转基因延熟番茄"华番一号"的品系特异性检测方法

本文使用反向PCR方法克隆了转基因延熟番茄"华番一号"(Bioscein)的外源基因和番茄基因组之间的一段边界序列,并依据此段序列设计了具有品系特异性的引物和荧光探针,以实时荧光PCR技术建立了华番一号的品系鉴定检测方法,扩增片段长108bp,横跨在Nos启动子和番茄基因组之间.以转基因大豆(RR)、转基因玉米(Mon810)、转基因抗草甘膦油菜、转基因棉花(保龄棉)、非转基因番茄、马铃薯、茄子、大椒、大米、小麦、烟草等为试材,证明本方法同其它转基因作物及其它蔬菜无非特异性反应.本方法在检测华番一号番茄时,相对检测灵敏度可达到0.1%,绝对灵敏度达到20个拷贝.由于本方法的PCR扩增产物长度只有108bp,因此该方法也可以用于检测加工产品中的转基因成分,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法.     

河北和山东鸭梨果实上链格孢菌鉴定

为了查清造成鸭梨果实储藏期黑斑病的链格孢Alternaria的种类,从其产孢表型、分生孢子特征和分子生物学等方面对分离的链格孢菌进行了研究.经对分离到的188支Alternaria菌株的形态学鉴定,共确定了3个种,即链格孢Alternaria alternata、细极链格孢A.tenuissima和侵染链格孢A.infectoria,比例分别为41.0%、54.8%和1.6%.分子生物学研究结果表明,Altemaria大孢子种彼此间及大孢子种与小孢子种之间可以根据ITS和gpd序列差异明确区分;而供试的多数小孢子种在ITS和gpd序列上差异很小,无法区分.     

PCR—ELISA在转基因产品检测中的应用

PCR－ELISA法以共价交联在PCR管壁上的寡核苷酸作为固相引物进行PCR扩增，PCR产物通过杂交和凝胶电泳双重检测，结果通过酶标仪直接输出，无人为误差。该方法灵敏度高，可靠性强，易于操作，自动化和程度高，适于批量检测，是适合推广的1种快速转基因检测方法。     

永州市杉木林碳贮量及碳贮潜力分析

基于2014年永州市森林资源调查统计数据,利用生物量相对生长方程与转换系数之间的关系,估算永州市杉木林碳贮量及碳贮潜力,为永州市杉木林可持续经营和生态功能区划提供科学依据。结果表明:2014年永州市杉木林现存碳贮量为8.62×106 t,成熟林碳贮量最高,为2.27×106 t。如果采取合理经营措施,永州市杉木林的碳贮量可增加到17.73×106 t,为目前杉木林碳贮量的2.1倍;幼龄林碳贮量增加最多,为实际值的2.9倍。未来10年永州市杉木林的碳贮量可达到15.98×106 t,增加7.36×106 t。可见,永州市杉木林具有较大的碳贮潜力。加强现有杉木林尤其是中幼龄林的经营管理,调整杉木林龄组面积结构,适当限制采伐近熟林、成熟林和过熟林,可充分发挥杉木林的碳贮潜力。     

番茄环斑病毒5''RNA1保守片段的克隆及病毒检测

提取感染番茄环斑病毒Tomato Ringspot Nepovirus(TomRSV)的番杏(Tetragonia Expansa)和葡萄品种赤霞珠(Vitis.cv.Cabernet Sauvignon)嫩叶及其阴性对照的总RNA，根据NCBI中报道的TomRSV病毒四个分离物RNA1 5’端保守片段设计引物，对提取的总RNA进行RT-PCR扩增，获得长450bp特异性片段，并克隆到PMD18-T载体中构建PT-TomRSV重组载体。以PT-TomRSV载体为阳性对照，以无毒赤霞珠叶片为阴性对照，对带毒赤霞珠葡萄叶片作番茄环斑病毒巢式PCR检测。     

多学科结合的新型农业技术推广体系探索

在实施“河北省第三次夏谷良种更新工程”的过程中,将生态区划理论和品种发育规律、栽培技术、新型推广模式研究及良种繁育等多个技术领域结合一起,探索出了一套新型农业技术推广体系,取得了较好的效果。其技术体系主要包括:①依据生态条件,将项目区划分为若干生态类型区;②筛选适宜的推广品种等技术主体;③进一步揭示主推品种在各类型区的特征特性和生育规律;④进行不同品种在各类型区的配套栽培技术研究;⑤探索切实可行的农技推广新模式。     

短周期良种马尾松制浆造纸性能研究

采用经过多年度多重复选择改良的良种马尾松幼龄材与一般马尾松成熟材进行造纸性能比较研究。试验结果表明，采用良种马尾松幼龄材制浆造纸是可行的，且比用一般成熟材具有更好的经济效益，并初步确定了短周期良种马尾松造纸用材的最佳树龄。     

间接免疫荧光显微术检测泡桐丛枝病原MLO的研究

以感染类菌原体ＭＬＯ的泡桐组培苗为病原繁殖材料，采用差速离心和Ｐｅｒｃｏｌｌ不连续密度梯度离心来提纯ＭＬＯ作为免疫抗原制备兔抗血清。抗血清经健康汁液吸收后，作为第一抗体，用异硫代氰酸荧光素ＦＩＦＣ标记的羊抗兔免疫球蛋白作为第二抗体，进行间接免疫荧光显微镜检查染病组织中的ＭＬＯ特异性荧光。经与ＤＡＰＩ染色技术比较，找出了适宜的徒手切片和减少非特异性反应的途径。此技术具有灵敏度高、特异性强和测定简便等特点。适用于ＭＬＯ组织定位、组培苗脱毒效果评估、病原株系鉴定和病害检疫等。     

新疆农村非正规金融借贷行为特征分析

调查了新疆400个农户家庭的非正规金融借贷数据,从非正规金融借贷的总体趋势、利率、期限和手续4个方面分析新疆农村非正规金融借贷的行为特征,总结了新疆农村非正规金融借贷的特点。     

RT－PCR检测李坏死环斑病毒的研究

为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒(Ｐｒｕｎｕｓｎｅｃｒｏｔｉｃｒｉｎｇｓｐｏｔｖｉｒｕｓ,ＰＮＲＳＶ) ,根据该病毒ＲＮＡ 3序列设计引物 ,对感病和健康组织总ＲＮＡ进行ＲＴ—ＰＣＲ ,结果从感病组织中扩增出了大约 450ｂｐ的目的版段 ,而健康组织中无此扩增带。将此ＰＣＲ产物连接到ｐＧＥＭ -Ｔ -ｅａｓｙ载体 ,转化大肠杆菌ＤＨ5α菌株 ,得到了含有目的片段的重组子 ,并采用双脱氧终止法进行序列分析 ,结果与美国报道的李坏死环斑病毒 (ＰＮＲＳＶ)ＲＮＡ 3序列对应部分核苷酸基本一致 (其同源性达93 6%) ,这表明应用ＲＴ -…