效应;病毒粒子直径为70~90 nm,符合FAdV-4的结构特征;免疫荧光试验结果显示,在接种分离毒株的LMH细胞内可观察到亮红色荧光,而对照细胞没有荧光;将该毒株命名为FAdV-4-AH-F41。采用分段扩增后拼接的策略获得了FAdV-4-AH-F41全基因组序列（43 708 bp）;遗传进化分析和序列重组分析发现,FAdV-4-AH-F41与FAdV-4株核苷酸相似性为99.6%;存在3个重组事件,第1个重组事件发生在30 453-30 674 bp,第2个发生在36 884-36 988 bp,第3个发生在43 401-43 715 bp。致病性试验显示,FAdV-4-AH-F41是导致鸡心包积水-肝炎综合症的病原。实时荧光定量PCR检测结果显示,与对照（DMEM/F12处理）相比,用FAdV-4-AH-F41处理后LMH细胞中11种免疫因子的表达量水平均有提升,其中cGAS、IL-6、IRF7、MHCⅡ β差异达极显著水平（P<0.01）,IL-1β、IFN-α、MAVS差异达显著水平（P<0.05）,STING、IL-8、IFN-β、MHCⅠ-α差异不显著。【结论】成功分离1株重组血清4型禽腺病毒,感染LMH细胞会诱导强烈的天然免疫反应。     

Molecular cloning and functional analysis of duck Toll-like receptor 5

Toll-like receptor 5 (TLR5) is responsible for the recognition of bacterial flagellin in vertebrates. In this study, we cloned the single-exon TLR5 gene of the Maya breed of Common Shelduck (Tadorna tadorna). The TLR5 open reading frame is 2580 bp in length and encodes an 859-amino acid protein. The putative amino acid sequence of duck TLR5 consisted of a signal peptide sequence, 11 leucine-rich repeat domains, a leucine-rich repeat C-terminal domain, a transmembrane domain, and an intracellular Toll-interleukin-1 receptor domain. The duck TLR5 gene was highly expressed in the lung, bone marrow, spleen, and liver; moderately expressed in kidney, small intestine, large intestine, and brain. A plasmid expressing duck TLR5 was constructed and transfected into HEK293T cells, and expression was confirmed by indirect immunofluorescence assay. HEK293T cells transfected with duck TLR5- and NF-κB-luciferase-containing plasmids significantly responded to flagellin from Salmonella typhimurium, indicating that it is a functional TLR5 homolog.     

Immune responses in piglets infected with highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus

Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) infection compromises the host's innate and adaptive immunity. The aim of this study was to investigate the immune responses of piglets infected with highly pathogenic (HP) PRRSV (HuN4 strain) with or without the immunization with CH-1R attenuated PRRSV vaccine. The response was evaluated for the clinical signs, pathological changes and virus load in immune organs, antibody responses and levels of serum IFN-γ, IL-4 and IL-10. The result showed that in comparison with the piglets received the immunization, the piglets infected with HP-PRRSV alone had the thymus atrophy, decreased serum levels of IL-4 and increased serum levels of IL-10 and INF-γ. These results suggest that elevated IL-10 levels at the early stage of the infection may enhance virus survival and delay the induction of protective immunity, while increased levels of IL-4 induce the effective immune responses and increase the animals' health status.     

鲁中南山地刺槐萌生更新林经济效果评价

采用企业动态经济评价方法对刺槐萌生林不同轮伐期的经济效果进行了评价；按ＮＰＶ最大、ＩＲＲ最大确定了林分经济成熟龄；通过敏感性分析确定了经济成熟龄区间。     

一种新型集蔗器的结构设计及其有限元分析

集蔗器是甘蔗收割机中用来收集甘蔗的装置。通过总结前人所设计的集蔗器的优缺点,提出了一种新型集蔗机构—挡板式斜集集蔗器,并进行了结构设计、参数计算和三维建模;最后,为了验证所设计的集蔗器转轴的尺寸的合理性,通过有限元分析了软件ANSYS分析它在受外力情况下的变形情况和整体的应力分布情况。     

国内外农业信息化建设对佳木斯地区的启示

分析借鉴国内外农业信息化建设的经验,对加快实现佳木斯地区农业的信息化具有重要意义.为此,当前世界上农业信息化建设工作比较发达的欧美国家信息化建设的工作经验;分析了开展此项工作相对较晚的亚洲国家农业信息化建设的情况以及我国近年来农业信息化工作的情况.由此得出国内外经验给佳木斯地区开展农业信息化建设工作的4点启示:一是发挥政府的宏观调控职能是开展好农业信息化建设的保障;二是健全基础设施是开展好农业信息化建设的前提;三是搞好信息数据库建设是开展好农业信息化建设的基础;四是做好科研、教育和推广的有机结合是开展好农业信息化建设的必然.     

大豆浓缩蛋白在仔猪饲料中的应用

大豆浓缩蛋白(soybean protein concentrates,SPC)是以大豆为原料,经过粉碎、去皮、浸提、分离、洗涤、干燥等加工工艺,去除大豆中的油脂、低分子可溶性非蛋白组分(主要是可溶性糖、灰分、醇溶蛋白和各种气味物质等)后所得到的大豆深加工产品。蛋白质含量高,食品级SPC一般不低于70%(干物质基础),故又称70%蛋白粉。由于消除了寡聚糖类胀气因子、胰蛋白酶抑制因子、凝集素和皂甙等抗营养因子,营养素消化率有一定程度的提高,而且改善了产品风味和品质。从NRC(1998)的数据来看,其氨基酸的表观消化率甚至普遍高于脱脂奶粉和血浆蛋白粉(见表1)…     

歙县枇杷产业化的发展与对策

主要介绍了枇杷的生物学特性和营养价值、药用价值,在分析了歙县枇杷生产现状的基础上,指出了歙县枇杷产业化发展存在的问题,并提出了发展枇杷产业需要通过采取适度规模化生产、合理品种组成、加强产后服务、实现产品深加工和综合利用等对策。