SOE PCR重构SLA-Ⅰ复合体研究

利用剪接重叠延伸PCR(SOE PCR)技术,中间加一富含甘氨酸/丝氨酸的linker(G4S)3,将SLA-Ⅰ重链基因SLA-2和轻链基因β2m连接,形成复合体基因链SLA-2-(G4S)3-β2m,然后将复合体基因链克隆入p2X表达质粒,导入受体菌TB1并进行表达。结果显示,利用SOE PCR技术成功得到了复合体基因链SLA-2-(G4S)3-β2m,并且克隆入p2X载体。SDS-PAGE检测表明,复合体基因导入宿主菌后获得了融合蛋白MBP-SLA-2-(G4S)3-β2m,大小为84.1 ku。试验结果为今后在体外进行相关基因重组表达提供参考。     

不同淀粉来源对生长猪氮代谢及血液部分生化指标的影响

本文旨在研究日粮淀粉来源对生长猪氮代谢和血液中部分生化指标的影响.试验选择17头体重(21.09±0.72)kg的杜×长×大三元杂交阉公猪,以玉米、早籼稻糙米、糯米和抗性淀粉作为淀粉来源,配合4个等氮、等能、等淀粉试验日粮和1个无氮日粮,进行1个按5×5拉丁方设计的氮代谢试验和1个为期8 d的单因子饲养试验.结果表明,抗性淀粉组蛋白质表观和真消化率均最低,表观消化率分别比玉米组、糯米组、糙米组低9.28%、11.31%和11.05%(P<0.05),真消化率分别低8.79%、10.80%和10.50%(P<0.05);蛋白质沉积率以玉米组最高,分别比抗性淀粉、糯米和糙米日粮组高25.98%(P<0.05)、1.32%(P>0.05)和1.37%(P>0.05).血液生化指标分析结果显示,抗性淀粉组试验猪的血液中葡萄糖、胰岛素浓度及胰岛素/血糖变化比较平稳,其他各组采食后升高幅度较大,1 h后达到高峰;其中糯米组采食后1 h血液中葡萄糖、胰岛素含量及胰岛素/血糖最高,分别为1.21 mg/mL、52.35μU/mL和43.27μU/mg,显著高于其他各组(P<0.05).由结果可知,日粮淀粉来源影响生长猪氮代谢和血液部分生化指标,抗性淀粉组的血糖和胰岛素变化幅度较小,蛋白质的沉积率也较低.     

中国荷斯坦种公牛BLAD遗传缺陷的分子检测及系谱分析

本试验运用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应（RFLP-PCR）方法,检测我国荷斯坦种公牛白细胞粘附缺陷（bovine leukocyte adhesion deficiency,BLAD）基因的携带频率。共检测了来自全国14个公牛站的587头种公牛,发现BLAD携带者8头,携带率为1.36%。对现有公牛系谱信息分析显示,携带者公牛来自美国、加拿大和中国,其中6头携带者公牛可以追溯到共同祖先Osborndale Ivanhoe。此外,本研究还对我国荷斯坦牛遗传缺陷的控制和携带者公牛的利用提出建议。     

不同储存年限老芒麦种子种带真菌检测及致病性测定

对来自青海的5个不同收获年份的老芒麦种样进行了系统的种带真菌研究;测定了12种分离率大于1%的种带真菌对老芒麦种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,种样发芽率为56%~80%,S₂发芽率最高,达到80%,显著高于S₁和S₅(P<0.05);种样带菌率为24%~38%,随储藏时间延长呈下降趋势,S₅带菌率最高,达到38%,显著高于其他种样(P<0.05);共鉴定出老芒麦种带真菌15属17种,真菌分离率为0.25%~8.75%,其中青霉和曲霉是老芒麦最常见的种带真菌,在5个种样上均被分离得到;燕麦镰孢、串珠镰孢、镰孢菌1、离蠕孢和德氏霉5种真菌是老芒麦最主要的致病真菌,均显著地降低了老芒麦种子的萌发、抑制了幼苗的生长、降低了幼苗的生物量(P<0.05);细交链孢对种子的萌发没有显著抑制作用(P>0.05),但是显著地降低了幼苗的长度和干物质产量(P<0.05)。皮思霉、离蠕孢、曲霉3种真菌显著延长了老芒麦种子平均萌发时间,而燕麦镰孢则显著地缩短了种子平均发芽时间(P<0.05)。     

