添加阿拉伯半乳聚糖或聚蔗糖对牛取样胚胎冷冻效果的影响

胚胎取样后由于透明带受损、细胞数减少使得冷冻存活率低于常规胚胎,本试验通过在冷冻液中添加聚蔗糖和阿拉伯半乳聚糖分析其对取样胚胎冷冻效果的影响。通过将各种冷冻液的胚胎回收率、培养24和48 h发育率同对照组进行比较,结果发现,在阿拉伯半乳聚糖系列冷冻液中,0.03 EAS₁冷冻效果最好;在聚蔗糖系列冷冻液中,0.6 EFS₁冷冻效果最好,且移植妊娠结果同培养结果一致。     

锌、铁和维生素A互作对肉仔鸡血清和肝脏抗氧化效应的影响

试验选用360只健康1日龄艾维茵肉仔鸡(公、母混养),采用2×2×3三因子析因化设计,将360只试验雏鸡随机分成12组,每组设3个重复,每个重复10只鸡。锌的添加浓度为50、100mg/kg,铁的添加浓度为30、60mg/kg,维生素A的添加浓度为1500、3000、6000IU/kg。测定了肉仔鸡血清、肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,过氧化氢酶(CAT)活性、铜锌超氧化物歧化(酶CuZn-SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,以此来研究不同水平的锌、铁、维生素A同时添加,三者在肉仔鸡血清、肝脏抗氧化功能方面的互作效应。结果表明:锌、铁与维生素A三者互作对提高肉仔鸡血清CuZn-SOD活性影响极显(著P<0.01),对提高肉仔鸡肝脏GSH-Px活性和降低MDA含量影响极显(著P<0.01)。这说明锌、铁、维生素A三者之间在肉仔鸡抗氧化方面存在协同效应。     

鸡血型系统对马立克氏病肿瘤形成的影响

采用 Ａ、 Ｂ、 Ｃ、 Ｄ 血型系统的１０ 种血型因子试剂测定了亚发雏鸡的血型, 并对马立克氏病肿瘤病变与各血型因子的关系进行了研究。结果表明, 在１４ 日龄感染雏鸡的３０ ～６０ 天内, Ｍ Ｄ Ｖ 对各个器官肿瘤病变形成上, 不同的血型系统因子对其影响有很大的差异, 其中带有 Ａ３０８ 、 Ｂ６９１ 因子的雏鸡对 Ｍ Ｄ Ｖ 较易感, 而带有 Ｂ３６５ 因子的雏鸡抗性较强。同样实验还表明, 采用鸡的（ Ｍ Ｈ Ｃ） Ｂ Ｆ Ｉ Ｖ 血型分型试剂与 Ａ、 Ｂ、 Ｃ、 Ｄ 血型试剂检测人工感染 Ｍ Ｄ Ｖ６０ 天后存活鸡表明： Ｂ３６５ 与 Ｂ２１ 均１００ ％ 存在于这些鸡中, 说明二者抗 Ｍ Ｄ 能力有一定的相似性; 说明 Ａ、 Ｂ、 Ｃ、 Ｄ 血型因子可做为选择标记用于抗 Ｍ Ｄ 选育。     

用于构建双价禽流感DNA疫苗的双目的基因表达质粒的构建及鉴定

为探索构建禽流感双价或多价DNA疫苗的可行性,本研究以本实验室前期研制的禽流感DNA疫苗p CAGGopti HA5为基础[其中含有禽流感病毒(AIV)A/Goose/Guang Dong/1/96(H5N1)的HA基因],将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)报告基因作为第二个目的基因,利用双启动子启动、内部核糖体进入位点(IRES)介导以及通过蛋白Linker编码序列连接融合表达两个目的基因的形式,构建了双启动子重组表达质粒pH5-eGFP、IRES介导的重组表达质粒pHIE以及融合表达重组质粒pH6E。并采用脂质体介导将这3种重组质粒分别转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验和western blot方法检测HA和eGFP这两种目的蛋白的瞬时表达情况。结果显示,这3种重组质粒均能够正确表达AIV的HA蛋白和eGFP。其中pH5-eGFP表达出两个独立的目的蛋白,而且互相不影响各自的表达和细胞定位;pH6E则以融合形式表达两种目的蛋白,由于HA蛋白具有膜定位信号,所以融合蛋白主要定位于细胞膜上。本研究结果表明,双启动子表达质粒和双目的蛋白融合表达质粒适合用于构建AIV以及其他相关病原的双价DNA疫苗。     

