奶牛场荧光定量PCR检测实验室建设实践与思考——以原生态牧业奶牛场实验室建设为例

荧光定量PCR技术用于病原微生物基因表达、基因组变异和多态性检测等,具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,已广泛用于临床诊断和畜禽疫病诊断。本文以黑龙江原生态牧业奶牛场荧光定量PCR检测实验室建设为例,从设计规划、配套设备、人员配备、环境控制及存在问题解决五大方面进行论述,提出PCR实验室建设要根据奶牛场场地实际情况,规划适合PCR实验检测区域;根据PCR检测需求及奶牛场费用预算配置实验设备;根据奶牛场预计检测样品量配备检测人员及培养储备人员;在建立严格的操作规范基础上,严格执行实验分区管理及检测过程中消毒流程,避免实验过程中产生气溶胶污染环境。     

2年生桉树杂交种生长与抗风的遗传变异研究

 以２×１０的析因交配桉树杂交种为研究材料,杂种的母本为尾叶桉和细叶桉,父本为巨桉、粗皮桉、细叶桉和尾叶桉。对２７个月生杂交种的材积生长、抵抗风速为１８和４０ｍ／ｓ台风的抗风指数（ＷＲ１ 和ＷＲ２）的研究表明,材积生长在母本间差异不显著（犘＞０．０５）,但在父本间、母本与父本的交互作用间差异显著（犘＜０．０５）;ＷＲ１ 在父、母本间均存在显著差异（犘＜０．０５）,ＷＲ２ 只在父本间差异显著（犘＜０．０５）。在材积生长上,巨桉作为父本具有高的一般配合力,Ｔ１×Ｇ２、Ｕ１×Ｐ３具有高的特殊配合力;在抗风指数上,Ｇ１、Ｇ２和Ｐ２作为父本分别对ＷＲ１ 和ＷＲ２ 具有高的一般配合力。材积生长性状受加性基因和显性基因的控制,狭义和广义遗传力分别为０．１４～０．１７ 和０．３０～０．３６;抗风指数受加性基因控制,遗传力为０．１０～０．１１。以尾叶桉为母本的子代材积生长性状遗传力高于细叶桉母本的子代、抗风指数的遗传力高于细叶桉母本的子代;材积生长性状与ＷＲ１ 总体上呈显著正相关（犘＜０．０５）,与ＷＲ２ 呈显著负相关（犘＜０．０５）。     

草坪质量的模糊数学综合评价方法

由于国内外对草坪质量评价还没有统一标准,探索建立数量化、多指标的质量评价方法具有重要意义。选择了密度、质地、颜色、盖度、均一性、回弹性作为评价指标进行数量化测定,采用层次分析法(AHP)通过构建权重矩阵,对观赏草坪和运动草坪分别配以指标权重,然后结合模糊数学综合评判方法,给出草坪质量的评价等级。评定结果基本符合实际,表明该方法能为客观评价草坪质量进一步提供理论方法依据,具有一定科学性和实用性。     

中国南方草地现状与生产潜力

中国南方草地区为秦岭、淮河以南、青藏高原以东的广大地区 ,总面积约 2 70万 km2 ,分属淮河、长江、珠江 3大流域。南方草地多山 ,本文涉及的 12个南方省区中 ,山地与平原之比平均为 4 .85∶ 1,比全国平均比值高出 1倍。山地面积之大小与青藏高原距离的远近呈负相关。南方草地大体可以分为云贵高原区、华东区和华南区。笔者提出建立 3类系统耦合经济带 ,即西南岩溶山地系统耦合生态经济带、江淮平原丘陵系统耦合生态经济带和岭南沿海平原丘陵生态经济带。每一生态经济带内包含中心城市 ,农村生产基地和社会支持系统。据初步估算 ,这样的生态经济带蕴藏了巨大的经济潜力     

花椰菜尾菜发酵饲料对保育猪生长性能、血清生化指标、小肠组织形态及经济效益的影响

为研究花椰菜尾菜发酵饲料对保育猪生长性能、血清生化指标、小肠组织形态及经济效益的影响.选取42头体重相近(11.40±1.36)kg、体况良好的40日龄保育猪,随机分为两组,每组3个重复,每个重复7头.对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂由80％基础饲粮和20％花椰菜尾菜发酵饲料组成的试验饲粮.试验共30 d,其中预试期8 ...     