几种常见桑树病害的识别与防治

桑树是蚕桑产业的重要物质基础。为确保桑树健康成长,促进产业发展,桑树病害的有效识别与及时防控尤为重要。真核微生物、原核微生物及非细胞类病毒中均存在能引发桑树传染性病害的病原微生物。其中由真核微生物引起的桑里白粉病与桑椹菌核病,原核微生物引起的桑青枯病与桑疫病是爆发频繁、危害极大的桑树病害。本文就这四种桑树病害的病原、侵染循环、病害识别及防治方法等进行系统梳理,并简要介绍几种非细胞类微生物引起的桑树病害,以期为生产上防治相关病害提供参考。     

鹌鹑血液中小分子RNA表达的初步研究

利用改进的Trizol法首次从鹌鹑血液中提取小分子RNA,比较小分子RNA在组织与血液中的表达差异,为简化小分子RNA的提取程序,提高实验研究效率以及探讨小分子RNA的遗传特性提供可供借鉴的资料.结果发现:①改进Trizol法提取血液中的总RNA,效果显著,条带清晰;②发现血液中只存在一种小分子miRNAs(18～22bp);③影响小分子RNA提取效率的关键因素包括样本的新鲜程度和RNA酶的污染.研究结果表明,通过改进的Trizol法提取血液中小RNA方法是可行的,小分子KNA在家禽血液中的表达具有特异性,snoRNAs,piRNAs在血液中不表达.     

畜牧学科遗传育种与动物营养学面上项目申请和资助情况分析

畜禽遗传育种学和动物营养学是国家自然科学基金委员会生命科学部六处畜牧学科面上项目的重要组成部分,本文对2004—2007年畜牧学科面上项目中的遗传育种学、动物营养学和饲料资源学的申请和资助情况进行了总结,对申请和资助项目快速增长情况进行了分析,并针对2008年基金委资助格局发生变化的状况,建议项目申请者明确定位,撰写申请书时要在突出创新思想的基础上,以提出的科学问题为主线,阐明拟解决科学问题的方法和手段。本文旨在为从事该专业的科研人员申报科学基金提供参考。     

基因重排H1N2亚型猪流感病毒的分离鉴定和生物学特性的研究

本研究对2005年～2006年广西和海南省疑似猪流感(SD)病猪的组织病料进行了病毒分离,并对分离毒株进行了亚型鉴定和生物学特性的研究.结果显示:分离的3株流感病毒均为H1N2亚型猪流感病毒(SIV).能凝集多种动物的红细胞,但凝集谱与以往报道略有不同;为热不稳定型病毒;在电镜下可观察到典型流感病毒粒子.动物试验显示:小白鼠、大白鼠和家兔对分离毒株不敏感,而豚鼠较敏感.能较好地复制出流感症状和病理变化;本体试验动物仅有轻微的临床症状,但能检测到抗体升高的变化,并能从鼻腔和上呼吸道检测和分离到SIV.核苷酸同源性分析显示:分离毒株Sw/GX/17/05、Sw/GX/13/06和Sw/HN/1/05的血凝素(HA)基因分别与基因重排H1N2 亚型SIV A/Swine/lndiana 9K035/99、A/SW/MN/23124-T/01和A/swine/Zhejiang/1/04的核苷酸同源性最高,分别达97.4%、97.0%和95.7%;神经氨酸酶(NA)基因均与基因重排H1N2 亚型流感病毒A/Trurkey/MO/24093/99 的核苷酸同源性最高,达97.2%～98.0%.核苷酸同源性分析进一步证实了分离毒株为基因重排H1N2亚型SIV.     

鸭传染性浆膜炎的病原分离鉴定与药防研究

本研究从四川、重庆等地鸭传染性浆膜炎鸭群中分离出可疑致病菌株19株,经生化鉴定为鸭疫里默氏菌,血清型鉴定除1株属Ⅱ型外,其余均为Ⅰ型;通过协同药物敏感性测定,研制出新型复方制剂“鸭浆灵”,经控制试验与临床应用效果显著。     

伪狂犬病毒在潜伏感染猪体内的组织分布

潜伏感染是猪伪狂犬病防治和净化工作中的重要障碍之一。本研究用伪狂犬病毒（PRV）gG-/LacZ＋标记毒株感染经过PRV灭活疫苗免疫的PRV阴性仔猪,建立了猪伪狂犬病毒潜伏感染动物模型,再用地塞米松激活PRV在猪体内的潜伏感染。运用免疫组织化学SABC染色法研究了PRV在潜伏感染猪和潜伏感染激活猪体内部分组织的分布情况。结果显示,阳性细胞主要分布在神经系统的大脑、小脑、脑干、三叉神经和视神经以及非神经系统的扁桃体、肺和肾等部位。阳性细胞数量随着攻毒后时间的发展呈现减少的趋势,而注射地塞米松后,阳性细胞数量在上述组织中显著增加。