SOE PCR重构SLA-Ⅰ复合体研究

利用剪接重叠延伸PCR(SOE PCR)技术,中间加一富含甘氨酸/丝氨酸的linker(G4S)3,将SLA-Ⅰ重链基因SLA-2和轻链基因β2m连接,形成复合体基因链SLA-2-(G4S)3-β2m,然后将复合体基因链克隆入p2X表达质粒,导入受体菌TB1并进行表达。结果显示,利用SOE PCR技术成功得到了复合体基因链SLA-2-(G4S)3-β2m,并且克隆入p2X载体。SDS-PAGE检测表明,复合体基因导入宿主菌后获得了融合蛋白MBP-SLA-2-(G4S)3-β2m,大小为84.1 ku。试验结果为今后在体外进行相关基因重组表达提供参考。     

动物学野外实习教学改革与实践

随着高校竞争的加强,长江师范学院定位于由过去教学科研型转向教学应用型大学,传统的动物学野外实习模式已经不能适应新形势下的教学要求,为了取得令人满意的野外实习效果,基于作者自身的教学实践,对长江师范学院动物学野外实习地点、教学方式、教学内容以及考核方式的改革进行了探讨,以期为其他高校的动物学野外实习教学提供借鉴和参考。     

6种植密度对玉草1号产量与品质的影响

研究了种植密度对玉草1号产量、品质及植株性状的影响。结果表明,45 000与52 500株/hm2 2种密度的总鲜草产量差异不显著（分别为128 944和133 167 kg/hm2）,但二者均显著的高于密度为37 500株/hm2的总鲜草产量（117 370 kg/hm2）;但这3种密度处理的总干草产量差异不显著。分析这3种密度间各品质指标、植株性状指标总体表现,结果密度为37 500株/hm2的粗蛋白（CP）含量、CP产量、相对饲用价值（RFV）、分蘖数、总茎粗、干物率均为最高,密度为45 000株/hm2次之,处理52 500株/hm2最低;中性洗涤纤维（NDF）含量密度为37 500株/hm2最低,52 500株/hm2最高。综合产量与饲用品质比较研究表明,玉草1号种植密度为45 000株/hm2左右在我国南方最适宜。     

应用反转录聚合酶链式反应检测鸡Th1样淋巴因子mRNA表？…

应用反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和限制性酶切分析技术对鸡脾细胞体外受到有丝分裂原ＣonＡ刺激的情况下,其Ｔh1样淋巴因子mＲＮＡ的表达水平进行了研究。实验结 果表明,ＣonＡ诱导培养３个小时的鸡脾细胞表达α－干扰素（ＣhＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＣhＩＦＮ－γ）和白细胞介素－２（ＣhＩＬ－２）等鸡的Ｔh1样淋巴因子mＲＮＡ 。未诱导但培养了３小时的鸡脾细胞可表达ＣhＩＦＮ－α和ＣhＩＦＮ－γmＲＮＡ,而未     

克伦特罗对绵羊肝脏血流量和氮代谢的影响

在4头门静脉、肝静脉、肠系膜静脉和股动脉上安装血管导管的绵羊中研究了克伦特罗（CL,0.8 mg/kgBW,肠系膜静脉给药,每天2次,连续5 d）对其肝脏生长代谢的影响。结果表明:CL对肝脏血流量影响较小。而在CL作用下绵羊血浆中尿素氮水平明显下降,肝静脉和门静脉血液尿素氮流量分别减少16.86％（P<0.01）和15.51％（P<0.05）。肝静脉多肽流量在CL处理期也较对照期下降38.71％（P<0.01）,门静脉处多肽水平处理期则与对照期相当。克伦特罗还增加绵羊肝脏IGF-I的合成和分泌,门静脉和肝静脉中的增加幅度分别为38.84％（P<0.01）和33.18％（P<0.01）。提示CL可通过增强对绵羊肝脏氮的储留及肝脏IGF-I的合成和分泌从而促进机体的生长代谢。     

Effects of Nano-Ceria on Activity and Gene Expression of Pancreatic Lipase in Hens

本文旨在建立胰脂肪酶实时荧光定量PCR检测方法的基础上研究纳米氧化铈对蛋鸡胰脂肪酶活性及基因表达的影响.试验选择26周龄健康商品蛋鸡384只,随机分为4组,每组8个重复,每个重复12只鸡.以玉米-豆粕型饲粮为基础饲粮,在基础饲粮中分别添加0(Ⅰ组)、30(Ⅱ组)、60(Ⅲ组)和90 mg/kg(Ⅳ组)的纳米氧化铈,试验期7周.结果表明:1)本试验建立的胰脂肪酶实时荧光定量PCR检测方法具有线性关系好,特异性、敏感性、重复性高等特点,可用于检测胰脂肪酶mRNA表达水平;2)Ⅲ组胰脂肪酶活性显著或极显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P ＜0.05或P＜0.01),胰脂肪酶mRNA表达水平显著高于其他各组(P＜0.05).由此得出,饲粮中添加60 mg/kg纳米氧化铈可显著提高蛋鸡胰脂肪酶活性,上调胰脂肪酶mRNA表达水平.     

