HPLC-PDA法测定兽药中非法添加四种解热镇痛抗炎类药物

建立了7种兽药中非法添加对乙酰氨基酚、安乃近、地塞米松和地塞米松磷酸钠药物的HPLC-PDA法。采用十八烷基键合硅胶为填充剂,磷酸二氢钠缓冲液（磷酸二氢钠3．0 g加水至1000 mL,加三乙胺1 mL,用氢氧化钠调pH值至7．0±0．2）-甲醇（80∶20）为流动相,梯度洗脱,二极管阵列检测器进行全扫描和240 nm波长测定,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对四种目标分析物进行确证。结果显示,4种解热镇痛抗炎药物与其他物质峰分离良好,在测定范围内线性关系良好,平均回收率为73．5％～119．2％,RSD为0．1％～5．8％。本方法准确、可靠、重现性好,可用于兽药制剂中非法添加四种解热镇痛抗炎药物的定性和定量检测。     

大肠杆菌acrR插入序列对acrAB表达水平及多重耐药性的影响

为研究大肠杆菌(E.coli)分离株ED28的acrR基因中777bp插入片段对外排泵AcrAB表达水平及多重耐药性的影响,本研究将野生型acrR通过互补实验导入ED28中得到C-ED28。通过药物的最低抑菌浓度(MIC)测定、有机溶剂耐受性试验和实时定量PCR(qPCR)等方法检测菌株中AcrAB外排泵的活性。通过PCR方法检测ED28和C-ED28喹诺酮耐药决定区(QRDR)的氨基酸突变及携带的质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因。结果显示,临床分离菌株ED28对12种抗生素呈多重耐药表型,而互补菌株C-ED28恢复了对多种药物的敏感性。当能量抑制剂(CCCP)存在时,喹诺酮类和β-内酰胺类药物对ED28的MIC普遍降低,而对C-ED28的MIC保持不变。ED28对染料溴化乙锭(EB)的MIC为512μg/mL,对正己烷和环己烷耐受;而C-ED28对染料EB的敏感性增强,MIC为16μg/mL,对正己烷耐受,对环己烷不耐受。qPCR结果显示,基因acrA和acrB在C-ED28中的表达水平低于亲本菌株ED28,而基因marA在C-ED28中的表达水平高于ED28。靶位突变检测和耐药基因检测结果显示,ED28存在gyrA(Ser83Leu和Asp87Asn)和parC(Ser80Ile)双突变,携带aac(6’)-Ib-cr、blaCTX-M-27和blaTEM-13个质粒编码耐药基因;而C-ED28仅存在gyrA(Asp87Asn)一个突变位点,并丢失aac(6’)-Ib-cr、blaTEM-1两个基因。     

细叶旱芹地上部化感物质粗分离物对4种草坪草及5种牧草的化感作用

采用滤纸培养皿法,以发芽率、发芽势、根长和苗长为指标,研究细叶旱芹(Cyclospermum leptophyllum(Pers.) Sprague ex Britton et P. Wilson)地上部化感物质对4种草坪草和5种牧草受体植物的种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,细叶旱芹地上部化感物质对4种草坪草和5种牧草的种子萌发和幼苗生长均有抑制作用,其中对种子发芽势抑制最明显,抑制率最高达96.3%;其次是对幼苗根长的抑制作用,抑制率最高达91.1%。通过比较种子萌发和幼苗生长的测定指标,得出5种馏分对草坪草的化感作用为石油醚相>氯仿相>正丁醇相>乙酸乙酯相>水相,而对牧草的化感作用为石油醚相>乙酸乙酯相>氯仿相>正丁醇相>水相。说明不同受体植物对相同萃取相组分的化感作用强弱存在差异,细叶旱芹地上部化感物质主要存在于石油醚馏分中,可进一步从中分离提取活性物质。     

儿茶素的药理作用研究综述

目的研究表儿茶素(EC)对小鼠急性肺损伤(ALI)炎症反应的调节作用。方法采用吸入式气管滴注法在BALB/c小鼠中建立ALI模型,H8LE染色观察肺组织病理学变化,并结合基于超高效液相色谱与四极杆—飞行时间质谱联用技术(HILIC UHPLC-Q-TOF MS)的非靶向代谢组学方法对小鼠肺组织进行研究。结果对比空白对照组,LPS处理后的小鼠肺组织发生严重的炎症变化,而EC预处理组炎症现象比LPS组轻。经肺组织代谢轮廓分析发现：二十羟基花生四烯酸、色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、ATP、磷酸胆碱、二十碳四烯酸、磷酸、烯醇和二磷酸葡萄糖等差异物与小鼠急性肺损伤内源性代谢密切相关,且涉及甘油酯代谢、糖酵解、甘油磷脂代谢、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、抗坏血酸代谢和胆碱代谢等6条代谢路径。结论运用代谢组学方法探讨了EC干预小鼠ALI的差异代谢物变化情况,为表儿茶素抗炎特性的研究提供了理论依据。     

