猪带绦虫TSOL18特异性单克隆抗体的制备及其体外杀虫作用的研究

本研究目的在于制备抗猪带绦虫TSOL18单克隆抗体,并分析单抗对六钩蚴的杀伤作用。采用SephadexG-100纯化在毕赤酵母中表达的猪带绦虫六钩蚴TSOL18蛋白;纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术建立能分泌抗TSOL18单克隆抗体的细胞株;通过ELISA叠加试验进行mAb的抗原表位分析;采用间接ELISA法测定TSOL18单克隆抗体特异性及腹水效价;采用抗TSOL18单克隆抗体对激活的猪带绦虫六钩蚴进行体外六钩蚴杀伤试验,观察单抗对猪带绦虫六钩蚴活力的影响。结果成功获得12株稳定分泌抗TSOL18单克隆抗体的杂交瘤细胞株,识别2个不同抗原表位,不同抗原表位的2株单克隆抗体腹水效价分别为1×102、1×106。抗体体外六钩蚴杀伤试验结果证明,在有补体的情况下,多抗和单抗作用6 d后,六钩蚴结构模糊,边缘不清晰。表明单抗对六钩蚴有一定的杀伤作用。     

茯砖茶中冠突散囊菌纤维素酶的酶学性质研究

从茯砖茶中分离出冠突散囊菌,对其进行液体发酵培养,制备成粗酶液。在不同条件下处理粗酶液,运用3,5-二硝基水杨酸(DNS)还原糖法测定纤维素酶活性。试验结果表明,冠突散囊菌所产纤维素酶酶活最佳温度是50℃,最佳pH值是4.8;在30～50℃,pH4～6范围内有较高的稳定性;Ca2+、Mg2+离子对酶活有激活作用,Mn2+、Zn2+、Pb2+离子对酶活有抑制作用。     

Investigation of Clinical Medicine for Treating Cows Endometritis in Baotou Area

In 4 dairy farms located in Baotou area, clinical medicine investigation and drug resistance of pathogenic bacteria were conducted, and then curative effects of different treatment methods were analyzed.Epidemic materials were collected from diary cows infected by endometritis, from which pathogenic bacteria were isolated using conventional microbiology technologies.Broth microdilution method was used to detect the sensitivity and resistance of pathogenic bacteria to antibiotics commonly used in clinic.On this basis, the sensitive drugs were used to treat mastitis or endometritis, the clinical curative effect of traditional treatment group was compared with that of therapeutic test group.The result of traditional treatment group showed 13 antibiotics were used to treat 160 cases of endometritis, florfenicol was most effective, penicillin was most ineffective.The results of therapeutic test group showed that Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Streptococcus were the main pathogenic bacteria of endometritis, which were sensitive to gentamicin and cefalotin, etc.The results of statistical analysis showed that the curative effect of therapeutic test group was extremely significantly different from that of traditional treatment group(P<0.01).Sensitive drugs screened by drug sensitive test could be used to target therapy, and obtain satisfied curative effect.Moreover, this approach could avoid antibiotic abuse.     

母乳中VA与婴幼儿健康研究进展

母乳中含有多种VA,如视黄醇、β-胡萝卜素、β-隐黄质、α-胡萝卜素、番茄红素及叶黄素等,且母乳初乳、过渡乳和成熟乳中VA的含量不同,但总体上VA含量随着泌乳期的延长而降低。如母乳中含量最高的VA视黄醇,其在初乳、过渡乳、成熟乳中的含量分别为478～1 920、440～1 270、178～825μg/L。母乳中VA含量除受泌乳时间影响外,还与地域、乳母膳食及母乳脂肪含量等有关。本文重点介绍不同国家/地区母乳中VA的种类、含量、影响因素及其健康作用（视觉健康、免疫健康和生长发育等）,以期为婴幼儿配方乳粉的发展提供参考。     

五指山小型猪DAZAP2 cDNA的克隆及其生物信息学分析

为了克隆五指山小型猪DAZ相关蛋白2(DAZAP2)cDNA全长并进行生物信息学分析,试验以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法克隆得到DAZAP2全长cDNA序列,并运用生物信息学软件对其核苷酸序列进行分析,预测其编码蛋白的理化性质及二级结构等。结果表明:五指山小型猪DAZAP2基因的核苷酸序列及其氨基酸序列与人、苏门达腊猩猩、斑马鱼、非洲爪蟾、牛、褐家鼠等动物具有很高的相似性。DAZAP2 cDNA全长943 bp,5’非翻译区长69 bp,3’非翻译区长367 bp,含有1个完整的开放阅读框,编码168个氨基酸。该蛋白的分子质量为17 311 ku,等电点为7.48。     

