Preparation of gfp-bcl-XL-contained recombinant adenovirus vector by the homologous recombination in bacteria

AIM: To prepare gfp-bcl-X_L-contained recombinant adenovirus(rAd-gfp-bcl-X_L).METHODS: Bcl-X_L gene was amplified from pEGFP-C₃-bcl-X_L, subcloned into shuttle plasmid and formed transfer plasmid of pAdTrack-CMV-bcl-X_L. Then pAdTrack-CMV-bcl-X_L was linealinzed with PmeI and co-transformed into BJ5183 bacteria with adenovirus genomic plasmid of pAdEasy-1. The identified recombinant adenovirus plasmid was digested with PacI and transfected into 293 cells to package recombinant adenovirus particles. The target gene was detected by PCR.RESULTS: There were about 35% positive recombinant bacterial clones after the co-transformation of pAdTrack-CMV-bcl-X_L and pAdEasy-1 into BJ5183. Recombinant adenovirus particle were produced and further amplified after the transfection of pAdEasy-1-gfp-bcl-X_L into 293 cells. PCR test indicated that the recombinant Ad contained bcl-X_L gene. The titer of the purified rAd-gfp-bcl-X_L was 6.5×10¹² PFU/L. CONCLUSIONS: The homologous recombination in bacteria is a convenient and high efficient method to prepare rAd-gfp-bcl-X_L. This affords a good gene transfer vector for the gene therapy in human’s diseases.     

多花黑麦草品种比较试验

通过对现行生产中常用的4个多花黑麦草品种在昆明地区的物候期、株高、草产量、生长率、净同化率等指标的规定表明,在生长初期,特高的生产性能比其余3个品种都好,但生长一段时间后,邦德的生产性能明显超过特高(P<0.05),抗锈王略高于特高(P>0.05),旺饲的生产性能最差(P<0.05)。因此,邦德是一个在生产中值得推广应用的品种。     

温度对杨树菇栽培性状影响的统计学分析

分析了温度环境因子对杨树菇生长发育的影响 ,研究结果表明 :菌丝体营养生长以 2 5～ 2 7℃为最适。原基分化温度 11～ 16℃ ,子实体发育以 13～ 2 6℃最适 ,不同菌株的最适温度存在差异。通过对日平均气温与杨树菇生产周期和产量、品质的关系试验 ,温度与病害发生关系试验 ,用统计分析方法得出了杨树菇各生理阶段的最适温度范围 ,为杨树菇的优质高产栽培提供了温度环境因子的基础数据和调控依据。     

新疆盐碱地种植耐盐小麦土壤盐分的变化

新疆干旱区有大量盐碱地 ,很大程度上限制农业的可持续发展。盐碱的利用改良和水资源的高效利用的研究 ,面临巨大的挑战。盐碱地上种植耐盐小麦既有生产效益 ,又有改良土壤盐渍化作用。在传统灌溉管理下 ,当土壤原始盐分 2 .0 %时 ,在壤质土壤上种植耐盐小麦 1— 2年 0— 40cm土层盐分可降到 0 .8%。在粘壤土、壤土土质的土壤中 ,种植耐盐小麦 5年时 ,0— 1 0 0cm土层盐分可降到 0 .5 % ;种植 7年后 ,0— 1 0 0cm土层盐分降到 0 .2 %左右 ,且在以后种植条件下 ,土壤盐分趋于平衡状态 ,变化很小。种植耐盐小麦引起的盐分变化 ,灌溉水为主要作用 ,以至经多年种植 ,土壤表现为脱盐碱化现象。     

Effects of changing PKC activity on proliferation and telomerase expression in human hepatocellular carcinoma cells

AIM: To investigate whether protein kinase C (PKC) is involved in the proliferation and the telomerase expression in human hepatocellular carcinoma cells. METHODS: Human hepatocellular carcinoma cells (BEL-7402) were treated with exogenous phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA, PKC activator) and staurosporine (SP, PKC inhibitor) for 48 hours. The techniques of cell culture and the telomeric repeat amplification protocol silver staining in combination with computer image scanning system in vitro were used to observe the variations of the growth and the telomerase expression. RESULTS: The proliferative potential of BEL-7402 cells was decreased by the action of PMA as well as SP, and the telomerase expression was also inhibited by PMA and SP. CONCLUSION: Our findings suggest that the proliferation of human hepatocellular carcinoma cells and the telomerase expression may be related to PKC.     