硫辛酸对海马CA1区锥体细胞凋亡的抑制作用

采用股动脉放血并双侧颈总动脉夹闭制作全脑缺血再灌注模型 ,于术后 1 d处死动物 ,取脑 ,制作石蜡切片 ,通过 HE染色、Tunel检测 ,以观察海马 CA1区锥体细胞的损伤形式 ,并探讨α-硫辛酸 (α-lipoic acid,L A)对实验性脑缺血再灌注的神经保护作用。结果表明 :在短暂性全脑缺血中 ,海马锥体细胞存在着凋亡和坏死两种死亡形式 ;与对照组相比 ,缺血再灌注后1 d,海马 CA1区损伤较重 ,出现了较多的凋亡细胞 ,而 L A可明显抑制锥体细胞的凋亡。实验证明 :在脑缺血再灌注损伤中 ,细胞凋亡是神经元死亡的一种重要形式 ;L A对脑缺血再灌注有明显神经保护作用     

ZD制剂对马肢蹄软组织损伤部位肌组织形态及VEGF和bFGF表达的影响

ZD制剂为治疗马非开放性软组织损伤的经典验方,为探索其作用机制,通过建立马前肢急性软组织损伤模型,对其进行组织形态学观察,评价ZD制剂对马急性软组织损伤的作用效果,采用免疫组织化学方法检测ZD制剂对VEGF、bFGF在肌肉中表达的影响。用20匹蒙古马随机分为4组,选取左前肢肩部臂部肌肉,制造急性软组织损伤模型。于造模前、后用取样器进行组织取样,制作成石蜡切片,观察其形态学变化,用免疫组织化学方法对阳性细胞分析VEGF、bFGF的表达。结果表明,试验药物组在损伤后的修复能力优于阳性药物组和阴性对照组。表明ZD制剂可通过促进成纤维细胞、毛细血管新生和肌细胞的生成来进行组织的修复再生,试验药物组在损伤后VEGF、bFGF的表达优于阴性对照组和阳性药物组,ZD制剂可能通过提高VEGF、bFGF的表达进行损伤的修复。     

复方罗红霉素可溶性粉对鸡葡萄球菌病的疗效试验

采用人工诱发的病理模型,按推荐剂量治疗,验证复方罗红霉素可溶性粉对鸡(试验时30日龄)葡萄球菌病的疗效.试验结果表明,复方罗红霉素可溶性粉对鸡葡萄球菌病有很好的治疗效果,有效率达96.7%;推荐剂量治疗组的死亡率极显著地低于感染对照组(P<0.01);推荐剂量治疗组与健康对照组的增重差异不显著(P>0.05),但极显著高于感染对照组(P<0.01).     

麦洼牦牛全泌乳期乳中矿物质元素变化规律研究

为阐明牦牛乳中矿物质元素含量在全泌乳期的变化规律,试验采集了四川省龙日种畜场麦洼牦牛产犊当天到180 d（即0～180 d）内共12个时间点的乳样。采用微波消解法处理乳样,用电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-OES）测定牦牛乳中14种矿物质元素,分别为4种大量元素（钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）、磷（P））和10种微量元素（硼（B）、钡（Ba）、镉（Cd）、钴（Co）、铜（Cu）、钼（Mo）、镍（Ni）、钛（Ti）、锌（Zn）、锰（Mn））,并以牦牛产犊后30 d采集的乳样数据为基准进行统计分析。结果显示,麦洼牦牛初乳中K、Ca、Mg、P 4种大量元素含量较高。与30 d的常乳含量相比,K的含量在0 d时差异极显著（P＜0.01）,在120 d时差异显著（P＜0.05）;Ca的含量在5 d时差异显著（P＜0.05）;Mg的含量在180 d时差异显著（P＜0.05）;P的含量变化差异不显著（P＞0.05）。在0～180 d泌乳期内微量元素随泌乳期的变化也较明显,与30 d的常乳含量相比,Ba的含量在0和1 d时差异极显著（P＜0.01）,在2、3、4、5和180 d时差异显著（P＜0.05）;Mo、Ni、Zn的含量在180 d时差异显著（P＜0.05）;B、Cd、Cu、Ti、Mn的含量随泌乳期变化差异均不显著（P＞0.05）。综上所述,牦牛乳中K、Ca、Mg、Ba、Mo、Ni、Zn的含量随泌乳期的变化差异显著（P<0.05）,P、B、Cd、Cu、Ti、Mn的含量变化不显著（P>0.05）;整体上看,K、Mg、P、Ba、Zn的含量变化呈先降低后增加的趋势,而Ca的含量呈现出先增加后降低的趋势。     

4个绵羊品种MHC-DRB3基因外显子2的多态性分析

采用PCR-RFLP方法分析4个绵羊品种（阿勒泰羊、中国美利奴肉用多胎品系、湖羊和陶塞特羊）MHC-DRB3基因第2外显子的多态性，并进行聚类分析以及基因杂合度和多态信息含量的计算。结果表明：在绵羊MHC-DRB3基因第2外显子第122、154、168、220和241 bp碱基处表现出多态性；χ2适合性检验结果表明，4个绵羊群体MHC-DRB3基因的第2外显子的PstⅠ酶切位点达到了Hardy-Weinberg平衡状态，TaqⅠ和HaeⅢ酶切位点多态性均未达到Hardy-Weinberg平衡状态；4个绵羊群体基因杂合度和多态信息含量值分别在0.693～0.774和0.662～0.738之间，表明4个绵羊品种具有丰富的遗传多样性；聚类结果表明，中国美利奴肉用多胎羊和湖羊亲缘关系最近，阿勒泰羊和陶塞特羊关系较远，与实际选育过程一致，MHC-DRB3多态性可作为绵羊育种标记进一步研究。