不同时间段柞蚕卵主要性状的差异

对辽蚕582、9906、抗大三个品种的不同产卵时段的柞蚕主要性状进行分析,得出第一昼夜卵具有更优良的经济性状,更有利于柞蚕良种繁育。秋季卵期调查中,三个柞蚕品种第一昼夜卵平均不受精卵数和平均卵重均优于第二昼夜卵。秋季放养调查中,三个品种第一昼夜卵平均发病率和产茧重量均优于第二昼夜卵。结果显示第一昼夜卵其主要性状均好于第二昼夜卵,因此选留第一昼夜卵放养,在柞蚕繁育过程中可达到抗病、抗逆及高产的要求。     

猕猴A群链球菌感染的调查与控制

2002年3月—2003年4月，广东某地多个猕猴养殖场猕猴发生传染性肺炎和出血性胃肠炎，部分猕猴因此而死亡。经病原学检查，证实病原主要为A群链球菌，2个养殖场为A群链球球和普通变形杆菌混合感染。通过使用恩诺沙星治疗发病动物、使用链球菌灭活疫苗进行免疫、场舍定期消毒，有效地控制了疾病。现报道如下。     

青海省2005年草原虫害防治存在问题及建议

青海省农牧区由于春季干旱、夏季多雨等原因,导致害虫发生种类多、面积大、分布广;主要危害种类为草原毛虫、草原蝗虫、古毒蛾及草地螟.本文针对防治工作存在经费不足、规模小、器械落后、成本高、孵化期差异性大等问题,科学地提出了今后进一步加强虫防工作的建议.     

新生羔羊瘤胃PGP9.5、一氧化氮合成酶和乙酰胆碱酯酶阳性神经元定位分析

应用连续组织切片,采用免疫荧光染色的方法,使用3种抗体:蛋白基因产物9.5(PGP9.5)、一氧化氮合成酶(NOS)和乙酰胆碱酯酶(AChE),分别对新生羔羊瘤胃内的所有神经元、氮能和胆碱能神经元进行定位分析。结果:PGP9.5、NOS和AChE阳性反应广泛分布于神经元胞体和神经纤维中。阳性神经元胞体在黏膜下未发现,但成群出现在肌间神经节内。阳性神经元胞体数目PGP9.5最多,其次是胆碱能,氮能最少。阳性神经纤维成簇分布在神经节内和节间形成神经束,并且延伸到环纵肌内。阳性神经纤维密度PGP9.5最多,其次是氮能,胆碱能最少。另外,一些阳性神经纤维经常围绕在血管周围,甚至延伸入瘤胃上皮。PGP9.5、NOS和AChE神经元和纤维在新生羔羊瘤胃内有广泛的分布,该结果提示其分布模式可能与功能的适应直接相关。     

家蚕核糖体的提取及其Sarcin/Ricin结构域的初步鉴定

用超速离心结合密度梯度离心法从蚕蛹中提取家蚕80S核糖体,经尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果表明家蚕核糖体的RNA同大鼠核糖体RNA在序列长度上有明显差异,家蚕5.8S rRNA高于大鼠5.8S rRNA,而家蚕5S rRNA的序列长度则略低于大鼠。用核糖体失活蛋白R ic in分析鉴定家蚕核糖体的Sarc in/R ic in结构域,结果是家蚕Sarc in/R ic in结构域比大鼠Sarc in/R ic in结构域离28S rRNA的3′末端更近。     

犬IFN-α优化基因的真核表达及抗病毒活性的研究

本研究根据酵母系统密码子的偏嗜性,对成熟蛋白基因核苷酸序列进行密码子偏嗜性改造,利用毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC来表达犬IFN-α成熟蛋白基因。并采用非洲绿猴肾细胞(Vero) -水疱性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法为基础来测定重组犬α干扰素的效价,同样方法测定了表达产物对PRV和CDV的抑制作用。本试验实现了犬α干扰素在酵母中的高表达,表达量高达58 mg/L,SDS-PAGE检测大小约为24 ku,比预测分子质量大,推测发生了糖基化。表达产物具有较强的种属特异性,在Vero细胞上对PRV具有较高的抗病毒活性,达到了3.6×10⁷ U/L,对CDV也有很好的抑制作用。本研究为犬IFN-α以后的临床应用研究奠定基础。