Prokaryotic Expression of Fusion Gene of Cat Recombinant Allergen Fel d 1 with Hepatitis B Core Antigen

To expose the cat recombinant allergen Fel d 1 protein on the outer surface of hepatitis B core antigen（HBcAg）virus-like particles（VLPs), the recombinant Fel d 1（rFel d 1）was created by linking the two genes chain 1 and chain 2 that composed the Fel d 1 protein. Then the rFel d 1 sequence was inserted into the HBcAg c/e1 loop area, replacing the amino acids between D78 and E83 in HBcAg c/e1 loop area. We successfully constructed the prokaryotic expression vector pET28a-HBcAg-rFel d 1 via gene codon optimization and synthesis. The recombinant plasmid pET28a-HBcAg-rFel d 1 was transformed into E.coli BL21(DE3）cells, then induced by IPTG, purified by Ni-NTA affinity chromatography and tested by SDS-PAGE, Western blotting and transmission electron microscopy（TEM). The fusion protein HBcAg-rFel d 1 was expressed successfully in E. coli expression system and the pure fusion protein HBcAg-rFel d 1 was purified by Ni-NTA affinity chromatography. Further, TEM confirmed the fusion protein HBcAg-rFel d 1 could assemble into VLPs. The fusion protein HBcAg-rFel d 1 could assemble into VLPs spontaneously, which laid a solid foundation for the research of the preventive and therapeutic vaccines for cat allergy.     

犊牛早期断奶对青海湖地区母牦牛牧食行为的影响

为研究犊牛早期断奶对青海湖地区自由放牧条件下牦牛牧食行为的影响。试验于2015年8月22日至11月15日开展,选取26头带犊牦牛作为试验对象,对其中13头牦牛的犊牛实施早期断奶处理作为断奶组,另外13头带犊牦牛作为对照组。断奶组和对照组各随机选取3头牦牛佩戴畜用GPS3300装置,每10min记录一次家畜所在位置和环境温度。试验分为断奶早期(断奶后15d)、断奶中期(断奶后第16天到第38天)、断奶后期(断奶后第59天到第82天)。断奶早期又分为阶段Ⅰ(断奶后第1天到第6天)、阶段Ⅱ(断奶后第7天到第15天)。结果表明:1)断奶早期阶段Ⅰ断奶组的平均日游走距离极显著高于对照组(P0.01),断奶早期阶段Ⅱ、断奶中期和断奶后期两组的平均日游走距离差异不显著。断奶组在不同时期的平均日游走距离表现为,断奶早期阶段Ⅰ显著高于断奶早期阶段Ⅱ和断奶中期(P0.05),断奶早期阶段Ⅱ和断奶中期显著高于断奶后期(P0.05)。对照组则表现为断奶早期阶段Ⅰ、断奶早期阶段Ⅱ和断奶中期显著高于断奶后期(P0.05)。断奶当天断奶组牦牛的游走距离显著高于对照组。在不同断奶时期断奶组和对照组的昼夜采食规律有所不同。2)断奶早期阶段Ⅰ、断奶早期阶段Ⅱ及断奶中期断奶组和对照组的采食空间分布格局相似,但是断奶中期的采食空间分布格局明显广于断奶早期。断奶后期断奶组和对照组的采食分布格局出现了分化,对照组的采食活动范围明显广于断奶组。研究结果表明,早期断奶会短时间内让母牦牛的牧食行为产生一定的应激反应,但其又可以很快适应失犊的情况。在环境比较恶劣、牧草质量较差的情况下,带犊牦牛和不带犊牦牛种内竞争比较激烈,适合分群放牧。     

西花蓟马在不同寄主植物上的发育历期

在室内用不同的寄主植物饲养西花蓟马来测定其各虫态的发育历期。结果表明,寄主植物对西花蓟马的发育历期有明显的影响,寄主的不同部位、颜色均可影响西花蓟马各虫态的发育历期,对卵期与2龄若虫期的影响最大。在所有供试寄主中,西花蓟马在黄瓜上的发育历期最短,黄瓜为其最嗜好的寄主。     