东祁连山高寒草甸优势植物光响应特征

为研究高寒地区草地优势植物旺盛生长期光合特征,选取位于祁连山东段天祝藏族自治县抓喜秀龙乡的甘肃农业大学高山草原试验站围栏禁牧草地的矮嵩草(Kobresia humilis)、垂穗披碱草(Elymus nutans)、赖草(Leymus secalinus)、扁蓿豆(Melissitus rutenica)、黄花棘豆(Oxytropis ochrocephala)、二裂委陵菜(Potentilla bifurca)和麻花艽(Gentiana straminea)7种优势植物,利用GFS-3000便携式光合测定仪拟合了7-9月的光合-光响应曲线.结果显示:由于8月份的干旱,草地植物的光合能力受到严     

赛里木拉丝酸奶中优势菌株发酵乳对血管紧张素转化酶的抑制作用

利用改进的紫外分光光度法,测定从新疆赛里木拉丝酸奶中分离出的瑞士乳杆菌mb2-1、嗜热链球菌mb5-1以及马克斯克鲁维酵母Y6单菌和混菌发酵脱脂乳对血管紧张素转化酶抑制率。结果表明:瑞士乳杆菌mb2-1、嗜热链球菌mb5-1单菌发酵对血管紧张素转化酶抑制率48h达到最高,分别为70.75%、47.17%;与马克斯克鲁维酵母Y6混合发酵48h,对血管紧张素转化酶抑制率分别为75.68%和44.85%。     

H5N1亚型禽流感病毒A/Guangxi/1/2005株抗药机制的研究

为研究H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的抗药机制,本研究选取Clade2.3.4亚群中一株对金刚烷胺敏感的人源AIV A/Guangxi/1/2005(H5N1)(S-GX05),用抗流感病毒药物金刚烷胺对其进行定向诱导,筛选出一株抗药性病毒株,命名为R-A/Guangxi/1/2005(R-GX05)。通过全基因测序并与S-GX05全基因序列进行对比,结果显示S-GX05只在其M2蛋白中有一个氨基酸位点发生突变,即A30P;抗药性鉴定这两株病毒的半数药物抑制浓度(IC50)分别为0.9μM和48.9μM,表明R-GX05对金刚烷胺表现出一定程度的抗性。动物实验证实,这两株病毒对BALB/c小鼠的致病性基本一致,均表现出高致病性,其MLD50分别为4.7 log10 EID50和5.0 log10 EID50,两株病毒在小鼠体内各组织脏器中的分布及增殖能力也基本相同。这些结果表明,S-GX05在药物压力下产生抗药性后,并未引起其它生物学特性的改变。A30P的发现为进一步从分子水平上研究H5N1亚型AIV的抗药机制及新型抗流感新药的研发奠定了基础。     

Molecular cloning,chromosomal localization and expression pattern of porcine ADP‐ribosylation factor(Arf) gene family

Adenosine diphosphate‐ribosylation factors (Arfs) are a family of guanosine triphosphate‐binding proteins involved in fundamental biological processes including secretion, endocytosis, phagocytosis, cytokinesis, cell adhesion and tumor cell invasion. We report here the molecular cloning, chromosome localization and expression analysis of porcine Arf1–6, of which Arf1–3 (Class I) have >93% similarity to each other and encode nearly similar proteins with 181 amino acids in length. Arf4 and Arf5 (Class II) are 78–81% homologous to Class I Arfs and both encode a protein of 180 amino acids, Arf6 (Class III) shows 64–68% homology to the other Arfs and encodes 175 amino acids. With radiation hybrid mapping, porcine Arf1–6 are assigned to chromosomes 14q21‐q22, 12p14, 5p12‐q11, 13q21.1, 18q24, 1q21‐q27, respectively. Moreover, real‐time quantitative RT‐PCR assays show that porcine Arf1‐6 are ubiquitous in all tissues examined, with the highest levels in the kidney and stomach and the lowest in muscle and the heart. This is the first report of molecular characterization of the Arf gene family in pigs.