递增注射脂多糖诱导慢性免疫应激对仔猪生长性能的影响

本试验旨在研究递增30%注射脂多糖(LPS)诱导仔猪慢性免疫应激的效果及对仔猪生长性能、营养物质表观消化率的影响。选取16头断奶仔猪,随机分为2组(对照组、LPS组),单笼饲养。LPS组隔天静脉注射LPS,初始注射剂量80μg/kg BW,随后逐次递增30%,对照组注射相应剂量的生理盐水,试验期15 d。研究发现:仔猪注射LPS第1、5天血浆白细胞介素-1β和皮质醇含量极显著高于对照组(P0.01),第9天血浆皮质醇有高于对照组的趋势(P=0.10),整个试验期内血浆结合珠蛋白含量显著高于对照组(P0.05)。与对照组相比,注射LPS仔猪在试验的3个阶段(1~4 d、5~8 d和9~15 d)平均日增重分别降低了40.00%(P0.01)、29.52%(P0.05)和19.30%(P0.05),平均日采食量分别降低了25.09%(P=0.01)、23.15%(P0.05)和19.47%(P0.05),增重耗料比与对照组无显著差异(P0.05)。与对照组相比,注射LPS仔猪饲粮干物质表观消化率下降了5.43%(P0.05),能量表观消化率有降低的趋势(P=0.06),粗脂肪和粗蛋白质表观消化率略有降低(P0.10)。试验结果表明,递增30%注射LPS成功诱导仔猪慢性免疫应激,降低了仔猪平均日采食量和营养物质表观消化率,抑制了仔猪生长。     

鹅IGF-I基因cDNA的克隆、分析与原核表达

从GenBank中读取鸡、鸭、鹌鹑、火鸡等的胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因序列进行分析并设计引物,运用RT-PCR法从五龙鹅的总RNA中克隆了IGF-I基因的完整编码区序列(GenBank登录号为DQ662932).运用生物信息学技术对序列进行分析,结果显示:五龙鹅JGF-I基因的编码区长462 bp,与鸭和鸡基因序列同源性分别为99.6%和98.1%;分子进化树进一步揭示了五龙鹅与鸭、鸡及其他动物的进化关系;同源建模分析发现该基因有3个α-螺旋组成.克隆鹅IGF-I基因表达序列,然后连接到pET-32a载体上进行原核表达.经SDS-PAGE分析发现原核表达产物约为28 ku的融合蛋白,Western杂交分析表明,重组蛋白为目的蛋白.     

日粮中25-OH-D3、VD3不同水平组合对肉仔鸡生长性能的影响

试验分为5个处理组,25-OH-D3(μg/kg)、VD3(IU/kg)的添加量分别为0、2760,69、0,34.5、1380,34.5、2760,69、1380,每组4个重复,每个重复10只健康艾维茵肉公雏,共200只,研究25-OH-D3和VD3不同添加水平组合对肉仔鸡生长性能的影响。结果表明,各处理组肉仔鸡生长性能均较好,而且相互之间的差异均不显著(P>0.05)。日粮中组合添加25-OH-D334.5μg/kg和VD31380 IU/kg时,肉仔鸡的生长性能最佳。     

Bad基因在黄体期绵羊生殖器官中表达的比较研究

以黄体期小尾寒羊和萨福克羊为研究对象,采用免疫组织化学技术,针对Bad基因在母羊生殖器官卵巢,输卵管和子宫中的表达与定位进行初步研究,在卵巢中Bad基因均在多数黄体细胞中表达;在输卵管宫管结合部、峡部和壶腹部的分泌细胞Bad基因均有不同程度的表达,未发现纤毛细胞Bad阳性细胞;子宫内膜腺体小泡表达Bad阳性,子宫内膜子叶、基质的阳性细胞数极少,阳性细胞呈轻度着色,显弱阳性.利用计算机图像分析技术测量小尾寒羊和萨福克羊Bad基因表达的阳性细胞率和平均光密度,Bad基因在这两种绵羊组织中的表达规律大体相似,也存在一些明显的差异:萨福克羊的黄体细胞较小尾寒羊中的细胞凋亡更明显,萨福克羊输卵管伞部和壶腹部上皮Bad阳性细胞率均高于小尾寒羊,小尾寒羊子宫内膜子叶和基质Bad阳性细胞率和平均先密度均显著高于萨福克(P＜0.01).结果表明,小尾寒羊和萨福克羊生殖器官中细胞凋亡的差异与Bad基因表达的差异,可能是造成两者繁殖力高低差异的基础.     

VEGF在绵羊生殖管道中的表达规律

以不同发情周期雌性绵羊子宫、输卵管为研究对象,采用免疫组织化学技术,针对血管内皮生长因子（VEGF）在绵羊子宫、输卵管的表达、定位和变化规律进行了检测,同时应用相关图像分析软件对抗原染色强度进行了定量分析。结果表明：输卵管在发情0～15d,VEGF表达量在第9天达到峰值后经历波动逐渐下降过程,输卵管内膜上皮细胞是VEGF抗原的主要靶细胞;而子宫角在发情0～15d,VEGF表达量在第5天达到峰值后经历波动逐渐下降过程,子宫内膜固有层及腺体周围细胞为VEGF抗原的主要靶细胞。该研究结果为绵羊生产中进一步提高受胎率和妊娠率及频密产羔等技术的应用提供了科学依据。