运输应激猪HSPs mRNA转录、分布及免疫器官病理性损伤相关性研究

【目的】研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平,探讨其相关性。【方法】利用组织学、原位杂交和本实验室建立的猪HSPs mRNA一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台等方法,研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平的变化。【结果】在长途运输应激初期（1～2 h）,淋巴结和脾脏出现急性病理性损伤变化,损伤程度较为严重;运输应激4 h时,组织的病理性损伤与应激初期相似,但血管的充血程度有所减轻;淋巴结和脾脏中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激持续到10 h时,HSP70 mRNA的转录水平升到最高,分别为对照组的9.59和11.46倍;HSP90 mRNA的转录水平在应激初期（1～2 h）急剧升高（P＜0.01）,运输应激2 h时,淋巴结和脾脏中HSP90 mRNA的转录水平分别为对照组的59.67和13.03倍,到运输应激持续到6 h后,升高不再显著。HSPs mRNA在淋巴结和脾脏细胞中的定位无肉眼可见的随着应激时间的延长而发生相应的变化,但HSP70和HSP90 mRNA之间的定位存在着差异。【结论】运输应激可以导致组织损伤和HSPs mRNA转录水平的变化,但对不同家族的HSPs mRNA转录水平的影响不同;HSP90 mRNA的转录水平与组织损伤有着良好的相关性,有望成为猪运输应激的判定指标之一。     

肉牛传染性牛支原体肺炎流行的诊断

采用多种诊断方法,对2008年以来湖北省多个地区新引进育肥肉牛呼吸道传染病进行了病原学研究.患牛病理变化主要集中在肺部,轻者可见肺局部肉样变,严重者可见肺广泛分布干酪样或化脓性坏死灶.将肺坏死组织制作石蜡切片,显微镜观察发现,肺组织表现为坏死性肺炎,未见典型的结核结节.实验室病原检测项目包括:支原体培养鉴定,PCR检测与目的基因测序鉴定;细菌分离鉴定;牛结核检测;泰勒虫血涂片检测与PCR检测等.最终确定该新发呼吸道传染病为牛支原体(Mycoplasma bovis)肺炎.同时,环形泰勒虫混合感染与细菌继发感染率很高,使病情复杂化.通过药敏试验发现,不同牛场分离的牛支原体最敏感药物为环丙沙星,其次为左氟沙星、四环素.文中还对该病的综合防治提供了合理的建议.     

生物肥对大豆生物性状及产量的影响

以高蛋白大豆东农42为材料,采用大田试验研究生物肥的施用对大豆株高、根长及产量的影响。试验结果表明：生物有机肥的施用对大豆植株生长有促进作用。生物肥总体上在各个时期都促进大豆植株生长。但对大豆植株生长的影响在苗期、盛花期、鼓粒期体现不明显,而主要体现在成熟期,在成熟期施用生物肥的大豆株高明显高于对照。     

我国中籼杂交稻亲本的DNA变异性研究

利用9个随机引物对42个中籼“三系”杂交稻骨干亲本(保持系和恢复系)进行了DNA遗传差异 分析。 结果表明： 恢复系、 保持系遗传多样性小。 恢保间遗传一致性高达0.87, 遗传 距离则为0.1377。 保持系已选育出较多的材料遗传差异超过了珍汕97B, 而恢复系选 育仍 未突破明恢63, 杂交稻遗传差异未明显大于汕优63。 双亲遗传差     

Reduction of Titanium Oxide and Thickening of Blast Furnace Slag Bearing Higher Titania

The slag samples that have some titanium oxide reduction grade are reduced with blast furnace slag taken from Pan Zhi Hua Iron & Steel (Group) Co. in site. Then the viscosity and free running temperature of slag samples were measured in laboratory. With the increasing of reduction grade the viscosity and free running temperature of slags would have rising tendency. The mineral structure of the samples is observed in optical microscope, and quantitative analysis of TiC, TiN in the slag samples is made with image analysiser. The results show that the thickening of titanium slag has relationship with the amount of TiC, TiN, which was reduced from titania. So the usage of titanium oxide reduction grade as the index of thickening in blast furnace process is reasonable, and which could represent characteristic of the blast furnace smelting iron ore bearing titanium and vanadium.     

抗真菌基因导入棉花创造高抗黄萎病材料研究

利用基因工程技术将抗真菌的β－３,３－葡聚糖酶基因和几丁酶基因导入棉花,在研究建立不同抽花品种的体细胞培养和微茎尖培养再生植株技术体系基础上,采用基因枪法、叶盘法等途径进行遗传转化,并通过花粉管通道途径导入目的基因,已获多批经卡那霉素筛选的植株,经ＰＣＲ检验,已得到阳性结果,证明该目的基因已整合到棉化基因组中。