蝙蝠葛果实脂肪酸和氨基酸成分分析

首次对秦岭所产的治疗心血管疾病的药用植物蝙蝠葛果实中的脂肪酸成分采用GC-MS法进行了分析,检测并鉴定出11种脂肪酸,占脂肪酸总含量的99.99%。其中不饱和脂肪酸含量高达94.27%,主要成分为亚油酸,油酸和亚麻酸,其相对含量分别为47.65%,24.75%,19.82%。说明蝙蝠葛果实可能会成为良好的不饱和脂肪酸来源。对蝙蝠葛果实中氨基酸的含量及种类进行了测定,共测得17种氨基酸,氨基酸的总质量浓度为4.872 g.kg-1。其中谷氨酸含量最高(0.7833 g.kg-1),胱氨酸含量最低(0.03257 g.kg-1)。     

陕北安塞县马家沟流域近20 a来土地利用变化分析

汶川地震触发了大量次生山地灾害,震后山地灾害活动风险对灾区的发展规划决策有着重要的参考价值。通过对四川境内震后灾区基础资料的分析和研究,分别对灾区的44个县(市)进行了山地灾害危险性、易损性和风险评价,并以震后灾害点密度对危险性评价结果进行了验证,结果发现二者之间具有线性函数关系。评价结果表明,高度危险区集中于龙门山断裂附近,并且呈现明显的带状分布,面积比例为39.8%;极高易损和高度易损区则主要分布于成都、绵阳、德阳、雅安等大城市周边地区,面积比例为13.1%;高度风险区则主要位于龙门山腹地向山前平原的过渡带,属于高度危险和高度易损的结合部位,面积比例为11.0%。高风险区是今后恢复重建和发展规划中需要重点关注的地区;中度风险区由于灾后恢复重建的推进,其承灾体的易损性将会上升,容易导致其向高度风险转化,也要给予重视。     

免耕与土壤侵蚀研究进展

综述了国内外免耕控制土壤侵蚀的机理研究以及对土壤性质的影响,并提出免耕在我国的应用方向。     

不同培养基对PK15细胞增殖影响的研究

采用无血清液体培养基、DMEM培养基和MEM培养基进行PK15细胞的培养，观察细胞增殖及传代效果，确定无血清液体培养基的营养功能。结果表明：无血清液体培养基只能维持第一代细胞的生长，不能用于第二代后的培养，效果不如DMEM、MEM培养基，且差异显著。     

A rapid multiplication system for ‘Candidatus Liberibacter asiaticus’ through regeneration of axillary buds in vitro

‘Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas)’, which causes citrus Huanglongbing (HLB) disease, has not been successfully cultured in vitro to date. Here, a rapid multiplication system for CLas was established through in vitro regeneration of axillary buds from CLas-infected ‘Changyecheng’ sweet orange (Citrus sinensis Osbeck). Stem segments with a single axillary bud were cultured in vitro to allow CLas to multiply in the regenerating axillary buds. A high CLas titer was detected in the regenerated shoots on an optimized medium at 30 days after germination (DAG). This titer was 28.2-fold higher than in the midribs from CLas-infected trees growing in the greenhouse. To minimize contamination during in vitro regeneration, CLas-infected axillary buds were micrografted onto seedlings of ‘Changyecheng’ sweet orange and cultured in a liquid medium. In this culture, the titers of CLas in regenerated shoots rapidly increased from 7.5×10⁴ to 1.4×10⁸ cells μg^–1 of citrus DNA during the first 40 DAG. The percentages of shoots with >1×10⁸ CLas cells μg^–1 DNA were 30 and 40% at 30 and 40 DAG, respectively. Direct tissue blot immunoassay (DTBIA) indicated that the distribution of CLas was much more uniform in regenerated plantlets than in CLas-infected trees growing in the greenhouse. The disease symptoms in the plantlets were die-back, stunted growth, leaf necrosis/yellowing, and defoliation. The death rate of the plantlets was 82.0% at 60 DAG. Our results show that CLas can effectively multiply in citrus plantlests in vitro. This method will be useful for studying plant-HLB interactions and for rapid screening of therapeutic compounds against CLas in citrus.     

病原菌诱导黄瓜对其主要病害的抗病反应

以5种黄瓜主要病原菌作为诱导抗病因子,研究其对黄瓜主要病害的作用,结果发现黄瓜经病原菌诱导后,可以产生对诱导病原菌及其它病原菌引起病害的交互保护作用,并且诱导的交互保护作用与诱导浓度、诱导间隔期、不同品种存在相关性.诱导效果不随诱导接种浓度的升高而升高.在黑星病菌对霜霉病菌的诱导作用中,以浓度为1×102个/ml的黑星病菌孢子悬浮液的诱导效果最好,诱导间隔期为48h黄瓜黑星病菌对霜霉病的交互保护作用最明显,抗性品种的交互保护作用明显好于感病品种;炭疽病菌可诱导黄瓜有效抑制褐斑病的发生,但挑战接种褐斑病菌后,却促进了炭疽病的发生.诱导接种炭疽病菌后再挑战接种褐斑病菌12d,对褐斑病的防效为92.07%.