降水格局对科尔沁沙地三种草本植物凋落物分解的影响

基于研究区多年降水特征,设置高频低量、中频中量和低频高量3种降水格局,采用凋落物分解袋法,对科尔沁沙地3种常见一年生草本植物一个生长季地上和地下凋落物分解特征进行了研究。结果表明,降水格局和凋落物埋深均是影响分解率的关键因素。其中地表凋落物的分解率显著低于地下凋落物,随埋深增加地下凋落物的分解率有增加的趋势,10~20 cm层狗尾草地下凋落物分解率显著高于0~10 cm层(P<0.01)。低频高量降水状况下地上凋落物的分解率显著降低(P<0.01)。降水格局与凋落物埋深存在显著的耦合关系(F=3.60, P=0.008),随土壤深度增加,降水格局对凋落物分解率的影响减少,且物种间存在差异性,不同降水格局下狗尾草和黄蒿地上凋落物和0~10 cm埋深地下凋落物分解率均存在显著差异性(P<0.05),而尖头叶藜仅地上凋落物在不同降水格局下的分解率表现出显著差异性(F=48.42, P<0.001)。     

台湾桤木的组织培养

以台湾桤木(Alnus formosana)枝条的顶芽或腋芽为外植体进行了组织培养技术的研究,成功建立了台湾桤木组培快繁体系.研究结果表明:接种诱导培养基以1/2 MS+BA 0.2 mg·L-1最佳,诱导率为35.0%;继代培养基以MS+BA 0.2 mg·L-1最佳,芽增殖系数为2.87;生根培养基以1/2 MS+IBA 1 mg·L-1为最佳,生根率达100%,平均生根条数8.94;试管苗炼苗后移栽到糠壳灰:黄心土=1:3的基质中,移栽成活率可达85%以上.     

硬粒小麦-长穗偃麦草附加系、代换系和易位系的创制

通过小麦与长穗偃麦草远缘杂交创制附加系、代换系及易位系是小麦遗传改良中利用长穗偃麦草优良基因的重要途径。本研究将长穗偃麦草特异分子标记、染色体计数、基因组原位杂交(GISH)及非变性原位杂交(ND-FISH)等多种方法相结合,对硬粒小麦Langdon (AABB)与小偃麦8801 (AABBEE)的杂交后代群体进行分子细胞学鉴定,创制出硬粒小麦-长穗偃麦草3E、6E染色体双体附加系Du-DA3E和Du-DA6E,硬粒小麦-长穗偃麦草1E (1B)染色体双体代换系Du-DS1E(1B)以及硬粒小麦-长穗偃麦草1AS-1EL染色体易位系Du-T1AS·1EL。创制的4个种质中长穗偃麦草染色体均能稳定遗传,这不仅增加了硬粒小麦-长穗偃麦草附加系和代换系的类型,还为后续利用长穂偃麦草优良基因改良小麦提供了特殊种质资源。     

罗宾根螨发育起点温度和有效积温的研究

在恒温条件下,对罗宾根螨(Rhizoglyphus robini Clapareda)卵、幼螨、若螨历期以及成螨产卵前期、世代发育历期进行测定,用直线回归法对罗宾根螨各螨态和1个世代的发育起点温度和有效积温进行计算,并根据有效积温法则对该螨在云南各地的年发生代数进行预测.结果表明:该螨全世代的发育起点温度为10.01℃,有效积温为171.72℃·d;该螨年发生代数在昆明为11代、陆良为12代、富民为14代.     

几种经济红藻中茉莉酸合成途径的关键物质

为研究几种经济红藻中茉莉酸合成途径的关键物质,实验采用液相色谱—质谱联用技术(LC-MS)对茉莉酸生物合成途径相关物质建立检测方法,并对龙须菜、坛紫菜受到机械损伤时各物质的变化情况进行检测。以100%甲醇提取茉莉酸(JA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、12-氧-植物二烯酸(12-OPDA)和13-氢过氧化亚麻酸(13-HpOTE),利用XBridge TM C18色谱柱,以甲醇/水为流动相分离4种物质。优化条件下4种物质得到良好分离,加标回收率为81.23%～90.25%,检测限为0.04～0.56 ng/mL,灵敏度高。坛紫菜、龙须菜和真江蓠3种红藻中,坛紫菜中未检测到JA和13-HpOTE,4种物质均在另外2种藻中检测到。龙须菜受机械损伤胁迫后,4种物质在短时间内得到积累,其中13-HpOTE响应迅速。研究表明,红藻中可能存在类似于植物的茉莉酸合成途径,并参与对损伤的胁迫响应。